Objectives : The effects of cotreatment of adriamycin and ethanol extract of herb (Palgin-tang hab Hwajuck-hwan a traditional medicine for cancer treatment in oriental medicine) on the induction of apoptotic cell death were investigated in human liver origin cell lines, Chang. Methods : Chang(ATCC) liver cells were cultured in RPMI-1640(Gibco SRL Co, Gaithersburg, MD) badge including 10% fetal bovine serum. Chang liver cells were treated with various concentrations(from 10 to $0.16{\mu}l$) of adriamycin and herb extract(from 500 to $31.25{\mu}l$) After 48h later, the cells were tested for viability by Crystal violet staining assay. Adriamycin and Herb extract induced ladder pattern of DNA fragmentation in Chang cells. Genomic DNA was isolated and separated on 1.5% agarose gels. The DNA was stained with ethidium bromide and visualized under UV light. Results : The death of Chang cells was synergistically induced by the cotreatment of adriamycin and ethanol extract of herb. In addition, the cotreatment-induced cell death of Chang cells was mediated by apoptotic death signal processes. The phosphotransferase activity of JNK1 remained in a basal level in Chang cells which was treated individually with the adriamycin and ethanol extract of herb. However, it was markedly increased in Chang cells which was cotreated with adriamycin and ethanol extract of herb. In addition, the expression of Fas and FasL was markedly induced by the cotreatment of adriamycin and herb extract. For a while, the expression of Sax was a eminently increased by the ethanol extract of herb. However, Scl2 expression was not affected by the individual or cotreatment of adriamycin and herb extract. Conclusions : our results suggest that the cotreatment of adriamycin aM ethanol extract of herb induces synergistic apoptotis of human liver origin Chang cells via the upregulation of JNK, Fas, FasL and Bax.
The present study was carried out to investigate the effects of Panax ginseng saponin extracts on the dexamethasone-induced apoptosis of mouse thymus in vivo and mouse thymocytes in vitro. The saponin fractions of red ginseng (R-SAP) and white ginseng (Wl-SAP) were provided by the Korea Ginseng & Tobacco Research Institute, and the other saponin fraction of white ginseng (W2-SAP) was extracted in our laboratory. 1. The male ICR mice (3~4 wk old; weighing 15$\pm$2 g) were given by each saponin fraction of 5 mg/kg/ day for 4 days, and at one hour after the last treatment, they were injected by deuamethasone (5 mg/kg : DX). The mouse thymus was extracted at 6 hours after DX injection, and they were stained with hematoxylin-eosin reagents and an Apop-Tag kit, respectively, and the thymocytes prepared from it were labelled with anti-mouse FITC-anti-CD4 and anti-mouse PE-anti-CD8 and then analyzed by fluorescence activated cell sorter (FACS). DX-induced reduction of thymus weight was significantly attenuated by W2- SAP but was not affected by other saponin fractions. And DX-induced apoptotic death of thymocytes, appeared in the histologic findings of the thymus, was inhibited by the saponin fractions and the order of these inhibitory potencies was R-SAP》W2-SAP>Wl-SAP. However, in respect of T cell receptors, the differentiation of thymocytes seems not to be changed by treatments with DX or/and the saponin fractions. 2. In the primary thymocyte culture, the DX-induced reduction of thymocyte MTT values was rather greater in RPMI 1640 medium of IWc fetal bovine serum (FBS) or horse serum (HS). In addition, the DX-Induced MTT reduction was significantly inhibited by R-SAP or W2-SAP, in the culture using that medium of 5% FBS or HS. But these saponin fraction did not effected the DX-induced reduction of thymocyte MTT value in primary culture of 10% FBS or 10% HS. These results suggest that R-SAP and some W-SAP fractions may protect thymocyte from stress or glucocorticoisteroid-induced death of them.
Purpose : To address the ability of Dohaekseungkitang (DST: a commonly used herb formulation in Korea, Japan and China to have anti-cancer effect on cervical carcinoma), we investigated the effects of DST on programmed cell death (apoptosis) in HeLa human cervical carcinoma cells. Methods : We cultured HeLa cell which is human metrocarcinoma cell in D-MEM included 10% fetal bovine serum(Hyclone Laboratories) below $37^{\circ}C$, 5% CO2. Then we observed apoptosis of log phage cell which is changed cultivation liquid 24 Hours periodically. Results : After the treatment of DST for 48 hours, apoptosis occurred in a dose-dependent manner. In this study, we have shown that DST induces calpain and the associated caspase-8 and -9 activations. Apoptosis was prevented by pre-incubation of the cells with the calcium cHeLator-BAPTA-AM, calcium channel blocker-Nif edipine or Ryonidine agonist-Ryonidine peptide, implicating calcium in the apoptotic process. Ubiquitous calpains (mu- and m-calpain) have been repeatedly implicated in apoptosis, especially in calcium-related apoptosis. However this study showed 1hat either calpain inhibitor-calpastin or caspase-3 inhibitor-DEVD- did not blocked the herb formulation-induced apoptosis in HeLa human cervical carcinoma cells. D ST initiates a cell death pathway that is partially dependent of caspases. DST-induced apoptosis requires caspase-independent mechanism. Conclusion : We conclude that DST-induced calpain activation triggers the intrinsic apoptotic pathway in which caspase-independent mechanism is also involved.
Purpose : This study is to examine the ability of Rhizoma Scirpi (RS) to induce HeLa cell viability. Methods : We culture HeLa cell which is human metrocarcinoma cell in D-MEM included 10% fetal bovine serum(Hyclone Laboratories) below $37^{\circ}C$, 5% CO2. Then we observed apoptosis of log phage cell which is changed cultivation liquid 24 Hours periodically. Results : 1. RS induces mitochondria membrane potential collapse. 2. P38 MAPK is involved in RS-induced death in HeLa cells. 3. P38 MAPK is involved in RS-induced apoptosis in HeLa cells. 4. P38 MAPK reguates RS-induced caspase-3, -8 and -9 activation in HeLa cells. 5. The inhibition of caspase regulates RS-induced cell death in HeLa cells. 6. RS induces mitochondria membrane potential collapse in HeLa cells. 7. P38 MPK is involved in the regulation of Bcl-2 and Bfu in HeLa cells.8. RS regulates the expression of Bcl-2 and Bax in HeLa cells. 9. SR induces p38 MAPK activation in HeLa cells. Conclusion : RS induces apoptosis in HeLa cells via p38 MAPK activation.
Objectives: Nowadays cancer treatment is an important challenge in the medical world that needs better therapies. Many active secretions produced by insects such as honey bees used to discover new anticancer drugs. Bee venom (BV) has a potent anti inflammatory, anti cancer and tumor effects. The aim of present study is evaluation of anticancer effects induced by Apis mellifera venom (AmV) on cell Lines. Methods: AmV was selected for study on cancer cell lines. Total protein, molecular weight and LD50 of crude venom were determined. Then, cells were grown in Dulbecco's Modified Eagle medium supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% antibiotics. The A549, HeLa and MDA-MB-231 cell Lines were exposed by different concentration of AmV. The morphology of cells was determined and cell viability was studed by MTT assay. Evaluation of cell death was determined by and DNA fragmentation. Results: The results from MTT assay showed that 3.125 ㎍/mL of A549, 12.5 for HeLa and 6.25 ㎍/mL of MDA-MB-231 killed 50% of cells (p < 0.05). Morphological analysis and the results from hoescht staining and DNA fragmentation indicated that cell death induced by AmV was significantly apoptosis. Conclusion: The data showed that using lower dosage of AmV during treatment period cause inhibition of proliferation in time and dose dependant manner. Findings indicated that some ingredients of AmV have anticancer effects and with further investigation it can be used in production of anticancer drugs.
A female English bulldog was gave birth two neonates by cesarean section on the sixty one days after mating, but both neonates were died soon after birth. The bodies of neonates were diagnosed using radiography, ultrasonography, computed tomography and necropsy immediately after death. Both neonates had caudal regression syndrome, butterfly vertebra, hydrocephalus, umbilical hernia, cleft palate and bow-legged hind-limb. At necropsy, neonates had mild fetal anasarca, cleft lip and the skull was remained non-union. At thoracic cavity, only three ribs and thoracic spines were existed and patent ductus arteriosus was found. At abnormal cavity, the renal ectopia was found with abnormal morphology. In the present case, those English bulldog neonates with multiple congenital malformation syndromes seriously suffered vertebral column anomalies and that may induced by neural tube defects in during embryonic period. To prevent congenital malformation occurring in English bulldog, further in depth studies are needed for the breed specific genetic diversity and for the reason of behind genetic abnormality in these breed.
A teratogenicity study of KTC-1, a new semisynthetic rifamycin antituberculous drug, was conducted in Sprague-Dawley rats. Dosages of KTC-1 0, 7, 21, and 63 mg/kg/day were administered to darns orally gayage from day 7 to day 17 of gestation. Two-third of dams per group were subjected to cesarean section on day 21 of pregnancy for examination of their fetuses, and the remaining one-third of darns per group were allowed to deliver naturally for postnatal examination of their offspring. At 21 mg/kg/day, an increase in the skeletal variations of F1 fetuses and a decrease in the body weight of F1 offspring were seen. At 63 mg/kg/day, a loss in body weight was observed in darns. An increase in fetal death rate, a decrease in litter size and body weight, and an increase in the incidence of visceral malforrnations and skeletal variations were found in F1 fetuses. In particular, lumar rib occurred at an incidence of 31%. In addition, an increase in the dead newborns at birth and neonatal deaths during the lactation period, a loss in body weight, and a decrease in spleen weight were observed in F1 offspring. There were no signs of maternal toxicity or embryotoxicity at 7 mg/kg/day. The results suggest that the no-effect dose level(NOEL)for dams is 21 mg/kg/day, and NOELs for F1 fetuses and offspring are 7 mg/kg/day.
Telomerase is a ribonucleoprotein complex whose function is to add telomeric repeats to chromosomal ends. Telomerase consists of two essential components, telomerase RNA template (hTR) and catalytic subunit (hTERT). hTERT is expressed only in cells and tissues positive for telomerase activity, i.e., tumor and fetal cells. In this report, the possibility of utilization of the hTERT promoter in targeted cancer gene therapy was tested. The hTERT promoter was cloned in the replacement of the CMV promoter, and the HSV-TK gene was subcloned to be controlled by the hTERT gene promoter in the adenovirus shuttle plasmid. Then, the recombinant adenovirus Ad-hT-TK was constructed and was infected into normal and human gynecological cancer cell lines. The selective tumor specific cell death by Ad-hT-TK was identified through these experiments, showing that Ad-hT-TK could be used for targeted cancer gene therapy.
Lycopene, an acyclic carotenoid found in tomatoes (Lycopersicon esculentum) and a number off fruits, has shown various biological properties, but its antifungal effects remain poorly understood. The current study investigated the antifungal activity of lycopene and its mode of action. Lycopene showed potent antifungal effects toward pathogenic fungi, tested in an energy-independent manner, with low hemolytic effects against human erythrocytes. To confirm the antifungal effects of lycopene, its effects on the dimorphism of Candida albicans induced by fetal bovine serum (FBS), which plays a key role in the pathogenesis of a host invasion, were investigated. The results showed that lycopene exerted potent antifungal activity on the serum-induced mycelia of C. albicans. To understand the antifungal mode of action of lycopene, the action of lycopene against fungal cell membranes was examined by FACScan analysis and glucose and trehalose-release test. The results indicated that lycopene caused significant membrane damage and inhibited the normal budding process, resulting from the destruction of membrane integrity. The present study indicates that lycopene has considerable antifungal activity, deserving further investigation for clinical applications.
A 14-year-old castrated male ShihTzu diagnosed with chronic kidney disease (CKD) 6 months prior was referred to our clinic. The patient had been experiencing symptoms such as vomiting, poor appetite and hind limbs weakness. Hematology tests showed that he had a non-regenerative anemia. With aggressive treatment, the patient's state had gotten worse. He showed ragged breath, vomiting blood and loss of consciousness temporarily. Hematocrit maintained low level. Gastric hemorrhage was strongly suspected by hematemesis. Whole blood transfusion was performed and heparin was used as an anticoagulant. Prior to transfusion, the blood cross matching between donor and patient was performed and the result was compatible. After the transfusion was stabilized, 1 mg of protamine sulfate for each 100 units of heparin was prepared and given intravenously over 3 minutes to reverse the effects of heparin. Immediately after protamine injection, the patient conducted severe anaphylactic shock. Protamine sulfate is used to reverse the anticoagulant action of heparin in dogs and humans. The adverse reaction of protamine sulfate range from mild reaction to fetal cardiac arrest. When using protamine sulfate as heparin neutralization, it can lead to the death of a patient cause of anaphylactic shock. For this reason, the protamine sulfate should be injected slowly with antihistamine and the clinician should carefully monitor patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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