BA은 치즈, 와인, 젓갈, 소시지, 된장 등 미생물에 의한 발효과정을 거치는 식품뿐만 아니라 채소류, 과일, 육류와 같은 비발효 식품군에서도 발견된다. 식품 내 BA 오염에 대한 관리를 목적으로 제조공정 및 유통과정에서 신속하게 다량의 시료를 분석하고 제품에 대한 항시 모니터링 기술이 요구된다. 이를 위해 BA 특이항체 및 BA 분해효소를 이용하는 BA 검출 및 센싱 기술이 개발되고 있다. HisN 특이 항체를 이용한 ELISA 키트는 상용화 되었으며 다양한 식품에 적용되고 있다. 산화적 탈아미노반응을 촉매하는 아민산화효소는 항체기반의 ELISA 방식에 비해 다양한 BA 분석에 사용되고 있으며, 효소반응에 의해 생성되는 $H_2O_2$의 산화환원반응에 의해 발생하는 전류를 측정함으로써 BA의 함량을 정량할 수 있는 전류측정식 바이오센서 개발에 적용되고 있다. BA 신속검출을 위한 바이오센서의 개발 연구 동향에 발맞추어 국내 전통발효식품에 적합한 기술개발이 요구되며, 산업현장 적용 연구를 거쳐 국내 전통발효식품의 안전성을 확보해야 할 것으로 판단된다.
A non-instrumental immunochromatographic (ICG) strip-test and direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (DC-ELISA) for aflatoxin B1 (AFB1) determination were developed and optimized. The detection limits of ICG strip-test and DC-ELISA were 0.5 and 0.004 ng/mL, respectively, and these methods possessed a cross-reaction to aflatoxins. The results of spiked samples by both methods were coincided with the amount spiked AFB1 and the comparative analyses of 172 real samples by 2 immunoassays and high performance liquid chromatography (HPLC) showed a good agreement. Especially, the ICG strip-test is easier to perform and quicker, but less sensitivity than DC-ELISA. Both methods could analyze a high sample throughput with short time, but the sample throughput of ICG strip-test was better. Therefore, the ICG strip-test can be used as a simple, easy, non-instrumental, and fast screening technique for AFB1 determination.
Kim, Yesol;Shukla, Shruti;Ahmed, Maruf;Son, Seokmin;Kim, Myunghee;Oh, Sejong
한국축산식품학회지
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제32권6호
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pp.706-712
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2012
The present study was aimed to produce a chicken polyclonal antibody against Cronobacter muytjensii and to develop an immunoassay for its detection. Purification of anti-C. muytjensii IgY from egg yolk was accomplished using various methods such as water dilution and salt precipitation. As a result, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis produced two bands around 30 and 66 kDa, corresponding to a light and a heavy chain, respectively. Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (IC-ELISA) was performed to determine the effectiveness of the chicken IgY against C. muytjensii. The optimum conditions for detecting C. muytjensii by indirect ELISA and checkerboard titration of the antigen revealed an optimum average absorbance at the concentration of 18 ${\mu}g/mL$, having ca. $10^8$ coated cells per well. The anti-C. muytjensii IgY antibody had high specificity for C. muytjensii and low cross-reactivity with other tested pathogens. In this assay, no cross-reactivity was observed with the other genera of pathogenic bacteria including Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterobacter aerogenes, Salmonella Enteritidis and Listeria monocytogenes. In addition, detection of C. muytjensii in infant formula powder showed a low matrix effect on the detection curve of IC-ELISA for C. muytjensii, with similar detection limit of $10^5$ CFU/mL as shown in standard curve. These findings demonstrate that the developed method is able to detect C. muytjensii in infant formula powder. Due to the stable antibody supply without sacrificing animals, this IgY can have wide applications for the rapid and accurate detection of C. muytjensii in dairy foods samples.
Coxiella burnetii (C burnetii) is the causative agent of Q fever in animal and human. The distribution of the disease has been documented around world. In this study we developed the competitive enzyme linked immunosorbent assay(cELISA) and compared it with indirect immunofluorescent assay(IFA). A monoclonal antibody(Mab) against C burnetii and a peroxidase-conjugated anti-mouse IgM were used as an indicator system competing against antibody in animal serum or as an indicater of the absence of antibody. Sera were considered antibody positive when the percentage inhibition index(PI index) is upper than 30. PI index is calculated as 100-[sample OD/Mab OD)${\times}100$]. Among 162 bovine serum samples, 23 samples were antibody positive both in cELISA and IFA. And 156 samples showed same results. From goat with experimentally induced infection with C burnetii the antibody was detected 20 days early in cELISA compared to IFA. On the basis of present findings, it was demonstrated that cELISA is a reliable diagnostic method for The detection of specific antibodies against C burnetii infection.
시유, 분유, 발효유에 존재하는 우유알레르겐인 ${\beta}$-Lactoglobulin (BLG)를 측정하기 위해 면역 blotting 및 간접결합면역 분석법(Competitive-indirect Enzyme linked Immunosorbent Assay; Ci-ELISA)으로 분석하였다. Immunoblotting 결과, 발효유에서는 우유 알레르기 환자의 IgE와의 반응이 나타나지 않았고 분유 및 시유에서는 약하지만 반응이 나타났다. 다클론 항체 및 우유 알레르기 환자의 IgE로 이들의 BLG 함량을 정량한 결과, BLG 함량은 시유가 가장 높았으며 발효유는 매우 낮았다. 이상의 결과에서 발효유에서는 가장 낮은 BLG 함량이 측정되어 우유 알레르기 환자에 대한 저알레르기원성 식품으로 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
After infection of male mice with the plerocercoids (spargana) of Spirometra mansoni, serum levels of estrogen and testicular weight were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and weighing machine, respectively. The serum level of estrogen increased progressively in infected mice compared with normal controls, whereas the testicular weight of infected mice decreased significantly (P < 0.05). These results suggest that certain substances from spargana change the steroid hormone metabolisms in the host by unknown pathways, and chronic infection may contribute to change of the function of steroid hormone target organ, i.e., testis, in male mice.
가공식품중의 우유단백질 분석을 위하여 효소면역측정법, ELISA를 개발하였다. 특이 항체를 생산하기 위해 열에 안정하고 우유의 주요한 단백질인 ${\alpha}_{s1}-CN$을 토끼에 면역하였다. 항${\alpha}_{s1}-CN$ 항체를 이용하여 간접경합 ELISA를 실시한 결과 검출한계는 $0.1\;{\mu}g/mL$ 이었고 ${\alpha}_{s1}-CN$, skim milk, ${\beta}-CN$과 whey protein isolate에 대한 특이항체의 반응성은 각각 100%, 37%, 0.14%과 0.04% 이었다. 그러나 다른 우유단백질인, ${\beta}-lactoglobulin,\;{\alpha}-lactalbumin$, bovine serum albumin 과 대두단백질인 isolated soy protein 에 대해서는 거의 반응성을 보이지 않았다. 샌드위치 ELISA 결과는 검출한계가 $0.01\;{\mu}g/mL$로 간접경합 ELISA 에 비하여 10배 정도 민감해져 따라서 이를 시료 분석에 이용하였다. 시유에 1-10%의 whole CN을 첨가한 spike test 결과 whole CN의 평균 회수율이 94.8%(CV, 8.2%)으로 나타났다. 식품재료와 유가공 제품에 대한 whole CN의 정량분석을 실시한 결과 탈지유는 29%, WPI는 0.03%, 농후 요구르트는 0.25%였으며 가공치즈는 6.9%로 나타났다.
Lee, Jong-Kwon;Park, Jae-Hyun;Kim, Hyung-Soo;Yun, So-Mi;Chung, Seung-Tae;Juno H. Eom;Park, Seung-Hee;Gi ho Seo;Oh, Hye-Young
한국독성학회:학술대회논문집
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한국독성학회 2002년도 Molecular and Cellular Response to Toxic Substances
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pp.185-185
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2002
A murine local lymph node assay (LLNA) has been developed as an alternative test to guinea pig maximization test. The disadvantage of LLNA is the need for the use of radioactive material. In this study, we aimed to investigate the development of non-radio isotopic endpoint for local lymph node assay in Balb/c mice using Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) based on Bromodeoxyuridine (BrdU) incorporation.(omitted)
남조류 독소인 마이크로시틴은 호수에서 매우 미량 존재하기 때문에 이를 정확히 정량 분석하기가 쉽지 않다. 본 연구에서는 소양호에서 채취한 물시료 중에 포함된 남조류 독소, 마이크로시틴을 정량 분석하기 위하여 두 가지 서로 다른 정량 분석법을 시도하였으며 이 둘의 정량 결과를 비교${\cdot}$분석 하였다. 첫째는 고체상 추출과 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)를 이용한 분석법을 이용하였으며 둘째는 마이크로시틴의 단일클론항체를 이용한 효소면역흡착분석법(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)을 이용하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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