The hydrolysis of pen shell by-product by the APL $440^{TM}$, selected as the suitable alkaline protease on the basis of cost per unit enzyme activity, was optimized using response surface methodology(RSM). A model equation obtained from the results of RSM could be used for the prediction of degree of hydrolysis(DH) as follows: $%DH=51.126+2.419\;pH+2.415T-2.426S-2.846pH^2-4.211T^2-3.014t^2+2.419S^2$. From the ridge analysis, the conditions favoring the highest degree of hydrolysis were pH 10.2, $61.4^{\circ}C$, 2.58 hrs reaction time, 30.9% substrate concentration, and 0.32% enzyme/substrate ratio. The effect of autolysis affecting degree of hydrolysis in pen shell by-product was negligible. Hydrolysate produced under the optimal condition increased 3.5 times and 7.7 times in amino nitrogen and salinity, respectively, comparing with raw pen shell by-product.
This study was performed to determine the optimal hydrolysis conditions for the production of hydrolysates, including water-soluble dietary fiber from Chinese cabbage, with commercial enzymes. The optimal pH and temperature for hydrolysis of the hemicellulose fraction were pH 5.0 and $40^{\circ}C$, and optimal enzyme concentrations were 45 units and 21 units for Shearzyme plus and Viscozyme L, respectively. The yields of the hydrolysate including the water-soluble dietary fiber from the hemicellulose fraction by Shearzyme plus and Viscozyme L were 22.64 and 24.73%, respectively, after a 72 h reaction. The molecular weight distribution of alcohol-insoluble fiber was characterized by gel chromatography; degradation of hemicellulose increased with increasing reaction time. Our results indicate that the hemicellulose fraction was degraded to water-soluble dietary fiber by enzymatic hydrolysis, and its hydrolysate could be utilized as new watersoluble food materials.
Two conserved amino acid residues in the extra sugar-binding space near the catalytic site of Thermus maltogenic amylase (ThMA) were analyzed for their role in the hydrolysis and transglycosylation activity of the enzyme. Site-directed mutagenesis was carried out by replacing N33l with a lysine (N331K), E332 with a histidine (E332H), or by replacing both residues at the same time (N331K/E332H). The measured $K_m$ values indicated that affinities toward all substrates tested, including starch, pullulan, ${\beta}-cyclomaltodextrin$, and acarbose, were lower in all the mutants compared to that of wild-type ThMA, leading to reduced hydrolysis activity. In addition, the lower ratio of transglycosylation to hydrolysis in the mutants compared to that in the wild-type ThMA indicated that these mutants preferred hydrolysis to the transglycosylation reaction. These results demonstrated that the conserved dipeptide at 331 and 332 of ThMA is directly involved in the formation and accumulation of transfer products by accommodating acceptor sugar molecules.
This study is for the effective pretreatment and saccharification of lignocellulosic biomass for a transport fuel receiving attention. The waste water during the pretreatment of biomass is major factor for determining the price of biofuel. Therefore, we conducted high concentration of organosolv pretreatment for decline waste water and reusing the solvent. We confirmed effect of organosolv pretreatment by components analysis and enzymatic hydrolysis of pretreated biomass. The corn stover was used for and 99.5 wt% of ethanol as a organosolv pretreatment. The pretreatment condition was varied 130 to $190^{\circ}C$ during the designated reaction times and the effect of pretreatment was investigated by enzymatic hydrolysis. The highest glucose conversion was more than 68% the pretreatment condition of $190^{\circ}C$ for 70 min or more. The solid remaining was more than 70% and almost of cellulose and hemicellulose were survived.
Kim, Sang-Bum;Ku, Min-Jung;Cho, Won-Mo;Ki, Kwang-Seok;Kim, Hyeon-Shup;Nam, Myoung-Soo
Food Science of Animal Resources
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v.30
no.6
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pp.923-929
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2010
Colostral whey prepared from colostrum (pooled from first six post-partum milkings) was heated for 10 min at $100^{\circ}C$ Heated colostral whey was incubated with 1% enzymes (protein equivalent basis) for 15, 30, 60, 90, and 120 min at $50^{\circ}C$. Papain, pepsin, trypsin, and alcalase produced different degrees of hydrolysis (DH), 10.66%, 12.42%, 10.83%, and 25.31%, respectively, at an incubation time of 120 min. The SDS-PAGE reveals that significant amounts of bovine serum albumin (BSA), ${\beta}$-lactoglobulin (${\beta}$-LG), and ${\alpha}$-lactalbumin (${\alpha}$-LA) survived papain digestion. In contrast, pepsin completely removed BSA but not ${\beta}$-LG present in heated colostral whey. Alcalase completely eliminated BSA, ${\beta}$-LG, and ${\alpha}$-LA. This differential hydrolysis was confirmed by reversed-phase HPLC analysis. Using ion-exchange chromatography, fraction-1 (F-1) was obtained from alcalase hydrolysate at a NaCl gradient concentration of 0.25 M. Reversed-phase HPLC chromatograms of alcalase F-1 showed numerous small peaks, which probably indicate that a variety of new peptides were produced. Iron content of alcalase F-1 was 28.94 ppm, which was the highest among all enzyme fractions, whereas iron content of colostral whey was 36.56 ppm. Main amino acids contained in alcalase F-1 were Thr (15.45%), Glu (14.12%), and Ser (10.39%). Therefore, alcalase can be used to generate good iron-binding peptides in heated colostral whey, and the resulting iron-binding peptides could be suitable as a value-added food ingredient for food supplements.
Effect of enzymatic modification with pepsin, papain and trypsin was studied on functional properties of isolated sesame meal protein hydrolysates. Solubility of protein hydrolysates distinctively increased from 2% to $53{\sim}94%$ at pH 4. Emulsifying properties showed marked increase 6 fold and 4.5 fold at degree of 10%, 20% hydrolysis by trypsin and degree of 10% hydrolysis by papain. The emulsion stability of the protein was unstable by heat treatment for 30 min. at $80^{\circ}C$. Foaming properties were also enhanced by enzymatic hydrolysis except at degree of 30% hydrolysis. Bulk density and water absorption of protein with trypsin and papain decreased about 0.1 g/ml and $0.3{\sim}0.7\;ml/g$, but oil absorption was increased about 1 ml/g.
For the purpose of utilizing agricultural waste products for animal feeds, chemical analysis of some important agricultural wastes in Korea and enzymatic hydrolysis of rice hull were undertaken and summarized as follows: 1) Rice hull and straws of rice, barley and wheat were analyzed for their proximate principles and carbohydrate composition. 2) A strain of Aspergillus niger was selected as having the highest productivity of rice hull decomposing activity among many species of molds. The optimum conditions for the culture on washed wheat bran were. 3 days of culture period, 55% moisture content and neutral pH and one hour was proper for the extraction of enzymes. 3) The extent of hydrolysis of xylan and rice hull by a crude enzyme preparation from this strain was 63% and 7%, respectively, and the optimum pH for its activity was 4.0 and 4.5, respectively. 4) Enzymatic hydrolysis of rice hull was generally suppressed by gamma-ray irradiation ($0.5{\sim}5\;Mrad$, in dry state), but the effect was less by irradiation in wet state.
The aim of this study was to develop novel intestinal specific drug delivery systems with pH sensitive swelling and drug release properties. The carboxyl group of ibuprofen was converted to a vinyl ester group by reacting ibuprofen and vinyl acetate as an acylating agent in the presence of catalyst. The glucose-6-acrylate-1, 2, 3, 4-tetraacetate (GATA) monomer was prepared under mild conditions. Cubane-1, 4-dicarboxylic acid (CDA) linked to two 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA) group was used as the crosslinking agent (CA). Methacrylic-type polymeric prodrugs were synthesized by the free radical copolymerization of methacrylic acid, vinyl ester derivative of ibuprofen (VIP) and GATA in the presence of cubane cross linking agent. The structure of VIP was characterized and confirmed by FTIR, $^1H$ NMR and $^{13}C$ NMR spectroscopy. The composition of the cross-linked three-dimensional polymers was determined by FTIR spectroscopy. The hydrolysis of drug polymer conjugates was carried out in cel-lophane membrane dialysis bags, and the in vitro release profiles were established separately in enzyme-free simulated gastric and intestinal fluids (SGF, pH 1 and SIF, pH 7.4). The detection of a hydrolysis solution by UV spectroscopy at selected intervals showed that the drug can be released by hydrolysis of the ester bond between the drug and polymer backbone at a low rate. Drug release studies showed that increasing the MAA content in the copolymer enhances the rate of hydrolysis in SIP. These results suggest that these polymeric prodrugs can be useful for the release of ibuprofen in controlled release systems.
Cho, Dae-Yeon;Jo, Kyungae;Cho, So Young;Kim, Jin Man;Lim, Kwangsei;Suh, Hyung Joo;Oh, Sejong
Food Science of Animal Resources
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v.34
no.3
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pp.362-371
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2014
This study utilized commercially available proteolytic enzymes to prepare egg-white protein hydrolysates (EPHs) with different degrees of hydrolysis. The antioxidant effect and functionalities of the resultant products were then investigated. Treatment with Neutrase yielded the most ${\alpha}$-amino groups (6.52 mg/mL). Alcalase, Flavourzyme, Protamex, and Ficin showed similar degrees of ${\alpha}$-amino group liberation (3.19-3.62 mg/mL). Neutrase treatment also resulted in the highest degree of hydrolysis (23.4%). Alcalase and Ficin treatment resulted in similar degrees of hydrolysis. All hydrolysates, except for the Flavourzyme hydrolysate, had greater radical scavenging activity than the control. The Neutrase hydrolysate showed the highest 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging activity ($IC_{50}=3.6mg/mL$). Therefore, Neutrase was identified as the optimal enzyme for hydrolyzing egg-white protein to yield antioxidant peptides. During Neutrase hydrolysis, the reaction rate was rapid over the first 4 h, and then subsequently declined. The $IC_{50}$ value was lowest after the first hour (2.99 mg/mL). The emulsifying activity index (EAI) of EPH treated with Neutrase decreased, as the pH decreased. The EPH foaming capacity was maximal at pH 3.6, and decreased at an alkaline pH. Digestion resulted in significantly higher 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and ABTS radical scavenging activity. The active peptides released from egg-white protein showed antioxidative activities on ABTS and DHHP radical. Thus, this approach may be useful for the preparation of potent antioxidant products.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.25
no.5
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pp.786-790
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1996
The changes in chemical constituents of onion in Korea and the degree of hydrolysis in onion by-drolysates by treatment of viscozyme L, celluclast 1.5L, pectinex and cereflo were investigated. Proximate compositions of onion in Korea were as follows; The contents of moisture, protein, lipid, carbohydrate and ash were 89~90%, 1.8~1.9%, 0.4~0.5%, 7.1~8.5% and 0.3~0.5%, respectively. Major free sugars were identified to be glucose, fructose and sucrose and major free amino acids were as cysteine, histidine, arginine and glutamic acid. The degree of hydrolysis by treatment of viscozyme L, celluclast 1.5L, pectinex and cereflo was 69%, 71%, 80% and 62%, respectively. During the enzymatic hydrolysis, free sugar and total sugar content increased however, pyruvic acid content decreased significantly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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