An 8-year-old spayed female domestic shorthair cat was presented with a chief complaint of chronic nasal discharge and dyspnea. Physical examination revealed pyohemorrhagic nasal discharge, inspiratory dyspnea and stertor, and an enlarged right mandibular lymph node. Abnormalities of blood works and serum chemistry included mildly increased hematocrit, and globulin concentration. Serologic tests for FeLV and FIV, and a panel of polymerase chain reaction tests for Chlamydophila felis, Feline Calicivirus, Herpesvirus, Bordetella, Mycoplasma felis, and H1N1 influenza was all negative. Only radiographic finding showed increasing soft tissue density in the right nasal cavity and computed tomography disclosed soft tissue/fluid opacification in the right nasal cavity, paranasal sinus, and pharyinx along with slight deviation to the right of the osseous nasal septum. Focal lysis of ventral nasal septum was also suspected in CT scan. Cytological evaluation of fine needle aspirate smears of the enlarged mandibular lymph nodes revealed numerous fungal yeasts having variably thick capsule both extracellularly and intracellularly with low numbers of macrophages. Some yeasts showed narrow based budding, which was a consistent finding with Cryptococcus organisms. Serum protein electrophoresis was a polyclonal consistent with chronic infection and serum was submitted for a fungal serology panel test. In serologic tests Cryptococcus antigen titer was 1 : 32,768. In vitro culture was unsuccessful. Treatment was initiated with administration of fluconazole, clindamycin, and tocopherol. Clinical signs resolved within 3 days after the initial treatment. The cat was discharged and scheduled for periodic evaluation and continued therapy, but was lost to follow-up thereafter.
An, Tae Jin;Kim, Young Guk;Hur, Mok;Lee, Jeong Hoon;Lee, Yun Ji;Cha, Sun Woo;Oh, Sang Keun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.23
no.6
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pp.460-467
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2015
Background : The aim of the present study was to identify an effective physicochemical control method to reduce Fusarium species infestation in adlay (Coix lacryma-jobi L.) before and after harvesting. Methods and Results : We observed that prochloraz emusifiable concentrate and hexaconazol prochloraz emusifiable concentrate strongly inhibited the mycelial growth of 10 Fusarium species. Strong growth inhibitions and cell lysis were observed following treatment with 4% NaOCl solution. The total number of fungi detected were lower follwing treatment with thiophanatemethyl triflumizole wettable powder ($1.1{\times}10^4CFU/g$), hexaconazol prochloraz emulsifiable concentrate ($1.2{\times}10^4CFU/g$), carboxin thiram dustable powder ($1.6{\times}10^4CFU/g$) and prochloraz emulsifiable concentrate ($1.7{\times}10^4CFU/g$) than in the non-treated control ($7.7{\times}10^4CFU/g$). The reduction of Fusarium fungi varies with the concentration and soaking time of NaOCl solution. Fungal detection was not observed after soaking in NaOCl solution for 24 h and harmful effects were not observed for plant growth by NaOCl after soacking for 6 - 12 h. Conclusion : Soaking seed for 6 - 12 h in 4% NaOCl could be an effective method of disinfectant treatment for the control of Fusarium fungi in adlay seeds.
Two experiments were conducted to examine the effects of a range of concentrations of ruminal fluid ammonia ($NH_3$-N) on forage digestibility, microbial growth efficiency and the mix of microbial species. Urea was either continuously infused directly into the rumen of sheep fed 33.3 glh of oaten chaff (Exp. I) or sprayed onto the oaten chaff (750 g/d) given once daily (Exp. 2). Concentrations of $NH_3$-N increased with incremental addition of urea (p < 0.01). Volatile fatty acids (VFA) concentrations and 24 h in sacco organic matter digestibility in the rumen were higher when supplemental urea was given (p < 0.01). The (C2 + C4) : C3 VFA ratio was lower (p < 0.05) when $NH_3$-N was above 200 mgN/I. The fungal sporangia appearing on oat leaf blades were significantly higher when urea was supplemented, indicating that $NH_3$-N was a growthlimiting nutrient for fungi at levels of $NH_3$-N below 30 mgN/l. The density of protozoa was highest when $NH_3$-N concentrations were adjusted to 30 mgN/I for continuously fed ($4.4{\times}10^5/ml$) and to 168 mgN/1 for once daily feeding ($2.9{\times}10^5/ml$). Thereafter increasing concentrations of $NH_3$-N, were associated with a concomitant decline in protozoal densities. At the concentration of $NH_3$-N above 200 mgN/l, the density of protozoa was similar to the density of protozoa in ruminal fluid of the control sheep ($1.8{\times}10^5/ml$). The efficiency of net microbial protein synthesis in the rumen calculated from purine excretion was 17-47% higher when the level of $NH_3$-N was above 200 mgN/1. The possibilities are that 1) there is less bacterial cell lysis in the rumen because of the concomitant decrease in the protozoal pool and/or 2) microbial growth per se in the rumen is more efficient with increasing $NH_3$-N concentrations.
For the genetic development of more powerful antagonistic Pseudomom - YPL-1 as a biocontxol agent against soilborne plant pathogenic Fuaarium solani causing root rot of many important crops, mutants improving the productivity of chitinase were obtained by mutation with UV radiation or NTG treatment, P. stutzeri YPL-M26 (UV mutant) and P. stutzeri YPL-MI78 (NTG mutant) could improve the productivity of chitinase by 2.5 and 2.0 times, and its antifungal activity by 1.7 and 1.5 times, respectively. The antifungal mechanism of P. stutzeri YPL-M26 was caused by lysis of the fungal cell wall by hydrolytic enzymes such as chitinase. The antifungal activity of crude chitinase of P. stutzeri YPLM26 on the mycelial growth of F. solani was observed to be much higher than that of the original strain. The enzymes produced by P. stutzeri YPL-M26 were the same as the original strain in enzymatic properties such as optimal pH and temperature.
Antagonistic effects of Streptomyces species aganinst Fusarium solani causing ginseng root rot were investigated in terms of chitinase activity and growth inhibition in vitro. Among 131 isolates of streptomycetes obtained from ginseng cultivating soil, 9 isolates producing large clear zone around the colony on a chitin agar medium were selected for further study. All 9 isolates produced chitinase in a range from 0.10 to 0.38 U lysing cells of F. solani and inhibited germination of the conidia. In the ten-fold condentrated culture filtrate of S. alboniger ST59 and S. roseolilacinus ST129, the number of conidia of F. solane was reduced to about 20% of original count within 14 days. When S. alboniger ST59 and F. solani were grown simultaneously in the mineral saly medium, chitinase activity increased with incubation period, whereas mycelial volume of F. solani decreased. In a chitin added mineral salt medium, chitinase activity increased during the first four days and maintained steady level until the 8th day, and increased thereafter. S. alboniger ST59 lysed mycelia, conidia and even chlamydospores of F. solani. It is probable that the antagonistic activity of this streptomycete against F. solani is the lysis of fungal cell wall by streptomycete producing chitinase affected by antifungal substances.
Park, Mi-Jeong;Lee, Hyorim;Ryoo, Rhim;Jang, Yeongseon;Ka, Kang-Hyeon
The Korean Journal of Mycology
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v.49
no.4
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pp.455-467
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2021
Macrofungi are valuable resources as novel drug candidates, new biomaterials, and edible materials. Recently, genetic approaches pertaining to macrofungi have been continuously growing for their identification, molecular breeding, and genetic engineering. However, purification and amplification of fungal DNA is challenging because of the rigid cell wall and presence of PCR inhibitory metabolites. Here, we established a direct PCR method to provide a rapid and efficient method for PCR-grade macrofungal DNA preparation applicable to both conventional PCR and real-time PCR. We first optimized the procedure of lysis and PCR using the mycelia of Lentinula edodes, one of the most widely consumed macrofungal species. Lysates prepared by neutralizing with (NH4)2SO4 after heating the mycelia in a mixture of TE buffer and KOH at 65℃ for 10 min showed successful amplification in both conventional and real-time PCR. Moreover, the addition of bovine serum albumin to the PCR mixture enhanced the amplification in conventional PCR. Using this method, we successfully amplified not only internal transcribed spacer fragments but also low-copy genes ranging in length from 500 to 3,000 bp. Next, we applied this method to 62 different species (54 genera) of macrofungi, including edible mushrooms, such as Pleurotus ostreatus, and medicinal mushrooms such as Cordyceps militaris. It was found that our method is widely applicable to both ascomycetes and basidiomycetes. We expect that our method will contribute to accelerating PCR-based approaches, such as molecular identification, DNA marker typing, gene cloning, and transformant screening, in macrofungal studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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