어류의 면역반응에 대한 cadmium (Cd)의 영향을 분석하기 위하여 넙치 (Paralichthys olivaceus)를 각기 다른 방향으로 Cd에 노출시킨 후 특이적 면역반응의 변화와 Edrwrdsiella tarda KFE (E. tarda KFE)의 인위감염에 대한 저항성을 분석하였다. E. tarda KFE의 formalin killed cell (FKC)로 면역시키기 2주전부터 계속하여 실험 기간동안 침지법으로 Cd(20ppb)에 노출된 시험구는 노출되지 않은 시험구와 양성 대조구보다 혈청 내 특이 항체가가 빠르게 최고치에 이르렀으나, 감소속도는 노출시키지 않은 양성 대조구에 비하여 빠른 것으로 나타났다. 이러한 경향은 splenocytes를 ELISPOT-assay (enzyme-linked immunospot assay)를 이용하여 특이 항체 생성 세포 (specific antibody secreting cell, SASC) 수를 분석해 보았을 때에도 동일하게 나타났다. 그러나 면역 전 2주 동안만 Cd에 노출시킨 시험구에서는 혈청내 항체생성 결과와는 달리 증가된 SASC의 수를 보여 주었다. 그리고 면역 2주 전부터 실험 전기간동안 계속해서 Cd에 노출시킨 넙치를 대상으로 하여 E. tarda FKC 생균으로 인위 감염시켰을 때 100% 폐사율을 보여 주었다. 이것은 Cd에 지속적으로 노출된 어류에서의 방어 체계는 면역반응뿐만 아니라 독성효과도 함께 고려되어야 하는 복합적인 것임을 확인 할 수 있었다.
경골어류의 비장과 두신에 분포하는 대식세포의 탐식과정 및 탐식활력에 상응한 Melano - Macrophage Centers (MMCs)의 형태학적 변화가 갖는 병리학적 의의를 규명하기 위하여, 어체의 면역활성상태의 변화를 인위적으로 야기한 털라피아, Oreochromis niloticus 에 콜로이드성 탄말을 주입하여 비장 및 두신 MMCs의 병리조직학적 변화에 대한 추이를 경시적으로 추구하였다. 면역활성상태의 변화를 야기할 목적으로 Edwardsiella tarda 유래 formalin killed cell(FKC) 및 lipopolysaccharide (LPS)를 복강내 주사하거나, dexamethasone을 경구투여하였다. 각 처치군에서 모든 틸라피아의 비장 및 두신에 분포하는 대식세포의 탄말탐식유형이나, MMCs와 관련한 탄말탐식세포의 이동상은 유사하였으나, 경시적으로 본 대식세포의 탐식활력과 기존 MMCs 또는 새롭게 형성된 탄말함유세포의 응집유형에 있어서는 무처치군을 포함한 처치군간에 큰 차이를 나타내었다. 무처치군에서는 비장과 두신에 있어 다소 차이는 있으나, 두신의 경우, 탄말투여 12일이 지나서야 MMCs 내의 집적정도가 치밀하였다. 이에 반해 2 가지의 세균유래 항원을 처치한 군에서는 탄말투여 8 일째에 탄말이 기존 MMCs 내로 치밀하게 집적하거나, 탄말함유세포로만 구성된 치밀한 집괴형상을 완료한 반면, dexamethasone 을 처치한 군에서는 8일째 이후에도 탄말을 함유한 세포는 소수만이 관찰되었으며, MMCs 내로의 치밀한 집적이나 탄말함유세포의 집괴는 볼 수 없었다. 본 연구의 결과, 어체의 면역활성상태는 MMCs의 출현수, 크기, 치밀성 및 윤곽에 큰 영향을 미칠 수 있음을 강하게 시사하며, MMCs의 각종 형태학적 소견은 경골어류의 병리조직학적 소견해석에 있어서 도움을 줄 수 있는 중요한 형태학적 증거가 될 수 있는 것으로 사료된다.
Objectives The aim of this study is to compare the quality of root canal preparation completed using MFile-$System^{(R)}$ instrument ( Komet, Gebr.Brsaseler, Germany) and conventional stainless steel file in the canals of Maxillary molar teeth that had a canal curvature between $25^{\circ}$ or more Materials & Methods Buccal canals of 24 first and second maxillary molar teeth, extracted for periodontal and prosthetic reasons were used. Tissue fragments and calcified debris were removed from teeth by scaling and the teeth were stored in 10% formalin solution for 24 hour. Then, teeth were stored in saline until used. To be included the roots had to have completed formed apices and angle of curvature ranging between $25^{\circ}$ or more according to the criteria described by Schneider(1971). Palatal and Second mesiobuccal canals were not included. Teeth were embedded into transparent acrylic. The teeth were randomly divided into two experimental groups. All teeth were scanned by Dental CT (PSR9000N, Asahi, Japan) to determine the root canal shape before instrumentation. Image slices were prepared from the apical end point to the pulp chamber. The first two sections were 2 mm from the apical end of root and 2 mm below the orifice. Further section was recorded, dividing the distance between the sections of apical and coronal levels into two equal lengths. 12 teeth were instrumented using stainless steel fileand another 12 teeth were instrumented using MFile-$System^{(R)}$. Following the completion of the instrumentation, the teeth were again scanned and compared with the cross sectional images taken prior to canal preparation. Amount of transportation and centering ability was assessed. Student's t-test was used for statistical analysis. Result Less transportation occurred with MFile-$System^{(R)}$ rotary instrumentation than stainless steel instrument. MFile-$System^{(R)}$ had better centering ability than stainless steel instrument. Conclusion MFile-$System^{(R)}$ rotary instrumentation transported canals less and had good centering ability.
고전압맥동전류자극이 흰쥐 피부의 창상치유와 섬유모세포 및 교원질 밀도에 미치는 영향을 규명할 목적으로 본 실험을 시행하였다. Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐 20마리를 10마리씩 무작위로 고전압맥동전류자극군과 대조군에 배치하고 등에 10 mm의 전층 절개상을 만들었다. 고전압맥동전류자극군은 창상 위에 전극을 부착한 후 맥동빈도 100 pps, 맥동기간 $65{\mu}s$, 강도 50 V로 1일 30분씩 1주 동안 자극하였으며 대조군은 전극만 부착하고 전류를 통전시키지 않았다. 1주 후 창상 길이를 계측한 후 창상부위의 피부를 적출하여 포르말린에 고정한 후 파라핀 포매 절편을 제작하여 Massons trichrome 및 hematoxylin and eosin (H&E) 염색을 하였다. 이 표본을 고배율 현미경하에서 관찰한 다음 현미경에 부착된 CCD 카메라를 통해 개인용 컴퓨터로 보내 영상분석 프로그램을 이용하여 섬유모세포와 교원질 밀도를 계측한 후 비율을 산출하였다. 이를 군간 t-검정한 결과 고전압맥동전류자극군의 창상치유율, 섬유모세포 및 교원질 밀도가 대조군보다 통계학적으로 유의하게 높게 나타났다 (p<0.001). 이러한 결과는 고전압맥동전류자극이 흰쥐의 피부 창상 치유를 촉진시켰음을 보여 주었고 이는 전기자극에 의해 섬유모세포가 활성화되어 교원질 합성이 증가함에 따른 것으로 사료된다.
Toll-like receptors (TLRs) are expressed in immune and tumor cells and recognize pathogen-associated molecular patterns. Cervical cancer (CC) is directly linked to a persistent infection with high risk human papillomaviruses (HR-HPVs) and could be associated with alteration of TLRs expression. TLR9 plays a key role in the recognition of DNA viruses and better understanding of this signaling pathway in CC could lead to the development of novel immunotherapeutic approaches. The present study was undertaken to determine the level of TLR9 expression in cervical neoplasias from Tunisian women with 53 formalin-fixed and paraffin-embedded specimens, including 22 samples of invasive cervical carcinoma (ICC), 18 of cervical intraepithelial neoplasia (CIN), 7 of condyloma and 6 normal cervical tissues as control cases. Quantification of TLR9 expression was based on scoring four degrees of extent and intensity of immunostaining in squamous epithelial cells. TLR9 expression gradually increased from CIN1 (80% weak intensity) to CIN2 (83.3% moderate), CIN3 (57.1% strong) and ICC (100% very strong). It was absent in normal cervical tissue and weak in 71.4% of condyloma. The mean scores of TLR9 expression were compared using the Kruskall-Wallis test and there was a statistical significance between normal tissue and condyloma as well as between condyloma, CINs and ICC. These results suggest that TLR9 may play a role in progression of cervical neoplasia in Tunisian patients and could represent a useful biomarker for malignant transformation of cervical squamous cells.
전기자극이 흰쥐 피부의 비만세포 수 및 탈과림에 미치는 영향을 규명할 목적으로 본 실험을 시행하였다. Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐 12마리를 6마리씩 무작위로 전기자극군과 대조군에 배치하고 전기자극군 흰쥐의 등에 양극전극을 부착한 후 맥동빈도 100pps, 맥동기간 $140{\mu}s$, 전류량 $500{\mu}A$로 60분간 전기작극하였으며 대조근은 전극만 부착하고 전류를 통전시키지 않았다. 전자자극 후 등의 피부를 적출하여 포르말린에 고정한 후 파리핀 포매 절편을 제작하여 toluidine blue 및 alcian blue 염색을 하였다. 이 표본을 고배율 현미경하에서 관찰하여 현미경에 부착된 CCD 카메라를 통해 개인용 컴퓨터로 보낸 다음 영상분석 프로그램을 이용하여 비만세포 수, 탈과립 비만세포 수, 비만세포의 아종 수, 부위별 비반세포를 계측한 후 비만세포의 밀도, 탈과립 비만세포 비율, 비만세포 종류의 비율, 분포 비율을 산출하여 분석하였다. 실험 결과 전기자극군의 비만세포 밀도 및 탈과립 비만세포 비율이 대조군보다 통계학적으로 유의하게 높게 나타났으며, 결합조직 비만세포의 비율이 유의하게 낮았다. 또한 비만세포는 표피에는 존재하지 않고 진피에 분포하며 진피 심부에 유의하게 많이 분포하고 있었다. 이러한 결과는 흰쥐 피부의 양극 전기자극이 비만세포의 수를 증가시키고 비만세포의 탈과립을 유발시키고 있음을 시사하고 있다. 향후 비만세포와 관련이 있는 피부질환 및 손상을 대상으로 한 연구가 기대된다.
전기자극이 흰쥐 창상 표피세포의 핵소체형성부위에 미치는 영향을 규명할 목적으로 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐 24마리의 등애 15mm의 절개창을 만들고 봉합한 후 각각 4일 7일 대조군 및 전기자극에 각각 6마리씩 무작위로 배치하고 전기자극군 흰쥐의 에 전극을 부착한 후 맥동빈도 0.5pps, 전류량 $500{\mu}A$로 60분간 전기자극하였으며 대조군은 전극만 부착하고 전류를 통전시키지 않았다. 전자자극 후 등의 피부를 적출하여 포르말린에 고정한 후 파라핀 포매 절편을 제작하여 silver colliod염색을 하였다. 이 표본을 400배율 현미경하에서 관찰하여 핵당 AgNOR으 수를 계측한 후 핵당 AgNOR의 분포와 핵당 평균 AgNOR수를 산출하여 통계분석한 결과 창상유발 4일과 7일째의 전기자극군의 평균 AgNOR수가 대조군보다 통계학적으로 유의하게 높게 나타났다. 이러한 결과는 전기자극이 흰쥐 피부 창상연 표피세포에서 AgNOR 발현을 증가시켰음을 확인할 수 있었으며 이는 미세맥동전류자극이 창상연의 표피세포를 증식시키고 있음을 시사하고 있다.
We evaluated the efficacy of $\beta$-hemolytic Streptococcus(S.) iniae vaccine on cultured olive flounder. Three hundred flounders(weight $50{\pm}5$ g) were obtained from two farm at Wando and Taean in the southern and western coast of Korea at May and June 2007, respectively. Twenty of flounders moved in 0.5 tons aquaria in land-marine tank system of National Veterinary Research and Quarantine Service. Seawater was transported from the sea of Inchon in western Korea, and water temperature maintained to $22^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$ during the vaccination and challenge test, respectively. We used the formalin-inactivated $\beta$-hemolytic S. iniae vaccine produced by domestic manufacturers. The vaccine was intraperitoneally administered to fish. The vaccinated and control group were challenged with intraperitoneal injection by virulent S. iniae SI-36 isolates with $5.0{\times}10^8$ CFU/fish at 3 weeks after vaccination. We evaluated the vaccine efficacy by calculating numbers of dead fish, and observing of clinical signs, exterior and gross lesions, and examining bacteria isolation and identification. Thirty-four(25.2%) of 135 control and vaccinated group fish were dead with serious anemia, abdominal extension, and hernia of intestine during 3 weeks post vaccination. We isolated Neoheterobothrium hirame from the buccal cavity and Edwardsiella tarda from kidney of dead and diseased fish. When infected fish with these agents were challenged with S. iniae SI-36 isolates, the cumulative mortality of control and vaccinated group were 86.7, and 46.7%, respectively. However, significant differences(p<0.05) were observed on cumulative mortality between control(20.0%) and vaccinated group(95.0%) at second trials with 40 healthy, and relative percent survival(RPS) was 78.0%. We confirmed that the efficacy of $\beta$-hemolytic S. iniae vaccine on olive flounder were impacted by health condition such as bacterial and parasitic diseases.
The cultivation for development of Ascaris suum from the second-stage larvae($L_2$) embryonated egg and the third-stage of rat-derived larvae($L_3$) recovered from lung of rats were performed to use the screening test of anthelmintics in vitro. The preparations of larvae for cultivation were that the artificially-hatched $L_2$ incubated the embryonated eggs of Ascaris suum in 0.1% formalin solution at $25^{\circ}C$ for 28 days and the rat-derived larvae($L_3$) recovered from the lung of rat infected with the embryonated eggs of Ascaris suum on 7 days after infection(DAI). The cultivation for development of Ascaris suum from the embryonated eggs($L_2$) and the rat-derived larvae($L_3$) for 14 days in RPMI medium 1640(with 5% bovine calf serum) were as follows : 1. The sizes of the liberated larvae($L_2$) which were artificially hatched from embryonated eggs with glass beads(diameter 5mm) were $190{\sim}250{\mu}m$ on 1 days in culture(DIC). The second-stage larvae were molted into third-stage larvae(early $L_3$; $250{\sim}300{\mu}m$) and the features of these larvae were first observed such as cephalic cuticle, esophageal lumen and anus etc. on 5 DIC and the sizes of late third-stage larvae were $250{\sim}450{\mu}m$ on 10 DIC. The sizes of early fourth-stage larvae($L_4$) were $500{\sim}700{\mu}m$ and the features of these larvae were more pronounced in internal organs on 15 DIC. 2. The sizes of third-stage larvae($L_3$) recovered from the lung of rats were $1,340{\sim}1,370{\mu}m$ and the feartures of cephalic cuticle, esophageal lumen, intestine, rectum, anus were visualized by inverted microscope on 1 DIC. The fourth-stage larva($L_4$) completed by third ecdysis were recognizable and sizes of early fourth-stage larvae were developed as $1,400{\sim}2,200{\mu}m$ on 5 DIC. The sizes of middle fourth-stage of larva were $1,900{\sim}2,300{\mu}m$ and the thickened epithelial rectum was observed on 10 DIC. The rectum and anus of late fourth-stage larva($L_4$$2,500{\sim}3,200{\mu}m$) had developed completely in RPMI medium 1640 on 15 DIC.
Periodontal pocket is one of the most frequently developed clinical feature on the teeth with periodontal disease. In order to determine the gingival curettage effect of intrapocket irradiation of a pulsed Nd : YAG laser on periodontally involved teeth, bilateral 60 teeth with $4{\sim}6mm$ in probing pocket depth 1 week after supragingival scaling were selected. On half of them the intrapocket irradiation($300{\mu}m$ fiber optic, 1.5W power, for 2min.) of a pulsed-Nd : YAG laser(EL.EN.EN06O, Italy) was applied as the lased group. On the contralateral 30 teeth the subgingival curettage was accomplished by Gracey curettes as the curattage group. The periodontal pocket tissues were surgically excised by the modified Widman flap technique immediately after the intrapocket irradiation or subgingival curettage, subsequently fixed with 10% neutral formalin, sectioned in $4{\sim}6{\mu}m$ thickness, and stained with hematoxylin-eosin. Surface characteristics and incomplete removal of the pocket epithelium were evaluated under light microscope. And the difference between the lased group and the curettage group was statistically analyzed by Chi-square test in Microstat program. The results were as follows ; 1. The plane surface was observed more frequently in the curettage group(73.3%) than in the lased group(23.3%), and the rough surface was observed more frequently in the lased grOoup(63.3%) than in the curettage group(6.7%)(p<0.05). 2. The rate of incomplete removal of the pocket epithelium was relatively high in both the lased group(76.6%) and the curettage group(86.6%), and there was no significant difference between the lased group and the curettage group(p>0.l). The results suggest that the further studies including various power control of laser should be succeeded in order to obtain more favorable results by the intrapocket irradiation of a pulsed Nd:YAG laser than the subgingival curettage with Gracey curettes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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