• 대한의생명과학회지
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• 제4권1호
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• pp.57-63
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• 1998

본 연구는 돼지 지방세포 원형질막 단백질에 대한 항체를 면양에서 생산하고 생산된 항체의 역가 및 조직특이성을 조사하기 위하여 실시되었다. 지방세포, 뇌, 심장, 신장, 간장 및 비장으로부터 원형질막 단백질을 추출하였으며, 그중 지방세포로부터 분리한 원형질막 단백질을 면양(체중 40kg)에 3주 간격으로 3회 면역 접종시켰다. 면역접종 전, 3차 면역접종 후 10일 (AS-1), 12일 (AS-2)및 14일 (AS-3)째에 각각 면양의 경정맥으로부터 혈액을 채취하여 혈청을 분리하였다. 항체의 역가 및 기타 조직과의 교차반응성은 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)로 측정하였다. 면양에서 생산된 돼지 지방세포 원형질막 단백질에 대한 항혈청은 지방세포 원형질막 단백질과 강한 항원-항체 반응을 나타내었다. 항혈청의 교차반응성을 조사한 결과, 기타 조직의 원형질막 단백질과는 매우 미약한 반응을 나타낸 반면 지방세포 원형질막 단백질과는 강한 반응을 나타내었다. 이러한 항혈청의 지방세포 원형질막 단백질과의 조직특이적인 반응은 anti-sheep immunoglobulin G-horseradish peroxidase conjugate를 2차 항체로 이용한 immunoblot에 의해서도 재확인되었다. 이상의 결과, 면양으로부터 생산된 돼지 지방세포 원형질막 단백질에 대한 항체는 높은 역가를 지니고 있었으며, 지방세포 원형질막 단백질에 특이적으로 작용함을 알 수 있었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제42권4호
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• pp.310-316
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• 1999

대두가공제품 중에 존재하는 Bowman-Birk protease inhibitor(BBPI) 함량을 protease 저해활성 측정 및 경합 Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA)로 살펴보았다. 항체제조를 위한 BBPI는 ion exchange chromatography와 전기영동 후 gel slicing 방법으로 시판 soybean trypsin-chymotrypsin inhibitor로부터 순수, 분리하였다. 순수분리한 BBPI를 면역원으로 rabbit anti-BBPI antibody를 조제하였으며 단백질 농도별 titration방법으로 BBP에 비교적 선택적으로 결합하는 항체임을 확인하였다. 이를 이용한 경합 ELISA 방법으로 BBPI를 정량하기 위한 표준 정량곡선을 작성하였으며 시료용액중의 BBPI 함량이 $0.03{\sim}30\;{\mu}g/ml$ 범위일 경우에 정량적인 분석이 가능하였다. 대두품종별 chymotrypsin 저해활성은 $8,462{\sim}12,428\;U/g$이었으며 BBPI 함량은 $482{\sim}692\;mg%$ 이었다. 시판 대두 가공제품 중에서 5종의 콩나물은 건물량 기준으로 $10,695{\sim}13,249\;U/g$의 chymotrypsin 저해활성과 $529{\sim}803\;mg%$의 BBPI 함량을 나타내었으며 일부 두부제품에서도 68.9 mg%정도의 BBPI가 검출되었다. 그 밖의 두유, 된장, 고추장 및 간장 등의 대두발효식품, 탈지대두박 등에서는 chymotrypsin 저해활성 및 BBPI가 거의 검출되지 않았다.

• 원예과학기술지
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• 제31권6호
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• pp.764-771
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• 2013

최근 고추재배에 있어 CMV-P1감염은 상품성 저하와 생산량 감수를 발생시키는 매우 심각한 문제이다. 본 실험에서는 역병 저항성 품종인 PR계통을 포함한 국내 시판 56품종과 미국에서 도입해 온 31품종 도입자원 및 농촌진흥청 유전자원센터(RDA Genebank)로부터 받은 112개의 고추 유전자원을 CMV-P1 저항성 검정에 사용하였다. 저항성 검정은 인공 접종 후 24일 후와 51일 후 ELISA를 실시하였다. 36개 시판품종 중 '무한질주' 품종이 CMV-P1에 저항성이었다. 모든 PR품종과 중도저항성인 'NuMex Twilight'와 'Chainese Giant'를 제외한 29개 외국 도입고추는 감수성이었다. RDA Genebank의 112계통의 고추 유전자원에서는 저항성 계통이 9, 중도저항성을 나타내는 계통이 17, 나머지 86계통은 모두 감수성으로 조사되었다. 국내 시판 고추품종은 거의 CMV-P1에 높은 감수성을 보이는 것으로 확인되는 반면, 외국 도입자원과 유전자원의 17.2%가 저항성이거나 중도저항성으로 확인되었다. 본 연구 결과로 확인된 저항성 고추는 CMV-P1 저항성 고추육종에 유용한 유전자원으로 이용될 수 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제35권3호
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• pp.366-372
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• 2003

유전자재조합 콩의 Agrobacterium sp. CP4 유래 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase(CP4 EPSPS)를 편리하고 경제적으로 검출하고자 효소면역측정법(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)을 개발하였다. CP4 EPSPS에 대해 특이적인 다클론 및 단클론항체를 생산하였다. 다클론 항체의 경우 sandwich ELISA(검출한계, 0.03${\mu}g/mL$)는 competitive indirect ELISA(1${\mu}/mLg$)보다 CP4 EPSPS의 검출감도가 낮았다. 생산된 단클론항체 3종의 CP4 EPSPS에 대한 인식부위는 Mab1과 Mab2는 서로 같은 부위를 Mab3는 다른 부위를 인식하는 것으로 나타났다. 한편, 다클론항체 및 단클론항체를 조합하여 실시한 sandwich ELISA의 검출감도를 서로 비교하였다. 그 결과, 항원 포획단계에서 단클론항체 Mab2를 코팅하고 다클론항체-horseradish peroxidase(HRP) conjugate를 사용하였을 때 가장 양호한 검출감도(검출한계, 0.02${\mu}g/mL$)를 나타내었다. 본 연구에서 개발한 sandwich ELISA는 제초제 저항성 유전자재조합 콩의 분석에 적용가능할 것으로 생각된다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권4호
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• pp.397-402
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• 1991

폐츱충(Paragonimus westermani) 감염시 탈낭유충은 숙주내 여러조직을 거친 후 폐에 기생하게 되는데 이때 조직반응과 더불어 혈액내 호산구와 IgE 항체가의 변등이 일어난다. 이 실험에서는 백서에 폐흡충을 감염시키고 혈청내 총 IgE와 특이 IgG 항체값을 시간 경과별로 측정하여 감염후 혈청내 항체가의 변증을 관찰하였다. 폐흡충 퍼낭유충 20개를 백서에 경구 감염시키고 시기별(0,1,2,3,4,0,8주)로 IgE의 변동을 avidin-biotin을 이용하여 효소표식 면역검사법 (enzyme-linked immunosorbent assay: ELISA)으로 측정하였으며 IgG는 통상적인 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. 실험군의 혈청내 총 IgE치는 감염 3주와 3주 후에 흡광도가 각각 0.18±0.042, 0.18±0.081이었으나, 4주에 0.28±0.151로 급격히 중가하었으며 8주까지 지속적인 상승(0,43±0,055)을 보였다. 반면 대조군의 경우 전 실험기간을 통해 0.07∼0.12로 낮은 항체가가 유지되었다. 또한 실험군의 혈청내 IgG 항체는 감염 3주 후에 흡광토 0.20±0,032로 증가하기 시작하여 8주에 0.31±0.067을 보였으나 대조군에 비해 크게 증가되지 않았다. 이상의 결과로 보아 비호적숙주인 백서에서 폐흡충의 감염이 IgE 및 IgG 항체를 증가시킴을 알 수 있었다.

• 한국어병학회지
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• 제22권2호
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• pp.167-172
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• 2009

본 연구에서는 넙치 혈청의 보존 조건이 ELISA 결과에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 항 BSA 넙치 혈청을 이용해 보존 온도, 보존 기간 및 해동 횟수에 따른 ELISA값을 비교하였다. 넙치 혈청을 보존 온도 (-80, -20, 4 및 20${^{\circ}C}$) 및 기간 (1, 30, 69 및 124일)에 따른 ELISA OD 값을 비교한 결과, 모든 시료에서 뚜렷한 OD값의 차이는 확인되지 않았다. -80℃ 및 -20${^{\circ}C}$에 보존된 혈청을 사용하여 해동횟수 (1, 5, 10회)에 따른 ELISA OD값을 비교한 결과, 해동을 반복한 혈청 및 미동결 혈청의 OD값은 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 이상의 결과로 넙치 혈청은 -80, -20, 4 및 20${^{\circ}C}$에서 124일간 보존하거나 혈청을 10회 반복 해동하여도 ELISA 결과에 영향을 끼치지 않는 것이 확인되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제32권5호
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• pp.991-996
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• 2000

식품 중 대두단백질의 분석을 위한 효소면역측정법(ELISA)을 개발하고자 하였다. 대두단백질의 주 구성 성분이며 열에 안정한 glycinin의 acidic subunits(AS)에 대한 특이항체를 생산하였고 이를 이용하여 간접경합 ELISA(ciELISA)를 확립하였다. 시료처리조건은 urea와 DTT로 처리함으로써 용해시킨 다음 $100^{\circ}C$에서 1시간 열처리하였고 cystine을 함유한 용액으로 재생시켰다. 이러한 시료의 처리조건하에서 ISP를 $60-90^{\circ}C$까지 열처리한 시료에 대해서도 분석결과의 변화가 거의 없는 것으로 나타났다. 표준곡선 상에서 ISP의 검출한계는 0.3 ${\mu}g/mL$이었다. 항AS 항체의 다른 단백질에 대한 반응성을 검토한 결과, 탈지분유, 카제인, 난백분말, ovalbumin에서 0.1%이하로 미약하게 반응하거나 거의 반응하지 않는 것으로 나타났다. ISP를 0.5-2%첨가한 탈지분유에 대한 ISP 분석 회수율은 평균 76%(C.V., 11.5%)였으며 ISP를 0.5-3% 첨가하여 시험 제조한 소세지의 경우 평균 83%(C.V., 19%)로 나타났고 시판 소세지 6점에 함유된 ISP의 함량은 평균 1.27%로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.877-880
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• 2004

In this study, we determined the content of chitooligosaccharides (COS) in Korean commercial salt-fermented shrimps by competitive direct enzyme-linked immunosorbent assays (cdELISAs), using anti-COS mixture (COSM) antibody and COSM horseradish peroxidase (HRP) conjugate. When COS6 was spiked into salt-fermented shrimps at the level of $10-300\mu{g/g,}$ the average recovery was $120\pm19%$ ($mean\pmS.D.$). The COS contents of the 92 samples of Korean commercial salt-fermented shrimps collected during February 2000 and August 2002 were $36.3\pm20.7\mug$ COS6 equivalent/g (expressed as "$\mug/g$" hereafter). Among the samples, the COS contents of yuk-jeot ( $40.3 \pm 22.5 \mug/g, n=27$) and buksaewoojeot ($40.2 \pm 21.6 \mug/g, n=5$) were higher than the others. The COS contents of salt-fermented shrimps produced at Gwangcheon ($47.1 \pm 20.7 \mug/g, n=18$) and Gomso ($44.1 \pm 21.8 \mug/g, n=6$) areas were higher than those produced at the other areas. This is the first report to determine COS of salt-fermented shrimps by cdELISA.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제34권1호
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• pp.35-40
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• 1992

효소항체법에 의한 바이러스성 무름병의 조기진단 가능성을 구명하고자 무름병 바이러스 검출을 위한 효소항체법의 최적조건을 구명하고 이와 같은 조건으로 바이러스 검출감도 및 검출시기를 조사 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 효소항체법에 사용되는 항혈청의 농도는 15$\mu\textrm{g}$/$m\ell$이 적당하였으며, 효소결합 항체는 100배 희석액이 적당하였다. 2. 효소항체법에 의한 무름병 바이러스의 최소검출농도는 15ng/$m\ell$d;았거. 2증 aisdirgjlrtlsqkqd,; 32.5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$보다 약 2,100배 정도 검출감도가 높았다. 3. 무름병 바이러스 접종 후 바이러스 검출시기는 효소항체법의 경우 24시간째로 2중면역확산법의 48시간보다 조기에 검출 가능하였다. 4. 이상의 결과를 종합해 볼 때 바이러스성 무름병의 조기진단법으로 바이러스 검출감도가 높고 동시에 다량의 시료를 검정할 수 있는 효소항체법이 가능한 것으로 판명되었다.

• 대한핵의학회지
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• 제28권1호
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• pp.112-123
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• 1994

${\gamma}$-Glutamyltransferase (GGT: E.C. 2.3.2.2.) is a glycoprotein enzyme which is involved in glutathione metabolism and amino acid transport through the plasma membrane. It is distributed widely in several organs including liver and kidney. Several isozymes of GGT have been reported and some of the isozymes may be associated with hepatocarcinogenesis. We have produced six monoclnal antibodies (mAbs) against GGT purified from the liver of 2-acetamidofluorene (AAF) treated rats. All of the six mAbs were obtained by immunizing mice with liver GGT Six hybridomas which produced anti-GGT Abs were extensively subcloned and injected into the peritoneal cavity of BALB/c mice to obtain large quantities of Abs. These mAbs were purified from ascites by ammonium sulfate precipitation and protein A sepharose CL-4B column chromatography. Using these mAbs we preformed enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), radioimmunoassay (RIA), immunohistochemistry (IHC), and autoradiography (ARG) to study the distribution of GGT isozyme in tissue. The results indicate that GGT-mAb 1 is specific for the AAF treated liver GGT, GGT-mAb 5 for the normal liver GGT, and GGT-mAb 6 for the normal kindey GGT. These mAbs may be used to evaluate the distribution of GGT isozymes in different tissues.