Objectives Alismatis Rhizoma has been known to suppress inflammation and allergic reaction. However, the cellular target of Alismatis Rhizoma and its mechanism of action remain unclear. This study was designed to examine the effect of Alismatis Rhizoma extract (ALC) on the RBL-2H3 mast cells in vitro and on the OVA/alum sensitized mice ex vivo. Methods In the study, RBL-2H3 mast cells were cultured in minimal essential medium (MEM) for 24 hours, and treated separately with cyclosporin A and varying doses of ALC, and then stimulated with Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) (50 ng/ml) and Ionomycin ($0.5{\mu}M$). The levels of IL-13, IL-4 were measured by ELISA analysis. The mRNA levels of IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, GM-CSF, $TNF-{\alpha}$ were analyzed with Real-time PCR. Also, manifestations of MAPKs transcription factors and $NF-{\kappa}B$ p65 translocation were analyzed by western blotting in vitro. Subsequently, for ex vivo experiment, we induced allergic inflammation on Balb/c mice by OVA/alum and administered ALC orally. And we measured serum OVA-specific IgE level and IL-4, IL-13 in the splenocyte culture supernatant by ELISA analysis. Results ALC was shown to suppress mRNA expression of IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, GM-CSF, $TNF-{\alpha}$, and to inhibit the IL-13, IL-4 production. Also ALC reduced an activation of mast cells specific signal MAPKs transcription factors and $NF-{\kappa}B$ p65 from the western blot analysis in in vitro experiment. In ex vivo, ALC oral adminstration decreased the level of OVA-specific IgE in serum, and IL-4, IL-13 in the splenocyte culture supernatant. Conclusions ALC is shown to reduce inflammation and allergic response by suppressing Th2 cytokines through the regulation of transcription factors MAPKs and $NF-{\kappa}B$ p65 in mast cells. Administration of ALC suppressed OVA-specific IgE in ovalbumin allergy model through the inhibition of Th2 cytokine. In conclusion, ALC can be considered as an effective treatment for allergic diseases such as atopic dermatitis.
Ji-Won, Park;Jin-Mi, Park;Sangmi, Eum;Jung Hee, Kim;Jae Hoon, Oh;Jinseon, Choi;Tran The, Bach;Nguyen, Van Sinh;Sangho, Choi;Kyung-Seop, Ahn;Jae-Won, Lee
한국미생물·생명공학회지
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제50권4호
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pp.574-583
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2022
Ficus vasculosa Wall. ex Miq. (FV) has been used as a herbal medicine in Southeast Asia and its antioxidant activity has been shown in previous studies. However, it has not yet been elucidated whether FV exerts anti-inflammatory effects on activated-macrophages. Thus, we aimed to evaluate the ameliorative property of FV methanol extract (FM) on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory responses and the underlying molecular mechanisms in RAW264.7 macrophages. The experimental results indicated that FM decreased the production of inflammatory mediators (NO/PGE2) and the mRNA/protein expression of iNOS and COX-2 in LPS-stimulated RAW264.7 cells. FM also reduced the secretion of interleukin (IL)-1β, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-α and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Results also demonstrated that FM improved inflammatory response in LPS-stimulated A549 airway epithelial cells by inhibiting the production of cytokines, such as IL-1β, IL-6 and TNF-α. In addition, FM suppressed MAPK activation and NF-κB nuclear translocation induced by LPS. FM also upregulated the mRNA/protein expression levels of heme oxygenase-1 and the nuclear translocation of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 in RAW264.7 cells. In an experimental animal model of LPS-induced acute lung injury, the increased levels of molecules in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid were suppressed by FM administration. Collectively, it was founded that FM has anti-inflammatory properties on activated-macrophages by suppressing inflammatory molecules and regulating the activation of MAPK/NF-κB signaling.
Somatic embryogenesis has become a major tool in the study of plant embryology, as it is possible in culture to manipulate cells of many plant species to produce somatic embryos in a process that is remarkably similar to zygotic embryogenesis. Traditionally, the process has been studied by an examination of the ex vitro factors which influence embryo formation. Later structural, physiological and biochemical approaches have been applied. Host recently, molecular tools are being used. Together, these various approaches are giving valuable information on the process. This article gives an overview of somatic embryogenesis by reviewing information on the morphogenesis, physiology, biochemistry and molecular biology of the process. Topics covered include a brief description of the factors involved in the production of embryogenic cells. Carrot cell suspension is most commonly used, and the development of a high frequency and synchronous system is outlined. At the physiological and biochemical lev-els various topics, including the reactivation of the cell cycle, changes in endogenous growth regulators, amino acid, polyamine, DNA, RNA and protein metabolism, and embryogenic factors in conditioned medium are all discussed. Lastly, recent information on genes and molecular markers of the embryogenic process are outlined. Somatic embryogenesis, the best example of totipotency in plant cells, is not only an important tool in studies in basic biology, but is potentially of equal significance in the micropropagation of economically important plants.
Kim, Ju-Young;Jang, Jun Hwee;Maeng, Soohyun;Kang, Myung-Suk;Kim, Myung Kyum
Journal of Species Research
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제7권2호
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pp.151-160
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2018
Seven bacterial strains, 15J4M-1, 15J13-8, 16MFM10, 15J1-8, SR1-5-4, 15J13-6, and 15J8-11 assigned to the phylum Actinobacteria, Bacteroidetes, and Firmicutes were isolated from soil samples collected from Jeju, Korea. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequence revealed that strains 15J4M-1, 15J13-8, 16MFM10, 15J1-8, SR1-5-4, 15J13-6, and 15J8-11 were most closely related to Bacillus selenatarsenatis $SF-1^T$ (with 99.4% similarity), Brevibacterium luteolum $CF87^T$ (99.5%), Carnobacterium iners CCUG $62000^T$ (99.6%), Exiguobacterium profundum $10C^T$ (99.3%), Larkinella insperata LMG $22510^T$ (99.3%), Pseudokineococcus lusitanus CECT $7306^T$ (99.4%), and Spirosoma endophyticum $EX36^T$ (99.3%), respectively. This is the first report of these seven species in Korea.
The aim of this study was to evaluate the anti-helicobacter activity and anti-inflammatory activity of Angelica dahurica (AD). The minimum inhibitory concentration(MIC) of AD against Helicobacter pylori(H. pylori), expression of the H. pylori cagA gene in the presence of AD was determined. Inhibition of H. pylori urease by AD, inhibition of nitric oxide (NO) production in AGS cells was measured. IL-8 mRNA expression in AGS cells which were infected with H. pylori and IL-8 level was measured. The MIC of MeOH Ex. of AD was $250{\mu}g/mL$ and the expression of cagA gene was decreased about 88% in the presence of AD. The activity of H. pylori urease was inhibited 70% by AD. mRNA expression of IL-8 and the production of NO and IL-8 were significantly decreased in the presence of AD. In conclusion, AD showed anti-Helicobacter activity and has potent anti-inflammatory effect on H. pylori-induced inflammation in human gastric epithelial AGS cells.
An endemic endangered species, Aster altaicus var. uchiyamae (Danyang aster) B2015-0044, is cultivated at the Shingu Botanical Garden, which serves as the ex situ conservation institution for this species. In this work, we sequenced the chloroplast genome of A. altaicus var. uchiyamae B2015-0044. We found that the chloroplast (cp) genome of B2015-0044 was 152,457 base pairs(bps) in size: 84,247 bps of large single copy regions(LSC), 25,007 bps of inverted repeats(IRs), and 18,196 bps of small single copy regions. The B2015-0044 cp genome contains 79 protein-coding genes (PCGs), 4 RNA genes, 29 tRNA genes, and 3 pseudogenes. These results were identical to a previously reported cp genome (Park et al., 2017), except for two sites in introns and three in intergenic spacer (IGS) regions. For the intronic differences, we found that clpP.i1 had a 1-bp small simple repeat (SSR) (T) and petD.i had a 3-bp SSR (ATT). We found 1-bp SSRs in the IGSs of trnT_ggu~psbD and psbZ~trnG_gcc, C and A, respectively. The IGS of(ndhF)~rpl32 had a SNP. Based on our results, the cp genome of the A. altaicus var. uchiyamae can be classified into two genotypes, [C]1-[A]12-[T]12-[ATT]4-C and [C]2-[A]11-[T]11-[ATT]2-A.
Cell-penetrating peptides (CPPs) are short amino acids that have been widely used to deliver macromolecules such as proteins, peptides, DNA, or RNA, to control cellular behavior for therapeutic purposes. CPPs have been used to treat immunological diseases through the delivery of immune modulatory molecules in vivo. Their intracellular delivery efficiency is highly synergistic with the cellular characteristics of the dendritic cells (DCs), which actively uptake foreign antigens. DC-based vaccines are primarily generated by pulsing DCs ex vivo with various immunomodulatory antigens. CPP conjugation to antigens would increase DC uptake as well as antigen processing and presentation on both MHC class II and MHC class I molecules, leading to antigen specific CD4+ and CD8+ T cell responses. CPP-antigen based DC vaccination is considered a promising tool for cancer immunotherapy due to the enhanced CTL response. In this review, we discuss the various applications of CPPs in immune modulation and DC vaccination, and highlight the advantages and limitations of the current CPP-based DC vaccination.
The Bacterial community structure and its complexity of the enrichment culture during the isolation and screening of imidacloprid-degrading strain were studied using denaturating gradient gel electrophoresis analysis. The dominant bacteria in the original tea rhizosphere soil were uncultured bacteria, Rhizobium sp., Sinorhizobium, Ochrobactrum sp., Alcaligenes, Bacillus sp., Bacterium, Klebsiella sp., and Ensifer adhaerens. The bacterial community structure was altered extensively and its complexity reduced during the enrichment process, and four culturable bacteria, Ochrobactrum sp., Rhizobium sp., Geobacillus stearothermophilus, and Alcaligenes faecalis, remained in the final enrichment. Only one indigenous strain, BCL-1, with imidacloprid-degrading potential, was isolated from the sixth enrichment culture. This isolate was a gram-negative rod-shaped bacterium and identified as the genus Ochrobactrum based on its morphological, physiological, and biochemical properties and its 16S rRNA gene sequence. The degradation test showed that approximately 67.67% of the imidacloprid (50 mg/l) was degraded within 48 h by strain BCL-1. The optimum conditions for degradation were a pH of 8 and $30^{\circ}C$. The simulation of imidacloprid bioremediation by strain BCL-1 in soil demonstrated that the best performance in situ (tea soil) resulted in the degradation of 92.44% of the imidacloprid (100 mg/g) within 20 days, which was better than those observed in the ex situ simulations that were 64.66% (cabbage soil), 41.15% (potato soil), and 54.15% (tomato soil).
Objectives : Rheumatoid arthritis(RA) is a systemic & a chronic inflammatory autoimmune disease . A chronic , locally destructive inflammmatory reaction in human is examplified by the synovitis present in some connective tissue disorder. The presence of a number of cytokines, $TNF-{\alpha}$, iNOS & expression of nitric oxide, NF-kB p65 activation implies an important role of cellular immune response in RA inflammatory reaction. This study was designed to evaluate on the effects of the Homnis Placenta herbal acupuncture on EX-LE201 & ST 35 reducing expression of LPS-induced arthritis model in mice. Materials and Methods : Homnis Placenta herbal acupuncture was inserted into 10 rats induced rheumatoid arthritis. The acupunctures were injected into the EX-LE201 and ST35 points. Such indexes were measured the inhibition of inducible nitric oxide synthase(iNOS) expression, nitric oxide(NO) production in vitro experiment and Tumor Necrosis $Factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$ & Nuclear Factor kappa $B(NF-{\kappa}B)$ p65 activation, synovial hyperplasia, angiogenesis and fibrosis in synovial membrane of knee joint of mice in vivo experiment. Results : 1.Homnis Placenta Herbal acupuncture inhibited iNOS mRNA and NO in RAW 264.7 cell of LPS-induced rheumatoid arthritis in a dose dependent manner. 2.Homnis Placenta Herbal acupuncture also showed significant inhibition of $TNF-{\alpha}$ & $NF-{\kappa}B$ p65, activation, synovial hyperplasia, angiogenesis and fibrosis in synovial membrane of knee joint of mice. Conclusion : These results suggest that Homnis Placenta Herbal acupuncture has an therapeutic effects on LPS induced-rheumatoid arthritis by inhibiting $TNF-{\alpha}$ activation.
Previously we reported that THI 52 inhibits tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ mRNA expression in mouse peritoneal macrophages exposed to LPS plus $IFN-{\gamma}.$ In the present study, the effects of THI 52 on vascular reactivity ex vivo, and iNOS protein expression (rat lung) were investigated in LPS-treated rats. Treatment of THI 52 concentration-dependently reduced not only serum nitrite production but also the expression of iNOS protein in rat lung tissues. Thoracic aorta taken from LPS injected rat for 8 h ex vivo resulted in suppression of vasoconstrictor effects to phenylephrine (PE), which was restored by THI 52 (20 mg/kg) 30 min prior to LPS. When measured iNOS activity, treatment of THI 52 concentration-dependently reduced the enzyme activity in RAW 264.7 cells activated with LPS plus $IFN-{\gamma}.$ Likewise, iNOS activity was significantly reduced in lung tissues taken those rats that were injected THI 52 prior to LPS injection compared with LPS injection alone. These results strongly suggest that THI 52 can suppress iNOS gene expression induced by LPS, and restore the vascular contractility to PE. Thus, THI 52, a new synthetic isoquinoline alkaloid, may be beneficial in inflammatory disorders where production of NO is excessed by iNOS expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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