To investigate the role of heparin in keratinocyte growth factor (KGF) and acidic fibroblast growth factor (aFGF) high affinity binding to the KGF receptor (KGFR), a cell free system was established which utilized a secreted chimeric molecule between the KGFR extracellular domain and the immunoglobulin heavy chain Fc domain (KGFR-HFc). KGFR-HFc was purified from NIH 3T3 cells and demonstrated the binding of $[^3H]-heparin$ as well as heparin Sepharose. Scatchard analysis showed that the dissociation constant for heparin binding to KGFR-HFc was 140 nM. High affinity KGF and aFGF binding to KGFR-HFc remained unchanged after treatment with 0.6 M NaCl, which is the concentration sufficient to release any bound heparin to the KGFR-HFc. These results strongly suggest that although the KGFR interacts with heparin, the presence of heparin is not absolutely required for high affinity binding of either KGF or aFGF to the KGFR.
Leiomyomas, which are the commonest pelvic tumors in women, are originated from myometrial cells. Although the exact initial pathophysiologic event of the leiomyoma is not known, recent evidences suggested that the effects of sex steroid hormones in the process of tumor growth are mediated by local production of growth factors including epidermal growth factor (EGF), insulin-like growth factor-I (IGF-I) and insulin-like growth factor-II (IGF-II). If we look at the effects of other cytokines, it was suggested that basic fibroblast growth factor (bFGF) may stimulate the proliferation of myometrial and leiomyomas cells. And it was reported that interferon-${\alpha}$ inhibit the action of bFGF. Therefore, we examined the effect of bFGF and interferon-${\alpha}$ on the proliferation of leiomyoma and myometrial cells. bFGF stimulated the myometrial and leiomyoma cells significantly at the concentration of 1ng/ml (p<0.05) and 5ng/ml (p<0.05). However, Interferon-${\alpha}$ inhibited the cell proliferation of myometrial and leiomyoma cells significantly at the concentration of 100U/ml (p<0.05) and 1000U/ml (p<0.05). And the stimulated effects of bFGF with the various concentration on the myometrial and leiomyoma cells ware inhibited by interferon-${\alpha}$ with 100U/ml. Therefore, we concluded that bFGF may stimulate the myometrial and leiomyoma cell proliferation and interferon-${\alpha}$ may inhibit the myometrial and leiomyoma cell proliferation through blocking the effect of basic fibroblast growth factor.
Purpose: The purpose of this study was to investigate the effect of Ulmus root-bark dressing in fibroblast growth factor (FGF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) of induced pressure ulcers in rats. Methods: 54 male Sprague-Dawley rats were used and randomly divided into 2 groups. The rats were anesthetized and pressure ulcers were induced at 140 mmHg for three hours, using a personally-designed pressing apparatus. Ulmus dressing was applied in the experimental group (n=27) and saline gauze dressing in the control group (n=27). Each of the dressings was changed every other day, and after a month, the wounds were examined by microscopy biweekly for 20 weeks. Results: After 4 weeks, the epidermis of the wounds was recovered, but inflammatory infiltration of the dermis was remained. After 6 weeks, inflammatory cells were diminished and the number of capillaries was decreased. Examined by immunofluorescence staining, the FGF positive cells in the experimental group changed negatively after 18 weeks, but the control group still existed even after 20 weeks. VEGF positive cells in the experimental group also changed negatively after 20 weeks, but the control group still existed. Conclusion: The findings of this study demonstrate that Ulmus dressing is effective in minimizing scar formation and inflammatory reaction by decreasing FGF and VEGF in the terminal phase of wound healing.
To better define the relationship between dermal regeneration and wound contraction and scar formation, the effects of epidermal growth factor (EGF) loaded in collagen sponge matrix on the fibroblast cell proliferation rate and the dermal mechanical strength were investigated. Collagen sponges with acid-soluble fraction of pig skin were prepared and incorporated with EGF at 0, 4, and 8 $\mu$g/1.7 $cm^{2}$. Dermal fibroblasts were cultured to 80$\%$ confluence using DMEM, treated with the samples submerged, and the cell viability was estimated using MTT assay. A deep, $2^{nd}$ degree- burn of diameter 1 cm was prepared on the rabbit ear and the tested dressings were applied twice during the 15-day, post burn period. The processes of re-epithelialization and dermal regeneration were investigated until the complete wound closure day and histological analysis was performed with H-E staining. EGF increased the fibroblast cell proliferation rate. The histology showed well developed, weave-like collagen bundles and fibroblasts in EGF-treated wounds while open wounds showed irregular collagen bundles and impaired fibroblast growth. The breaking strength (944.1 $\pm$ 35.6 vs. 411.5 $\pm$ 57.0 Fmax, $gmm^{-2}$) and skin resilience (11.3 $\pm$ 1.4 vs. 6.5 $\pm$ 0.6 mJ/$mm^{2}$) were significantly increased with EGFtreated wounds as compared with open wounds, suggesting that EGF enhanced the dermal matrix formation and improved the wound mechanical strength. In conclusion, EGF-improved dermal matrix formation is related with a lower wound contraction rate. The impaired dermal regeneration observed in the open wounds could contribute to the formation of wound contraction and scar tissue development. An extraneous supply of EGF in the collagen dressing on deep, $2^{nd}$ degree-burns enhanced the dermal matrix formation.
${\delta}$-Aminolevulinic acid (ALA) is an endogenous metabolite formed in the mitochondria from succinyl-CoA and glycine, and plays a key role in the living body as an intermediate of the compound in the porphyrin biosynthesis pathway. ALA has been commonly used in photodynamic therapy for several years, because ALA is of interest as a biodegradable mediator, a growth regulator, and an effective agent used in dermatology. Here, we determined which ALA derivatives were the most effective for the inhibition of the cell proliferation and growth of human fibroblast. As a result, we found that the treatment of ALA derivatives including ALA, ALAP (ALA phosphate salt), MAL (Methyl 5-aminolevulinate hydrochloride salt), PBGL (phophobilinogen lactam) and PBGH (phophobilinogen-HCl) could attenuate cell proliferation of human fibroblast cells. Among them, PBGH was the most effective derivative. In addition, PBGH treatment could induce mitochondrial membrane depolarization, leading to cell death of human fibroblast. These results suggest that mitochondrial membrane depolarization induced by ALA and PBGH treatment might be responsible for inhibition of cell proliferation and death. Taken together, our results propose the possibility that PBGH can be used as one of the effective drugs in human skin disease, psoriasis.
Objectives : In this study, we investigated the effect of Fructus Ligustri Lucidi $H_2O$ fraction (FLLW) on cell proliferation, and the phosphorylation of ERKs and Akt in human dermal fibroblast neonatal (HDFn). Methods : After treatment of HDFn with FLLW, MTT assay was performed to quantitatively determine cellular viability. The ERK and Akt pathways were analyzed in vitro by Western blot in a HDFn. HDFn proliferation after FLLW and minoxidil treatment in the absence or presence of PD98059, a MEK inhibitor, LY294002, and a PI3K inhibitor, was examined by Western blot or MTT assay. Results : FLLW increased cell proliferation in a dose-dependent manner and minoxidil used as positive control also induced cell proliferation in HDFn. FLLW increased the phosphorylation of ERK and Akt. In addition, minoxidil, too, induced the phosphorylation of ERK and Akt in HDFn. PD98059 and LY294002 significantly attenuated FLLW-inducible p-ERK and p-Akt expression and proliferation in cultured HDFn. Conclusions : Our results suggest that FLLW stimulates the growth of fibroblast cells through ERK and Akt pathways. Therefore, FLLW is a potential agent for the inducer of fibroblast growth.
Kim, Eung-Tae;Han, Du-Seok;Yoo, Hyung-Keun;Shin, Hyung-Shik
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.25
no.2
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pp.239-251
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1995
The selective migration, attachment and proliferation of periodontal ligament cells are the desired goal of periodontal regeneration therapy. Fibronectin is well known for an attachment protein for dentin surface. Also, Fibroblast growth factor (FGF) is well known to enhance the periodontal regeneration. The purpose of this study was to evaluation the effect of fibronection and FGF on the attachment rate and the cellular activity. Human gingival fibroblast and periodontal ligament cells were cultured from the teeth extracted for non-periodontal reson. Cultured human gingival fibroblast and periodontal ligament cells in vitro were treated with fibronectin and FGF a various dosage and culture times. Cellular activity was examined by MTT assay. The results of this study was demonstrated that cell attachment rate of experimental group was under the control value at 1st, 2nd, 3rd incubation day. But, at 3rd incubation day, attchment value tended to return to the control value. In case of fibronectin alone application, cellular activity was decreased than that of control at 1st, 2nd incubation day. But 3rd day, cellular activity was returned to the control value. The activity of gingival fibroblast in FGF alone application was decreased thatn that of control at each incubation day. But activity of periodontal cell group was increased cell activities at 2nd, 3rd day. Additionally cellular activity of fibronectin & FGF combined application on gingival fibroblast group was similar to control value at incubation day. But activity of periodontal ligament cell group was increased at 2nd, 3rd day compared with control group.This study demonstrated that combined application of fibronectin & FGF induced the selective chemotaxis for periodontal ligament cell in vitro.
Kim, Hak-Jae;Joung, In-Sil;Nah, Seong-Su;Lee, Kyu-Hoon;KimKwon, Yun-Hee;Chung, Joo-Ho;Hong, Seung-Jae
Molecular & Cellular Toxicology
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v.3
no.2
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pp.85-89
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2007
Efficient gene delivery to specific tissues, such as inflammatory and cancerous tissues, is currently a major concern in disease treatment. The human transferrin receptor (hTR) has been detected in the synovium and fibroblast-like synoviocytes (FLS), which raises the possibility that expression of hTR is associated with the pathogenesis of rheumatoid arthritis (RA). To investigate whether the hTR is a useful target for gene transduction into the FLS of RA patients, recombinant adenoviruses with wildtype fiber (AdLac) and transferrin peptide-tagged fiber (Tf-AdLac) were used. The hTR expression level in FLS was notably increased by basic fibroblast growth factor (bFGF). Gene transduction to FLS was significantly higher by the hTR-targeted adenovirus than by the AdLac adenovirus, and treatment of the FLS with bFGF resulted in increased gene transduction by Tf-AdLac. Taken together, these data support Tf-AdLac as a new strategy for gene transduction in the treatment of RA patients.
Conjugated linoleic acid (CLA) is a potent inhibitor of mammary carcinogenesis. Cancer cells produce various angiogenic factors which stimulate host vascular endothelial cell mitogenesis and chemotaxis for their growth and metastasis. Basic fibroblast growth factor (bFGF) is a potent angiogenic factor that is expressed in many tumors. In this study. we found that CLA decreased bFGF-induced endothelial cell proliferation and DNA synthesis in a dose-dependent manner. However, CLA did not inhibit endothelial cell migration. Furthermore CLA showed a potent inhibitory effect on embryonic vasculogenesis and bF GF-induced angiogenesis in vivo. Collectively. these results suggest that CLA selectively inhibis the active proliferating endothelial edll induced by bFGF. which may explain its anti-carcinogenix properties in vivo.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.33
no.3
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pp.211-220
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2007
Objective: In organotypic culture of immortalized human oral keratinocytes (IHOK), the change of the growth and differentiation was investigated according to the fibroblast type and the involvement of mitogen-activated protein (MAP) kinase. Materials & Methods: IHOK was cultured three dimensionally with gingival fibroblast (GF), dermal fibroblast (DF) and immortalized gingival fibroblast (IGF). We characterized biologic properties of three dimensionally reconstructed IHOK by histological, immunohistochemical, and Western blot analysis. We also investigated whether MAP kinase pathway was involved in epithelial-mesenchymal interaction by Western blot analysis. Results: The best condition of three dimensionally cultured IHOK was the dermal equivalent consisting of type I collagen and IGF. IGF increased the expression of more proliferating cell nuclear antigen (PCNA), involucrin than GF and DF in response to co-culture with IHOK. Extracellularly regulated kinase (ERK) pathway was activated in organotypic co-culture with IGF. Conclusion: The organotypic co-culture of IHOK with dermal equivalent consisting of type I collagen and IGF resulted in excellent morphologic and immunohistochemical characteristics and involved ERK pathway. The epithelial-mesenchymal interaction was activated according to the fibroblast type.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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