• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제25권1호
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• pp.44-51
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• 2012

Calcium ions play an important role in the establishment and maintenance of pregnancy, but molecular and cellular regulatory mechanisms of calcium ion action in the uterine endometrium are not fully understood in pigs. Previously, we have shown that calcium regulatory molecules, transient receptor potential vanilloid type 5 (TRPV6) and calbindin-D9k (S100G), are expressed in the uterine endometrium during the estrous cycle and pregnancy in a pregnancy status- and stage-specific manner, and that estrogen of conceptus origin increases endometrial TRPV6 expression. However, regulation of S100G expression in the uterine endometrium and conceptus expression of S100G has been not determined during early pregnancy. Thus, we investigated regulation of S100G expression by estrogen and interleukin-$1{\beta}$ (IL1B) in the uterine endometrium and conceptus expression of S100G during early pregnancy in pigs. We obtained uterine endometrial tissues from day (D) 12 of the estrous cycle and treated with combinations of steroid hormones, estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$) and progesterone ($P_4$), and increasing doses of IL1B. Real-time RT-PCR analysis showed that $E_2$ and IL1B increased S100G mRNA levels in the uterine endometrium, and conceptuses expressed S100G mRNA during early pregnancy, as determined by RT-PCR analysis. To determine if endometrial expression of S100G mRNA during the implantation period was affected by the somatic cell nuclear transfer (SCNT) procedure, we compared S100G mRNA levels in the uterine endometrium from gilts with SCNT-derived conceptuses with those from gilts with conceptuses derived from natural mating on D12 of pregnancy. Real-time RT-PCR analysis showed that levels of S100G mRNA in the uterine endometrium from gilts carrying SCNT-derived conceptuses was significantly lower than those from gilts carrying conceptuses derived from natural mating. These results showed that S100G expression in the uterine endometrium was regulated by estrogen and IL1B of conceptus origin, and affected by the SCNT procedure during early pregnancy. These suggest that conceptus signals regulate S100G, an intracellular calcium transport protein, for the establishment of pregnancy in pigs.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제22권4호
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• pp.347-354
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• 2014

Larrea nitida is a plant that belongs to the Zygophyllaceae family and is widely used in South America to treat inflammatory diseases, tumors and menstrual pain. However, its pharmacological activity remains unclear. In this study we evaluated the property of selective estrogen receptor modulator (SERM) of Larrea nitida extracts (LNE) as a phytoestrogen that can mimic, modulate or disrupt the actions of endogenous estrogens, depending on the tissue and relative amount of other SERMs. To investigate the property of SERM of LNE, we performed MCF-7 cell proliferation assays, estrogen response element (ERE)-luciferase reporter gene assay, human estrogen receptor (hER) binding assays and in vivo uterotrophic assay. To gain insight into the active principles, we performed a bioassay-guided analysis of LNE employing solvents of various polarities and using classical column chromatography, which yielded 16 fractions (LNs). LNE showed high binding affinities for $hER{\alpha}$ and $hER{\beta}$ with $IC_{50}$ values of $1.20{\times}10^{-7}$ g/ml and $1.00{\times}10^{-7}$ g/ml, respectively. LNE induced $17{\beta}$-estradiol (E2)-induced MCF-7 cell proliferation, however, it reduced the proliferation in the presence of E2. Furthermore, LNE had an atrophic effect in the uterus of immature rats through reducing the expression level of progesterone receptor (PR) proteins. LN08 and LN10 had more potent affinities for binding on $hER{\alpha}$ and ${\beta}$ than other fractions. Our results indicate that LNE had higher binding affinities for $hER{\beta}$ than $hER{\alpha}$, and showed SERM properties in MCF-7 breast cancer cells and the rat uterus. LNE may be useful for the treatment of estrogen-related conditions, such as female cancers and menopause.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제25권1호
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• pp.93-102
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• 1998

Normal and abnormal follicular growth and steroidogenesis depend on gonadotropins as well as intraovarian peptides, which may mediate or potentiate gonadotropin action. Inhibin also affect follicular development and steroidogenesis and may play a role in dominant follicle selection and follicular atresia. Therefore, we studied the differences of serum inhibin, gonadotropin and androgen levels in the women with only the ultrasound findings and no disorder, and polycystic ovary (PCO) with ovulatory disturbance. We prospectively analysed forty-three women with PCO. The diagnosis of PCO was based on typical appearance of the ovaries on TVS. Twelve women with regular menstrual cycle and normal ovarian morphology were selected as control. Basal levels of inhibin, luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH), estradiol $(E_2)$, testosterone (T), androstenedione (ADD), dehydroepiandrosterone-sulfate (DS), prolactin and TSH in serum were determined. There were significant differences in basal LH levels and LH/FSH ratio between the control and the women with PCO. The basal levels of inhibin and $E_2$ in the oligo-amenorrheic PCO (N=34) were significantly higher than those in the control. There was higher negative correlation between the inhibin and T levels in the oligo-amenorrheic PCO, but, not in the regular cycling PCO. Also, there was higher positive correlation between the LH and T levels in the oligo-amenorrheic PCO, but not in the regular cycling PCO. These data presume that the initial event of PCO is elevated pituitary LH secretion. Elevated levels of LH may down-regulate LH receptors on granulosa cells and also cause hypertrophy of the thecal layer. High level of androgen secreted by the hypertrophied thecal layer may stimulate inhibin secretion from granulosa cells and can be converted to estrogen by extraovarian tissues and could serve to augment pituitary sensitivity to GnRH with a resultant secretion of more LH than FSH. Inhibin may inhibit FSH action on granulosa cell in the PCO follicle, impairing follicular development and dominant follicle selection resulted in ovulatory disturbance.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제37권3호
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• pp.253-259
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• 2010

목 적: 과배란유도 환자에서의 우성난포의 성장속도와 임상인자들과의 연관성을 평가하고자 하였다. 연구방법: 체외수정시술을 위한 과배란유도 313주기를 대상으로 혈중 호르몬 농도를 측정하고 과배란유도 주기 중 난포 직경의 변화를 초음파를 이용하여 연속적으로 측정하였다. 우성난포의 성장 속도를 계산하고, 임상지표와의 연관성을 분석하였다. 결 과: Gonadotropin releasing hormone 작용제와 길항제 주기 사이에 우성난포의 성장속도의 유의한 차이는 관찰되지 아니하였다. 우성난포의 성장속도와 환자의 연령, 체질량 지수, 생리 시작 3일의 follicle stimulating hormone, luteinizing hormone, 에스트라디올, 획득 난자의 수, 수정률 등의 임상지표는 유의한 연관성이 없었다. 결 론: 본 연구 결과는 우성난포의 성장속도는 난소 반응을 포함한 임상지표와 연관성이 없는 독립적인 변수임을 시사한다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제13권1호
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• pp.35-41
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• 2009

겨울철 사육조건이 양식산 뱀장어 Anguilla japonica의 인위적인 성성숙 유도 및 번식에 미치는 영향을 조사하였다. 봄철 salmon pituitary extracts(SPE)을 이용하여 성성숙 유도 예정인 양식산 암컷 뱀장어 친어를 8주의 겨울철 사육기간 동안, 4개의 사육환경(해수저온, $10^{\circ}C$; 해수고온, $20^{\circ}C$; 담수저온, $10^{\circ}C$; 담수고온, $20^{\circ}C$)에 각각 순치하여 사육하였다. 그 후 각각의 실험구의 뱀장어를 해수 $20^{\circ}C$로 이동하여 SPE를 매주 1회 8주 동안 복강 주사하였다. 그 결과, 생식소증량지수(GSI)와 성호르몬(E2)의 농도가 해수 실험구에서 유의적으로 증가하였으며, 특히 해수저온 실험구에서 가장 높은 값을 나타냈었다. 번식률 또한 해수저온 실험구에서 가장 높게 나타났다. 이러한 결과는 겨울철 사육환경이 봄철의 성성숙 유도에 효과적인 것으로 추측되며, 양식산 뱀장어의 성성숙 유도와 부화율 향상을 위한 기초자료로 유용할 것으로 사료된다.

• Journal of Veterinary Science
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• 제24권1호
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• pp.4.1-4.16
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• 2023

Background: In vitro culture of preantral follicles is a promising technology for fertility preservation. Objectives: This study aims to investigate an optimized three-dimensional (3D) fetal bovine serum (FBS)-free preantral follicle culture system having a simple and easy operation. Methods: The isolated follicles from mouse ovaries were randomly divided in an ultra-low attachment 96-well plates supplement with FBS or bovine serum albumin (BSA) culture or encapsulated with an alginate supplement with FBS or BSA culture. Meanwhile, estradiol (E₂) concentration was assessed through enzyme-linked immunosorbent assay of culture supernatants. The diameter of follicular growth was measured, and the lumen of the follicle was photographed. Spindle microtubules of oocytes were detected via immunofluorescence. The ability of oocytes to fertilize was assessed using in vitro fertilization. Results: The diameters were larger for the growing secondary follicles cultured in ultra-low attachment 96-well plates than in the alginate gel on days 6, 8, and 10 (p < 0.05). Meanwhile, the E2 concentration in the BSA-supplemented medium was significantly higher in the alginate gel than in the other three groups on days 6 and 8 (p < 0.05), and the oocytes in the FBS-free system could complete meiosis and fertilization in vitro. Conclusions: The present study furnishes insights into the mature oocytes obtained from the 3D culture of the preantral follicle by using ultra-low attachment 96-well plate with an FBS-free system in vitro and supports the clinical practices to achieve competent, mature oocytes for in vitro fertilization.

• 한국양식학회지
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• 제22권1호
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• pp.23-27
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• 2009

황점볼락 생식주기에 따른 성호르몬과 난황단백전구체의 혈중 농도변화를 조사하였다. Testosterone 농도는 배란기(12월)에서만 유의하게 높은 평균 3,091 pg/mL의 혈중 농도를 보이나 나머지 발생 단계에서는 매우 낮은 농도를 나타내면서 각 발생단계 상호간의 변화는 유의한 차이를 보이지 않았다(P<0.05). 혈중 $E_2$, 농도는 난황형성기 (9월)에 가장 높은 평균 농도(531.8 pg/mL)를 나타낸 후 배란기까지 다른 발생 단계의 혈중 농도보다 유의하게 높은 농도를 유지하다가 배 발생기부터 급격히 낮아지는 경향을 보였다(P<0.05). 이러한 난청형성기간 동안 높았다가 임신기에 낮아지는 $E_2$의 농도는 난생 어류에서와 같이 난 태생어류에서도 난모세포의 성숙에 관여하는 것으로 추정된다. DHP의 농도는 난황형성기와 배란기에 유의하게 높았으며, 배발생, 산출 후, 미성숙시기의 혈중농도는 발생단계에 상관없이 낮은 농도를 보였다(P<0.001). DHP는 난청형성기에 높은 혈중 농도를 나타내고 있어 난황형성과 밀접한 관계를 가지는 것으로 추측된다. 혈중 VTG 농도를 난소발달 즉 미성숙(8월), 난황 형성기(10월), 배란기(12월) 산출 후(3월) 등 4단계로 나뉘어 조사한 결과, 혈중 VTC농도는 미성숙 시기(8월)와 산출 후(3월)의 혈중농도가 나머지 발생단계에 비해 유의하게 낮지만 이들 발생 단계간의 농도 차는 보이지 않았다. 한편 난청형성기와 배 발생 시기에는 다른 시기에 비해 유의하게 높은 값을 보이나, 양 발생 단계간의 유의성은 나타나지 않았다(P<0.05). 난황단백전구체가 10월부터 급격히 증가하여 배란기까지 높은 수준을 유지하고 산출 후에 급격히 낮아지는 경향은 난모세포의 성장과 난황형성에 밀접하게 관여하고 있음을 시사한다.

• 한국양식학회지
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• 제18권3호
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• pp.167-172
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• 2005

능성어 정자의 안정적 확보를 위하여 MT $0.5{\sim}2.0mg/kg$ BW를 어체 근육내 삽입하여 성전환을 유도하였다 사용한 실험어는 전장 $41.0{\pm}1.3cm$, 체중 $1.4{\pm}0.1kg$이었다. 실험 시작시 능성어 생식소는 주로 gonia cells과 주변인기 단계 난모세포를 가지고 있었다. 실험 종료시 대조구의 생식소는 실험 시작시와 유사하였다. 0.5 mg MT/kg BW 처리구 생식소는 실험 종료 때 소엽내강에 정원세포와 정세포 그리고 정자무리들이 대부분 차지하고 기부에 수정관이 형성되었으나, 일부 어린 난모세포들이 산재하였다. 1.0과 2.0 mg MT/kg BW처리구는 소엽내강과 기부의 수정관에 정자무리들로 가득 차 있었다. 정자는 $1.0{\sim}2.0mg$ MT/kg BW 처리구에서 얻을 수 있었다. MT 처리구의 T혈중농도는 대조구보다 2주 후부터 6주 후까지 높았으나(P<0.05), 배정이 가능한 8주째 대조구와 유사하였다(P>0.05). 11-KT 혈중농도는 MT 1.0처리구는 2주 후부터 6주째까지, 2.0 mg MT/kg BW 처리구는 2주 후부터 실험 종료 때까지 대조구 보다 높았다(P<0.05). $E_2$는 모든 실험어 일부에서 검출되었다.

• 한국수산과학회지
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• 제31권4호
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• pp.599-607
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• 1998

동사리, Odontobutis platycephala 암컷의 생식주기를 밝히고자 1995년 12월부터 1991년 11월까지 생식소 중량지수(gonadosomatic iadex GSI), 난소의 난소여포 발달 및 혈중 성스테로이드 호르몬 변화 양상을 조사하였다. GSI는 7월과 8힐에 0.35$\~$0.72였으며, 난소내 대부분의 난모세포들은 염색인기와 주변인기 단계였다(출현 빈도: $87\%\~96\%$). 9월의 GSI는 1.20$\pm$0.12였으며, 일부의 난황포기의 난모세포들과 난황형성기의 난모세포도 출현하였으나 극히 일부에 지나지 않았다(각각의 출현 빈도:$22.8\%,\;2.2\%$). 10월부터 GSI는 완만하게 증가하여 12월 4.59$\pm$0.61에 달하였으며 난황형성기 난모세포들이 약간 증가하였다(12월의 출현 빈도: $22.1\%$). 1월에는 GSI의 큰 변화는 없었으나 난황형성기 난모세포들은 12월보다 더 증가하였다(출현 빈도: $51.2\%$). 2월부터 GSI는 급격히 증가하여 3월에 10.51$\pm$1.04로 연중 가장 높았으며, 난소의 난황형성기 난모세포들도 연중 최고 수준에 이르렀다(3월의 출현 빈도. $60\%$). 4월부터 GSI는 감소하여 6월에는 1.11$\pm$0.35였으며 성숙기의 난모세포를 가진 난소여포들과 배란 후 퇴화되는 난소여포들이 나타났고, 이들의 출현 빈도는 4월에 가장 높았다(성숙기 난모세포출현 빈도: 4월 $40\%$, 5월 $12\%$, 6월 $5\%$). Estradiol-17$\beta$($E_2$)의 혈중 농도는 8월에 0.84$\pm$0.20$ng/m{\ell}$로 12월까지는 비슷한 수준에 머물렀으나 1월부터는 증가하여 3월에 2.85$\pm$0.35$ng/m{\ell}$로 연중 가장 높았으며, 4월부터는 감소하여 7월에 0.14$\pm$0.02$ng/m{\ell}$로 가장 낮았다(P<0.05). 17$\alpha$-hydroxprogesterone(17$\alpha$-OHP)의 혈중 농도는 3월에 13.37$\pm$0.52$ng/m{\ell}$로 높았을 뿐 다른 시기동안은 $3ng/m{\ell}$이하로 유의한 변화를 보이지는 않았다(P<0.05). 17$\alpha$, 20$\beta$-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17$\alpha$, 20$\beta$-P)의 혈중 농도는 4월에 0.74$\pm$0.09$ng/m{\ell}$로 최고 수준이었고 5월까지는 0.54$\pm$0.07$ng/m{\ell}$로 높은 농도를 유지했지만 그외의 시기에는 0.26ng/ml 이하로 연중 유의한 변화는 없었다(P<0.05). 이러한 결과를 종합하면, 동사리의 완숙 및 산란기는 4월$\~$6월로서 주산란기는 4월과 5월 사이이며, 7월$\~$8월은 휴지기, 9월$\~$12월은 성장기, 1월$\~$3월은 성숙기로 구분되는 생식주기를 보였으며, 이러한 변화는 성스테로이드 호르몬의 변화양상과 밀접한 관련이 있는 것으로 생각된다.

• Toxicological Research
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• 제27권3호
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• pp.181-184
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• 2011

Screening of estrogenic activity on dichloro diphenyl trichloroethane (DDT), dichloro diphenyl dichloro ethylene (DDE), dieldrin, heptachlor, aldrin, chlordane, lindane, polybrominated diphenyl ethers (PBDE) and parabens was compared using Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) test guideline 455 (TG455). The estrogenic activity of DDT was 58,000-fold ($PC_{50}$, $1.67{\times}10^{-6}$ M) less than $17{\beta}$-estradiol($E_2$) ($PC_{50}$, $2.88{\times}10^{-11}$ M) but DDE, dieldrin, heptachlor, aldrin, chlordane, lindane and PBDE did not show any estrogenic activity in this assay system. In the case of paraben compounds, the rank of relative transcriptional activation (logRTA) was butyl paraben -1.63752 ($PC_{50}$, $1.25{\times}10^{-7}$ M) > isobutyl paraben -2.34008 ($PC_{50}$, $6.3{\times}10^{-7}$ M) > ethyl paraben -2.64016 ($PC_{50}$, $1.26{\times}10^{-6}$ M) > isopropyl paraben -2.73993 ($PC_{50}$, $1.58{\times}10^{-6}$ M) > propyl paraben -2.84164 ($PC_{50}$, $2.0{\times}10^{-6}$ M). Our data suggest that OECD test guideline TG455 may be useful as a screening tool for potential endocrine disruptors.