After overproduction of a recombinant $\beta$-galactosidase of Bifidobacterium infantis in Pichia pastoris, a synthesis of galacto-oligosaccharides (GOS) from 36% lactose using the enzyme (170.74 U/mg) was investigated. The transgalactosylation ratio reached up to 25.2% with 83.1% conversion of initial lactose and the maximum yield of GOS was 40.6%. The GOS syrup was composed of a 13.43% galacto-oligosaccharides, 5.06% lactose, and 8.76% monosaccharides. The prebiotic effect of GOS on the growth of bifidobacteria and lactobacilli strains was investigated in vitro. The maximum growth rate of Bifidobacterium breve and Lactobacillus acidophillus in GOS syrup (5%, v/v) media were 0.49 and 0.96/hr that are higher than those in 1%(w/v) galactose and 1%(w/v) lactose containing media. However, there was no significant difference between the specific growth rates of L. acidophillus in 1%(w/v) glucose and 5%(v/v) GOS syrup. Our data showed that GOS definitely promoted the growth of B. breve ATCC $15700^T$ and L. acidophilus ATCC 33323.
Santoso, B.;Kume, S.;Nonaka, K.;Kimura, K.;Mizukoshi, H.;Gamo, Y.;Takahashi, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권4호
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pp.534-540
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2003
This study was conducted to investigate the effect of supplementation of galacto-oligosaccharides (GOS) on methane emission, nutrient digestibility, energy utilization and blood metabolites by Holstein cows fed silages. In two sequential digestion and respiratory trials, two non-lactating Holstein cows were arranged to a balanced incomplete block design. Experimental diets consisted of two silage types; orchardgrass (Dactylis glomerata L.) based silage (OS), mixed silage (orchardgrass based silage and alfalfa (Medicago sativa L.) silage) (MS), while two GOS levels were without supplementation (0) and 2% of dry matter intake supplementation (2). Four combination diets were OS-0, OS-2, MS-0 and MS-2. Significant effects of silage types and GOS supplementation levels were not observed for DM and OM intake. Whereas the digestibility of OM, NDF and ADF was significantly (p<0.05) higher in cows fed OS with and without GOS compared cows fed MS diets. As percentage of GE intake, fecal energy loss for OS diets was significantly (p<0.05) declined than for MS diets. In contrast, cows fed MS diets had lower (p<0.05) urine energy loss as a proportion of GE intake compared to OS diets. Energy loss as CH4 and heat production was numerically increased when cows fed both OS and MS with GOS supplementation. Compared to OS, CH4 emission in cows fed MS was numerically decreased by 10.8 %. Methane conversion ratio (energy loss as CH4 per unit of GE intake) for OS-0, OS-2, MS-0 and MS-2 were 7.1, 7.2, 6.8 and 7.0, respectively. Plasma of glucose and urea-N concentration were significantly (p<0.05) elevated from 1 h to 6 h after feeding, otherwise total protein in plasma was declined (p<0.01) at 6 after feeding.
Mwenya, B.;Zhou, X.;Santoso, B.;Sar, C.;Gamo, Y.;Kobayashi, T.;Takahashi, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권3호
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pp.349-354
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2004
The effects of probiotic-vitacogen and galacto-oligosaccharides (GOS) supplementation on methanogesis, energy and nitrogen utilization in replacement dairy cows were evaluated. A basal diet comprising orchardgrass hay, lucerne hay cube and concentrate (2:2:1, DM basis) were fed with or without supplements to four cows at $80g\;DM/kgBW^{0.75}$per day in a $4{\times}4$ Latin square arrangement. The four treatments were; 1) basal diet, 2) basal diet plus 100 g probiotic-vitacogen, 3) basal diet plus 50 g GOS, 4) basal diet plus 50 g GOS and 100 g probiotic-vitacogen. Nutrient apparent digestibility was not altered by the effect of supplementation. Nitrogen intake was significantly (p<0.001) higher for the two vitacogen-supplemented diets compared to control and GOS supplemented diets. However, vitacogen supplemented diets had numerically higher fecal and urinary nitrogen losses, thereby, having lower nitrogen retention compared to control and GOS supplemented diets. Gross energy intake was also significantly (p<0.05) higher for vitacogen-supplemented diets compared to control and GOS diets, however, due to higher losses in feces, urine, methane and heat, GOS supplemented diet had numerically higher energy retention. There was an 11% reduction in methane emission (liters/day) in GOS supplemented diet compared to control diet. However, the combination of GOS with vitacogen resulted in an increased methane emission. When expressed per unit of animal production (g/kg live-weight gain), methane production tended to be lower in vitacogensupplemented diets compared to control and GOS diets. The supplementation of replacement dairy cows with GOS reduced methane emission (liters/day), while, vitacogen supplementation reduced methane emission per unit animal production. The two feed supplements may contribute to the abatement of methane as a greenhouse gas.
Galacto-oligosaccharides(GOS)는 프로바이오틱스 미생물의 성장을 증진시켜 인류 건강에 유익한 작용을 갖게 하는 프리바이오틱스이며 식품 산업에서 다양한 활용성을 갖는다. GOS는 보통 β-galactosidase에 의해 촉매 반응이 일어난 lactose로부터 생성된다. 한편, 세포 표면 발현은 살아있는 세포 표면의 펩타이드와 단백질을 세포의 기능성 성분에 융합시켜 발현시키는 것이다. 표층 발현 세포는 다양한 잠재적 이용가치를 갖는다. N 말단 부근에 위치하는 것으로 생각되는 Flo1p 응집 functional domain은 세포의 flocs로의 가역적인 응집을 유발하면서 α-mannan carbohydrates와 같은 세포벽 성분과 비공유결합을 한다. 한외여과한 유청을 농축, 분무건조한 유청막투과액(Whey Permeate, WP)을 이용하여 β-galactosidase 재조합 Pichia pastoris (P. pastoris) 로 표층 발현 처리 (surface engineering)하는 GOS의 합성법은 폐기물을 활용하는 새로운 효율적인 방법이라 할 수 있다.
Santoso, B.;Kume, S.;Nonaka, K.;Gamo, Y.;Kimura, K.;Takahashi, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권8호
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pp.1137-1142
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2003
In a balanced incomplete block design, two dry Holstein cows were used to investigate the effect of $\beta$ 1-4 galactooligosaccharides (GOS) supplementation on nitrogen (N) utilization, rumen fermentation and microbial N supply in the rumen. During the experiment, cows were fed four diets: orchardgrass (Dactylis glomerata L.) silage (OS), OS with GOS supplementation (OSG), OS mixed with alfalfa (Medicago sativa L.) silage (MS) and MS with GOS supplementation (MSG). GOS was supplemented at 2% of dry matter intake. Diets were fed at maintenance level of protein and energy. Results showed that N digestion was affected by silage and interaction of silage and GOS supplementation. Cows fed OSG had the highest N digested (p<0.05) followed by MS, OS and MSG. Supplementation of GOS to OS or MS diets tended to improve N utilization through reducing the N losses on dairy cows. There was no effect of GOS supplementation on rumen fermentation parameters (i.e. pH, $NH_3$-N and total VFA) at 1 h and 6 h after feeding. Compared to cows fed MS, cows fed OS silage had higher (p<0.05) allantoin excretion (80.8 vs. 67.1 mmol/d) and higher (p<0.05) total purine derivatives excretion (92.9 vs. 78.5 mmol/d). The microbial N supply in cows fed OSG was higher (p<0.05) than those fed OS, MS and MSG.
An enzyme ${\beta}$-galactosidase or ${\beta}$-galactohydrolase [EC3.2.1.23], commonly called lactase, mediates galacto-oligosaccharide (GOS) synthesis under conditions of high substrate concentrations. Also, lactase hydrolyzes ${\beta}$($1{\rightarrow}4$) lactose into glucose and galactose, the latter is successively transferred to free lactose to make various oligosaccharides via transgalactosylation. GOS is non-digestible to human digestive enzymes and has been used as a functional prebiotics. Among the 24 lactic acid bacteria (LAB) strains used, Lactobacillus paracasei YSM0308 was selected based on its exhibition of the highest ${\beta}$-galactoside hydrolysis activity, and the crude lactase was prepared for examination of reaction conditions to affect the GOS synthesis. Lactase activity was measured with a spectrophotometer using ONPG (o-nitropheyl ${\beta}$-D-galactopyranoside) method. Lactase activity was not detected in the culture supernatant and was mostly present in the cell pellet after centrifugation. Activity of the crude lactase preparation ranges from102 to 1,053 units/mL, with the highest activity determined for L. paracasei YSM0308. Optimal conditions for GOS synthesis are as follows: concentration of whey powder, pH, temperature, and time were 30%, pH 6.5-7.0, $30^{\circ}C$, and 4 h, respectively. The final GOS concentration was 19.41% (w/v) by the crude YSM0308 lactase, which was obtained from strain YSM0308 grown in the 10% (w/v) reconstituted whey-based medium.
Sar, C.;Santoso, B.;Gamo, Y.;Kobayashi, T.;Shiozaki, S.;Kimura, K.;Mizukoshi, H.;Arai, I.;Takahashi, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권1호
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pp.73-79
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2004
The objective of the present study was to determine whether ${\beta}$1-4 galacto-oligosaccharides (GOS) and Candida kefyr combined with nitrate as manipulators could suppress rumen methanogenesis without nitrate poisoning in sheep. Four rumen fistulated wethers were allocated to a $4{\times}4$ Latin square design. Nitrate (1.3 g $NaNO_3$$Kg^{-0.75}$body weight) with and without GOS and Candida kefyr were administered into the rumen through fistula as a single dose 30 min after the morning meal. GOS and Candida kefyr were supplemented by sprinkling onto the feed and through rumen fistula, respectively. The four treatments consisted of saline, nitrate, nitrate plus GOS and nitrate plus GOS plus Candida kefyr. Physiological saline was used as the control treatment. Compared to saline treatment, the administration of nitrate alone resulted in a very marked decrease in rumen methanogenesis and an increase in rumen and plasma nitrite production and blood methaemoglobin formation consequently causing a decline in oxygen consumption, carbon dioxide production and metabolic rate. When compared to nitrate alone, the simultaneous administration of nitrate with GOS decreased nitrite accumulation in rumen and plasma and nitrate-induced methaemoglobin, while retaining low methane production. However, GOS could not fully restore metabolic parameters reduced by nitrate. When compared to the simultaneous administration of nitrate with GOS, the simultaneous administration of nitrate with GOS plus Candida kefyr lowered rumen methanogenesis to a negligible level, but did not decrease rumen and plasma nitrite accumulation as well as blood methaemoglobin formation. Thus, these results suggest that combination of nitrate with GOS may be a potent manipulator to suppress rumen methanogenesis with abating the hazards of nitratenitrite toxicity in ruminants.
Oh, Nam Su;Kim, Kyeongmu;Oh, Sangnam;Kim, Younghoon
한국축산식품학회지
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제39권5호
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pp.725-741
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2019
In the current study, we first investigated a method for directly transforming lactose into galacto-oligosaccharides (GOS) for manufacturing low-lactose and GOS-enriched skim milk (GSM) and then evaluated its prebiotic potential by inoculating five strains of Bifidobacterium spp. In addition, fermented GSM (FGSM) was prepared using a potentially probiotic Lactobacillus strain and its fermentation characteristics and antioxidant capacities were determined. We found that GOS in GSM were metabolized by all five Bifidobacterium strains after incubation and promoted their growth. The levels of antioxidant activities including radical scavenging activities and 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase inhibition rate in GSM were significantly increased by fermentation with the probiotic Lactobacillus strain. Moreover, thirty-nine featured peptides in FGSM was detected. In particular, six peptides derived from ${\beta}$-casein, two peptides originated from ${\alpha}s_1$-casein and ${\kappa}$-casein were newly identified, respectively. Our findings indicate that GSM can potentially be used as a prebiotic substrate and FGSM can potentially prevent oxidative stress during the production of synbiotic fermented milk in the food industry.
BACKGROUND/OBJECTIVES: The dietary intake of foods with fermentable oligosaccharides, disaccharides, monosaccharides, and polyols (FODMAP) is known to adversely affect patients with irritable bowel syndrome (IBS). However, the effects of FODMAP have been studied predominantly among Western populations. This study aimed to identify foods high in FODMAP content which form a part of the Korean adult diet and obtain basic data for the preparation of IBS guidelines. SUBJECTS/METHODS: An online survey of 1,000 adults from the general population in the age group of 20 to 40 years was performed. Data from 787 participants (men, 386; women, 401) were analyzed. The general characteristics of the participants, health status, IBS diagnosis using the Rome III diagnostic criteria, semi-quantitative food frequency questionnaire findings, and food items causing symptoms were analyzed. RESULTS: Overall, 169 participants (21.5%) had IBS. The contribution of the FODMAP nutrients in both IBS and healthy groups was as follows: fructan > lactose > excess fructose > sorbitol > mannitol > galacto-oligosaccharides (GOS). The fructan intake was 4.6 ± 2.2 g/day and 4.3 ± 2.5 g/day in the IBS and healthy groups (P = 0.014), respectively. In the IBS group, the ratio of the intake of fructan to the total FODMAP intake was 39.5%, 29.8%, and 5.8% through onions, garlic, and bananas, respectively. CONCLUSIONS: Fructan was the FODMAP nutrient most consumed by Korean adults. Therefore, given the difference in the dietary habits of each country's population, the dietary guidelines for IBS should be country specific.
The suppressive effect of monensin as an ionophore-feed additive on enteric methane (CH4) emission and renewable methanogenesis were evaluated. To clarify the suppressive effect of monensin a respiratory trial with head cage was performed using Holstein-Friesian steers. Steers were offered high concentrate diets (80% concentrate and 20% hay) ad libitum with or without monensin, galacto-oligosaccharides (GOS) or L-cysteine. Steers that received monensin containing diet had significantly (p < 0.01) lower enteric CH4 emissions as well as those that received GOS containing diet (p < 0.05) compared to steers fed control diets. Thermophilic digesters at 55℃ that received manure from steers fed on monensin diets had a delay in the initial CH4 production. Monensin is a strong inhibitor of enteric methanogenesis, but has a negative impact on biogas energy production at short retention times. Effects of the activity of coprophagous insects on CH4 and nitrous oxide (N2O) emissions from cattle dung pats were assessed in anaerobic in vitro continuous gas quantification system modified to aerobic quantification device. The CH4 emission from dungs with adults of Caccobius jessoensis Harold (dung beetle) and the larvae of the fly Neomyia cornicina (Fabricius) were compared with that from control dung without insect. The cumulative CH4 emission rate from dung with dung insects decreased at 42.2% in dung beetles and 77.8% in fly larvae compared to that from control dung without insects. However, the cumulative N2O emission rate increased 23.4% in dung beetles even though it reduced 88.6% in fly larvae compared to dung without coprophagous insects. It was suggested that the antibacterial efficacy of ionophores supplemented as a growth promoter still continued even in the digested slurry, consequently, possible environmental contamination with the antibiotics might be active to put the negative impact to land ecosystem involved in greenhouse gas mitigation when the digested slurry was applied to the fields as liquid manure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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