본 연구에서는 식품 제조시설 및 조리도구의 표면을 대상으로 식품알레르겐인 땅콩을 제거하기 위해 다양한 습식세척법을 평가하였다. 습식세척은 식품알레르겐 또는 잔류물질을 세척하는데 매우 효과적인 방법이며 식품 시설 또는 접촉 표면으로 사용되는 스테인리스, 나무, 플라스틱에 대해 온수로 5분간 불림 후 세척솔과 세척용제를 이용한 세척효과는 스테인리스> 유리> 플라스틱> 나무 순으로 확인되었다. 접촉 표면이 거친 나무는 끼임 등에 의해 세척효과가 낮게 나타났으며 표면의 세척효과를 높이기 위해 온수(50℃±2)로 5분간 불림 후 세척솔과 차아염소산 나트륨으로 세척하였을 때 나무표면으로부터 땅콩 알레르겐 제거에 효과가 큰 것으로 확인되었다. 식품 제조시설 및 조리도구의 표면에 따라 땅콩 알레르겐 세척효과는 달리 확인되어 본 연구에 사용된 재질과 세척용제 이외에 대해서도 추가의 연구는 필요하다. 식품안전현대화법에서 식품알레르기 표시 제도 및 식품알레르기 교차오염 예방 등에 관한 관리가 요구되고 있는 상황에서 식품 제조시설 및 조리도구 표면에 존재하는 식품알레르겐에 의한 교차오염의 예방과 관리는 필요할 것으로 생각된다. 본 연구 결과는 일반적인 세척 후에도 제조시설 및 도구의 표면에 땅콩 알레르겐의 잔류가능성을 제시하였고, 식품제조시설에서 취급하고 있는 땅콩 알레르겐의 세척 및 저감과 적절한 재질의 시설 및 도구 선정에 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
Background: In order to characterize human antibodies with specificity for mite allergens at the molecular level, a scFv phage display library was constructed using peripheral blood mononuclear lymphocytes from an asthma patient allergic to mite as Ig gene sources. Methods: Immunoglobulin $V_H$ and V gene fragments were obtained by polymerase chain reaction, and randomly combined in pCANTAB-5E vector. The resulting human scFv phage display library had $3{\times}10^4$ independent clones, and biopanning was performed with house dust mite extracts. Results: Four scFv clones specific for house dust mite extract were isolated. Immunoblot assay showed that our clones reacted to 25 kDa and 50~60 kDa proteins with unknown identity in mite extracts. Sequence analysis indicated that two clones (b7 and c15) are identical, and all clones belong to human $V_H3$ subgroup. On the other hand, light chain usage was different in that two clones (a2 and b7 / c15) belonging to V ${\kappa}4$ subgroup, but a4 used V ${\kappa}1$ light chain gene. Conclusion: Our approach should facilitate provision of useful information on the antibody responses against allergens at the molecular level in humans.
The Rhus verniciflua contains alkly(en)-catechol type allergens with a saiurated or unsaturated alkly chain of 15 or 17 carbon atoms. It has been recognized as an extremely active allergen causing skin reactions similar In poison ivy. The allergic contact dermatitis induced by the urushiol is known to be mediated be T lymphocytes whicht specifically recognize the hepten urushiol. Therefore. direct use of this plant as a medicinal purpose might imply a considerable hazard in Korea. In this study, using the established method for the detoxification from the stem bark of Rhus verniciflua, an strong antioxidant substance was isolated and characterized DPPH (diphenypricryl hydrazyl) assay measures hydrogen atom-donating activity and hence provides a measure of free radical scavenging antioxidant activity. DPPH, a purple-colored stable free radical, is reduced to yellow-colored diphenylpicryl hydrazine by antioxidants to deducing agents. Antioxidative effects of the water extract from RV were measured by DPPH assay. Twenty microliters of the extract was added to 1ml of 100mM DPPH solution in ethanol The mixture was shaken and left to stand for 10min at room temperature. The crude water extracts was purified by using HPLC method with a DEAE (anionic type), CN, ODS column. The purified compound remained stable at pH 3.0-6,0, but unstable above pH 6.5. It was stable heat at 10$0^{\circ}C$ for 4 hours, but still had about 80% of residual activity after treatment at 10$0^{\circ}C$ for 5 hours. The elemental composition of the HR-EI mass spectrum at m/z 170.02 was estimated the empirical formula as $C_{7}$$H_{6}$$O_{5}$. $C_{10}$$H_4$$O_2$N$_1$, $C_{5}$$H_4$$O_4$N$_3$, $C_{8}$$H_2O$$_1$N$_4$. In antimicrobial test, no inhibition was observed against Gram-positive and negative bacteria. This compound was stronger than that of commercial antioxidant by DPPH test, such as BHT, BHC at the same concentration (20$\mu$g/ml).ml).
Objective : The objective of this study is to analyze an increasing rate, difference of attack rate in age, relationship between atopic dermatitis and breast-feeding, the relationship between atopic dermatitis and the Sasang constitution, and various treatments of atopic dermatitis. Methods : This clinical study was carried out with 22 theses which are related with diagnosis, treatments, prognosis and control of atopic dermatitis. The 22 theses are carried on J Korean Oriental Pediatrics, J Korean Oriental Ophthalmology, J Korean Oriental Med, J Korean Academy of Pediatric Allergy and Respiratory Disease, J Korean Acad Fam Med and Korean J Food & Nutr. Results : The prevalence rate, attack rate and diagnosis rate of atopic dermatitis are increased in the year of 2000, compared with those of 1995. Comparing age of patient between the year of 1992 and 2002, the attack rate of atopic dermatitis is increased quickly over 7 years old. Specific immunoglobulin E(IgE) antibodies detected in patients under 1 year old was exclusively caused by food. But for the age over 7 years old, food and inhalant allergen are detected in the year of 2002 in compare with that of 1992. Because of breast-feeding, intemperate diet adjustment during the period of maternity of family history of atopic dermatitis, the attack rate of atopic dermatitis is increased in infant. The types of patients are categorized according to Sasang constitution and Soeumin group was largest. The Oriental medicine treatments of atopic dermatitis are bath & skin hydration, avoidance from antigen, dietetic treatment, external treatment, medication and phototherapy. Conclusion : The atopic dermatitis is associated with breast-feeding, Sasang constitution types. More active approach for the treatment and prevention of Atopic dermatitis in children are needed.
Allergenicity of genetically-modified (GM) soybean was evaluated in male Sprague Dawley rats. To confirm the GM soybean used in this study, the polymerase chain reaction (PCR) was performed using the chromosomal DNA of soybeans. The PCR result provided the clear discrimination of genetically-modified (GM) soybeans. To evaluate the allergenicity of GM soybean and non-GM control one, the soybean homogenate was sensitized subcutaneously 3 times a week for 3 weeks. The doses of soybean were 0, 2 and 20 mg/kg in the protein basis. A week after the last sensitization, antisera were recovered from individual animals. When the sera were injected intradermally on the clipped back of unsensitized rats with various dilutions, followed by a challenge with 20 mg/kg of soybean homogenate containing 1% Evans blue, no sign of passive cutaneous anaphylaxis reaction was detected. In addition, when the sera were treated in the cultures of peritoneal mast cells, the increase of histamine release by anti-(GM soybean) sera was not observed when compared to that by anti-(non-GM soybean) sera. The present results indicate that the GM soybean might not act as a strong allergen in male Sprague Dawley rats.
복숭아는 오래 전부터 알레르기를 일으키는 식품으로 알려져 있으나 특정 식품과의 교차반응에 대한 연구는 부족한 실정이다. 본 연구에서는 한국에서 재배되고 있는 복숭아, 앵두, 고추의 단백질을 추출하여 복숭아 알레르기를 가진 환자가 앵두와 고추에 대해 교차반응성을 일으키는지 확인하고 이 단백질들의 소화효소처리에 따른 안정성을 조사하였다. 복숭아, 앵두 및 고추 단백질 추출물은 Tricine-SDS-PAGE상에서 3 kDa부터 26 kDa 이상까지 넓은 범위의 단백질 분포를 보였으나 각기 다른 패턴을 가지는 것을 확인하였다. 복숭아 단백질의 항원성을 확인하기 위해 복숭아 민감성 환자의 혈청과의 IgE반응성을 확인한 결과, 환자 혈청은 모두 복숭아의 주요 항원성 단백질 lipid transfer protein로 예상되는 9 kDa 부근에서 강한 IgE결합력을 보였으며 또한 9 kDa 단백질이 anti-LTP1 polyclonal antibody에 의해 검출되는 것을 확인하였다. 앵두와 고추 단백질 추출물은 23 kDa 부근에서의 IgE결합력이 9 kDa과의 반응성보다 크게 나타났다. 복숭아, 앵두 및 고추의 소화효소에 대한 안정성을 SDS-PAGE 상에서 확인한 결과, 복숭아, 앵두 및 고추의 항원성 단백질은 인공 위액 및 장액에 의해 완전히 분해되지 않아 알레르기를 유발할 잠재성이 있는 것을 확인할 수 있었다. 본 연구 결과를 바탕으로, 복숭아, 앵두 및 고추 단백질 추출물이 소화효소처리에 안정성을 가지는 특성을 가지며 복숭아 알레르기 증상을 가지는 사람에게 앵두 및 고추는 교차반응성을 일으킬 가능성이 크다는 것을 확인할 수 있었다.
메밀은 과민한 사람에게 식품알레르기를 일으킬 수 있다. 메밀 보통종의 BW10KD 단백질은 알레르기 유발단백질중의 하나로 알려져 있다. 가공식품에 함유된 메밀성분을 검출하기 위하여 메밀의 알레르기 유발단백질인 BW10KD의 유전자에 특이적인 primer를 사용하는 Polymerase Chain Reaction(PCR) 방법을 개발하였다. BW10KD유전자의 cDNA 염기서열을 이용한 5종의 primer sets로 7종의 다른 곡류 및 두류(보리, 밀, 조, 수수, 대두, 팥, 검은콩)에 대해 PCR을 수행한 결과, 사용한 primer set 모두 메밀에만 특이적인 반응을 나타냈다. 메밀 특이적 PCR방법을 이용하여 12종의 가공식품(메밀가루, 메밀국수, 메밀묵, 밀국수, 라면, 검은깨죽, 선식, 과자, 미숫가루 및 3종류의 시리얼)을 조사한 결과 메밀가루, 메밀묵 그리고 메밀국수가 메밀 성분을 함유하고 있는 것으로 나타났다. 메밀특이적 PCR 방법은 메밀 보통종의 DNA를 1 ng까지 검출할 수 있었다. 본 PCR 방법은 식품 중에 함유된 메밀 성분을 신속 정확하게 검출하는데 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
새우 알러지를 감소시키기 위한 방법으로써 감마선 조사기술의 이용 가능성을 평가하였다. 새우로부터 분리한 열안정성 단백질(HSP)과 병원에서 임상진단용으로 사용하는 새우 단백질 추출액을 1, 3, 5, 7, 10 kGy의 선량으로 감마선을 조사하였다. 단백질 추출액 및 HSP의 알러지성과 항원성의 변화를 mAb와 환자의 IgE를 사용한 ELISA법과 immunoblotting법으로 측정하였고, 단백질의 구조변화는 gel permeation chromatography와 SDS-PAGE로 관찰하였다. 환자의 IgE는 감마선 조사된 단백질 추출액과 HSP용액 모두에서 감마선 조사선량이 증가함에 따라 감소하였다. GPC-HPLC와 sandwich ELISA법으로 HSP를 정량하였을 때도 역시 감마선 조사선량이 증가함에 따라 감소하였다. SDS-PAGE pattern 변화에서 HSP는 감마선 조사에 의해 변화되어 더 큰 분자량으로 전환되었다. 이러한 결과는 감마선 조사가 새우 알러지 억제에 적용 할 수 있다는 가능성을 시사하였다.
The purpose of the present study was to investigate differences in the sensitizing potential of Rhus Veniciflua(Rhus-II), when tested by the guinea pig maximization test(GPMT) and Freund's complete adjuvant test(FCAT) with an identical, intradermal induction concentration. A new grading classification of the sensitization potential is proposed. The GPMT was conducted according to OECD guideline $\#406$, using a multiple-dose design and test results were analysed with logistic regression analysis. During the induction stage, we injected intradermally each three site 0.1 ml(l mg/animal) test material, 0.1 ml complete Freund's adjuvant and 0.lml the test agent emulsified in the adjuvant. 7 days later, we induced weak sensitization with $10\%$ sodium lauryl sulfate(SLS) and applide 1ml(l0mg/animal) test agent topically on the same site and made a tight occlusion. 14 days later we challenged with 1 ml(l 0mg/animal) of test material on the flank and observed ant 24 hours and 48 hours later. The results were also observed $0\%$ at 24 hours challenge. The results observed 48 hours after challenge were the identical. These data indicated that, although Rhus-II is a no contact allergen. It was reported that the skin sensitization by Rhus-II was not detected the skin sensitization in the guinea pig maximization test (GPMT). Consequently, it was confirmed that Rhus-II had no contact allergic sensitization in guinea pig maximization test.
Atopic dermatitis (AD) has become a serious epidemic in Korean children. We aimed to investigate the association between vitamin C, E and other nutrients, and serum total IgE/specific IgE levels in children with AD. A total of 119 children (0-24 mo) diagnosed with AD were recruited for this cross-sectional study from a medical center in Seoul. A 24 h recall was used to assess dietary intakes. Serum total and six food-allergen specific IgE levels were measured by CAP-FEIA. Serum vitamin E was also measured but only in 25 out of the total 119 participants. Multiple linear regression analysis was performed to estimate the coefficients between serum IgE levels and dietary intake as well as serum vitamin E. Serum vitamin E levels showed a significantly inverse association with serum total IgE and all specific IgE levels (P < 0.05). Fat intake was inversely related with specific-IgEs for egg whites, milk, buck wheat, soy, and peanuts (P < 0.05). Positive associations were found between carbohydrate (CHO) intake and total IgE and specific IgEs to egg whites, milk, soy, and peanuts (P < 0.05). Vitamin C, E and n-3/n-6 fatty acids were not related with serum total IgE and specific IgE levels except for the association between buck wheat and vitamin E. In addition, there were no significant differences between males and females in dietary intake and serum IgE levels by student's t-test. Although dietary vitamin E showed no association with serum IgE levels, serum vitamin E drew a significant inverse relationship with serum IgE levels. The evidence seems to suggest that vitamin E may possibly lower total and specific-IgEs in children with AD, and that it is important to maintain a relatively high serum vitamin E level in children with AD.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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