미생물로부터 고분자 물질을 생산하여 기능성 식품보조제로 사용하기 위한 일환으로 고점성의 biopolymer를 생산하는 균주를 분리하고 이 분리균에 대한 분류학적 성질 및 생성 biopolymer의 이화학적 성질을 조사하였다. 분리 균주는 Bacillus coagulans로 동정되었으며 Bacillus cuagulans CE-74라 명명하었다. Acetone과 ethanol 처리를 하여 crude biopolymer를 얻었으며, crude biopolymer를 DEAE-cellulose ion exchange cromatography, Sephadex G-100 및 Sepharose CL-2B를 사용하여 fraction I과 fraction II 두 분획을 분리 정제하였다. 분리된 분획의 구성 성분을 분석한 결과 당 성분은 검출되지 않았고, 아미노산 분석을 실시한 결과 fraction I은 lysine만으로 구성되어 있었으며, fraction II는 glutamic acid만이 검출되었다. 분자량은 fraction I은 약 42kD, fraction II는 약 $1.6{\times}10^3\;KD$로 추정되었다.
Tan, B.K.;Foo, H.L.;Loh, Teck Chwen;Norhani, A.;Zulkifli, I.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제18권12호
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pp.1780-1785
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2005
Very low density lipoprotein (VLDL) of commercial broiler (CB) and crossbred village chicken (AK) was purified using Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC). The fraction collected was then confirmed as VLDL using 4% polyacrylamide gel electrophoresis and transmission electron microscopy (TEM). The particle size of VLDL is 46.8${\pm}$8.6 nm. The VLDL fraction was then subfractionated and the apolipoprotein (apo) profile was studied by sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE). The CB and AK have almost similar types of apo in both subfractions 1 and 2. The AK showed the presence of apoAI, AIV, D and E whereas the CB had apo AIV, D, E and H. The apo AIV and apo E were present in both subfractions of AK and CB.
Chitooligosaccharides 혼합물을 처리한 벼 세포 현탁배양액과 처리하지 않은 배양액의 단백질 및 효소활성을 비교하여 이 elicitor에 의해 유도되는 chitinase를 확인하였다. Chitooligosaccharide 혼합물 처리로 chitinase 활성은 비처리구에 비하여 3.5배 증가하였으며 증가율이 단백질 증가보다 10배 이상 높아 본 효소가 선택적으로 유도되는 것으로 나타났다. Polyacrylamide gel 전기영동상 나타나는 총 11종의 chitinase중 4종이 유도효소로 판명되었으며 DEAE-cellulose chromatography 결과 3개는 $26{\sim}58\;KD$의 분자량을 가진 acidic chitinase 분획에, 나머지 1개는 basic chitinase 분획에 속한 것으로 나타나서 주로 acidic chitinase가 유도되는 것으로 확인되었다.
We previously reported that the butanol (BuOH) fraction of the head of Panax ginseng exhibited gastroprotective activity in peptic and chronic ulcer models. In order to identify the active constituent, an activity-guided isolation of the BuOH faction was conducted with a HCI$.$ethanol-induced gastric lesion model. The BuOH fraction was passed through a silica-gel column using a chloroform-methanol gradient solvent system, and six fractions (frs. 1-6) were obtained. The active fr. 5 was further separated by silica-gel column, to yield 6 subfractions (subfrs. a-f). Subfr. d was composed of ginsenosides Re, Rc and $Rb_1$. The most active constituent was ginsenoside $Rb_1$ ($GRb_1$), a protopanaxadiol glycoside, which was investigated for its anti-ulcer effect. Gastric injury induced by HCI$.$ethanol, indomethacin and pyloric ligation (Shay ulcer) was apparently reduced with oral $GRb_1$ doses of 150 and 300 mg/kg. $GRb_1$ at these dosage significantly increased the amount of mucus secretion in an ethanol-induced model. The anti-ulcer effects were consistent with the result of histological examination. These results suggest that the major active constituent in the head of Panax ginseng is $GRb_1$ and that anti-ulcer effect is produced through an increase in mucus secretion.
Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis of the $60\%$ isopropanol extract of soybean(Glycine max [L.] Merr.) seed revealed two abundant proteins with molecular masses of 19 and 10 kDa. Amino acid analysis revealed that the isopropanol-extractable protein fraction was rich in cysteine. Two-dimensional gel electro-phoretic analysis indicated that the 19kDa and 10kDa proteins had pI of 4.2 and 4.0 respectively. Peptide mass fingerprints of trypsin digests of the two proteins obtained using matrix-assisted, laser desorption/ionization-time of flight (MALDI-TOF) mass spectroscopy revealed the 19kDa protein was Kunitz trypsin inhibitor and the 10kDa protein was Bowman-Birk proteinase inhibitor. When resolved under non-denaturing conditions, the isopropanol-extracted proteins inhibited trypsin and chymotrypsin activity. Results presented in this study demonstrate that isopropanol extraction of soybean seed could be used as a simple and rapid method to obtain a protein fraction enriched in Kunitz trypsin and Bowman-Birk proteinase inhibitors. Since proteinase inhibitors are rich in sulfur amino acids and are putative anticarcinogens, this rapid and inexpensive isolation procedure could facilitate efforts in nutrition and cancer research.
Antimutagenic effects of kale juice on the mutagenicity induced by $B_{1}(AFB_{1})$ N-methyl-N'-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Salmonella assay system were studied. The freeze dried kale juice significantly reduced the mutagenicity induced by $AFB_{1}$ in Salmonella typhimurium TA100 and TA98. However, the kale juice exhibited less inhigbitory effect on the mutagenicity induced by MNNG as the concentrations of the juice sample increased. Also, kale juice after dialysis (>12,000, Mw) appeared to have 42.3∼89.5% of inhibitory effects against $AFB_{1}$, however, the dialyzate did not show any inhibitory effect against MNNG. To separate and identify the antimutagenic compounds from the kale juice, the dialyzates were further fractioned by using Sepharose CL-6B-200 gel filtration. Fraction number 13 showed the strong antimutagenic activity against $AFB_{1}$, and the fraction exhibited positive results of a characterized colour reactions of protein, carbohydrate and phenolic compound. Therefore, one of the possible active compounds from the kale juice was supposed to a glycoprotein(Mw. 270,000) which seemed unstable with heating.
산겨릅나무(A. tegmentosum)의 성분 연구를 위하여 줄기를 MeOH로 추출하여 $CH_2Cl_2$, n-BuOH 및 $H_2O$ 순으로 분획하였다. n-BuOH fraction에 대하여 silica gel과 RP-18 column chromatography를 행하여 2종의 화합물을 분리하였다. 이들 화합물의 구조는 spectral data를 문헌치와 비교하여 methyl gallate $4-O-{\beta}-D-glucoside(1)$와 salidroside(2)로 동정하였다. 이들 화합물은 산겨릅나무에서 처음으로 분리되었다.
Poly(vinyl acetate) films containing benzophenone were photocrosslinked by continuous UV irradiation.UV irradiation of PVAc film containing 5% benzophenone induced bulk crosslinking of the polymer indicated by 84.1% of gel fraction after ethyl acetate extraction. The crosslinking was attributed to the recombination of tertiary polymer radicals generated upon UV irradiation, which was enhanced by the hydrogen abstraction of benzophenone. Also the UV irradiation resulted in scission of ester linkage and photooxidation of PVAc surface, which was verified by ATR and zeta potential analysis, implying that the PVAc surface became more polar and hydrophilic. The zeta potential proportionally increased from +4.5mV to -26.8 mV with increasing UV irradiation. Also the surface energy of the PVAc film increased with higher UV irradiation upto 56.5 $mJ/m^2$ by the enhanced Lewis acid/base component with larger contribution of Lewis acid parameter. Accordingly the crosslinked PVAc showed higher thermal stability with increasing UV energy.
The bovine serum factor influencing the growth of swine testicle (ST) cell and the END effect of hog cholera SN test was studied. Throughout the experimental studies. following results were obtained and summarized. 1. Bovine whole serum of 16(76.2%) and 4(19.0%) samples out of 21 have shown a positive ST cell growth and the END effect, respectively. However, all of 21(100%) and 8(38.1%) samples out of 21 serum supernatant fractions, prepared from the bovine whole serum, have shown positive ST cell growth and END effect, respectively. 2. In the SDS-polyacrylamide gel electrophoretic analysis of the bovine whole serum and the supernatant fractions, ST cell growth inhibiting factor was proved present in globulin fraction and in whole gel plate as a diffusible component. 3. The END ineffective component present in the whole serum and its supernatant fraction was proved to be BVDV neutralizing antibody. 4. The difference of osmolarity, optical density, pH, degree of precipitant formation following heat cold treatment, A/G ratio as we11 as electrophoretic pattern and NDV SN index of the samples were not correlated to the degree of 57 cell growth and to the END effectiveness.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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