This study was carried out to investigate the total polyphenol and flavonoid contents and antioxidative activities of enzymatic digests from dried Citrus unshiu and C. grandis peels. The yields of digests from dried C. unshiu and C. grandis peels were high in viscozyme (a carbohydrase) and kojizyme (a protease), and enzymatic digests from dried C. grandis peels appeared highly comparable to those of C. unshiu. Total polyphenol contents were high in ultaflo (a carbohydrase) and alcalase and flavourzyme (proteases), and the digests from dried C. unshiu peels appeared high in comparison to C. grandis. Total flavonoid contents were high in ultaflo, alcalase, and water extract. DPPH radical scavenging activities appeared very high in digests from dried C. grandis peels in comparison to C. unshiu, and was the highest in viscozyme and kojizyme. The viscozyme digest displayed particularly high activity. Hydrogen peroxide scavenging activities increased somewhat with increasing amounts of digests, but displayed very high activity, more than 91%, except kojizyme the digest from dried C. unshiu peel, at 2.0 mg/mL. Alkyl radical scavenging activities increased rapidly with increasing amounts of digest, and all enzyme digests from dried C. unshiu and C. grandis peels displayed very high activities at more than 0.5 mg/mL. Hydroxyl radical scavenging activities increased rapidly with increasing amounts of digests, and all enzymatic digests from dried C. unshiu and C. grandis peels displayed relatively low activities in comparison to other activated oxygen species.
Allergen extracts from dust mites and cockroaches commonly found in Korean homes were used to evaluate their enzymatic activity as they are believed to influence allergenicity. Allergen extracts were prepared from 3 dust mite species (Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus, and Tyrophagus putrescentiae) and 3 cockroach species (Blattella germanica, Periplaneta americana, and P. fuliginosa) maintained in the Korea National Arthropods of Medical Importance Resource Bank. Proteins were extracted in PBS after homogenization using liquid nitrogen. The activities of various enzymes were investigated using the API Zym system. No significant difference in phosphatase, lipase, or glycosidase activity was observed among the 6 allergen extracts, but much difference was observed in protease activity. Protease activity was assessed in more detail by gelatin zymography and the EnzChek assay. Extract from T. putrescentiae showed the highest protease activity, followed by those of the cockroach extracts. Extracts from D. farinae and D. pteronyssinus showed only weak protease activity. Gelatinolytic activity was detected mainly in a 30-kDa protein in D. farinae, a 28-kDa protein in D. pteronyssinus, a > 26-kDa protein in T. putrescentiae, a > 20-kDa protein in B. germanica, and a > 23-kDa protein in P. americana and P. fuliginosa. The information on various enzymatic activities obtained in this study may be useful for future studies. In particular, the strong protease activity found in cockroach extracts could contribute to sensitization to cockroach allergens, which is known to be associated with the development of asthma.
SC092 strain, producing a polysaccharide degrading enzyme, was isolated from the seawater. This strain was identified as Microbulbifer sp. using the comparative sequence analysis against known 16S rRNA sequence. A polysaccharide degrading enzyme from this strain was used to acquire the enzymatic extracts of Sargassum fulvellum. DPPH radical scavenging and SOD activity of the enzyme extracts of S. fulvellum were about 61.9% and 82.9% at 2 mg/mL, respectively. Nitrite scavenging activities was 52.5% at 2 mg/mL on pH 1.2. In addition, ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity was also increased in a dose-dependent manner and was about 52.7% at 2 mg/mL. To determine the influence of enzyme extracts of S. fulvellum on alcohol metabolism, the generating activity of reduced-nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) by alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) were measured. ADH and ALDH activities were 118.0% and 177% at 2 mg/mL, respectively. ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity of enzyme extracts of S. fulvellum was remarkably increased in a dose-dependent manner and was about 52.7% at 2 mg/mL. These results indicate alcoholizing and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities can be enhanced by the enzymatic extracts of S. fulvellum.
Tyrosinases are related to the enzymatic browning of plants and attract the major scientific interest for the prevention of it. Three tyrosinase isozymes ($P_1$, $P_2$ and $P_3$) from pine needles were purified to homogeneity and characterized the factors that affect their activities. The L-ascorbic acid and ${\beta}$-mercaptoethanol notably inhibited the enzymatic activities of the three isozymes. The sodium diethyldithiocarbamate was a competitive inhibitor of isozymes with the $K_i$ values of $P_1$(0.030 mM), $P_2$(0.015 mM) and $P_3$(0.019 mM), respectively. Their enzyme activities were however, increased by the addition of most metal ions. The optimum pH for the three isozymes was 9.0~9.5 and the optimum temperatures ranged from 55 to $60^{\circ}C$ using L-DOPA as substrate.
Park, Sung-Hoon;Cui, Xun;Ahn, Dalrae;Lee, Eun Byeol;Cha, Dong Seok;Jeon, Hoon;Zee, Ok Pyo;Kim, Youn-Chul;Kim, Dae Keun
Natural Product Sciences
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v.20
no.2
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pp.80-85
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2014
In the course of screening for antioxidant compounds from natural plants in Korea by measuring the radical scavenging effect, a methanol extract of the flower buds of Daphne genkwa S. et Z. (Thymelaeaceae) was found to show a potent antioxidant activity. Subsequent activity-guided fractionation of methanol extract of D. genkwa led to the isolation of four compounds from the ethyl acetate soluble fraction. The chemical structures were elucidated as genkwanin (1), 3'-hydroxygenkwanin (2), apigenin (3), and tiliroside (4) by spectroscopic techniques. Among them, compound 2 showed the significant anti-oxidative effect on DPPH. And compound 2 showed the significant riboflavin-and xanthine-originated superoxide quenching activities. To verify the antioxidant enzymatic activities of compound 2, the SOD enzymatic activity was measured spectrophtometrically using prepared Caenorhabditis elegans homogenates. The results showed that compound 2 was able to elevate SOD activity of C. elegans in a dose dependent manner. Moreover, compound 2 decreased the intracellular ROS accumulation of worms.
The effect of chitosan on enzymatic activities and on bioactive compounds was characterized during germination at $25^{\circ}C$ for 7 days to search for a method to produce a germinated black rice. The germination rate was reduced by the addition of lactate and chitosan. The rotting rate was greatly decreased by chitosan, suggesting that the addition of chitosan into a germination solution might be an effective method for controlling fungal contamination during the germination of cereals. The addition of 100 and 200 ppm chitosan increased $\alpha$-amylase activity after 7 days by up to 152 % and 197 %, respectively. The activities of $\beta$-amylase and $\beta$-glucosidase were lower with 200 ppm chitosan than in distilled water and 100 ppm lactate. The amount of total soluble phenolics and total flavonoids decreased rapidly for four days and thereafter remained constant until the seventh day. The antioxidant activity of germinated black rice, in terms of hydrogen-donating activity, increased slowly and did not correspond to the changes of total soluble phenolics and total flavonoids. The amount of phytic acid was reduced by the addition of 200 ppm chitosan compared to distilled water, indicating that chitosan could be used as an elicitor for the increase of phytase activity during the germination of black rice.
Caliskan, Mahmut;Ozcan, Birgul;Turan, Cemal;Cuming, Andrew C.
BMB Reports
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v.37
no.3
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pp.339-342
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2004
Germination is a process which characterized with nescient synthesis of genes. Among the genes synthesized during the germination of wheat embryos, germin genes, proteins and their enzymatic activity were defined. Germin is a water soluble homopentameric glycoprotein which is remarkable resistant to degradation by a broad range of proteases including pepsin. Germin proteins found to have strong oxalate oxidase activity which produces hydrogen peroxide by degrading oxalic acid. The current study, aimed to localize the germin genes, proteins and enzymatic activities in developing coleoptiles which is a rapidly growing protective tissue of leaf primordium and shoot apex. Non-radioactively abeled germin riboprobes were employed to localize germin mRNAs in situ. FITC (Fluorescein isothiocyanate) and alkaline phosphatase linked anti-germin antibodies were used to localize germin proteins under the fluorescence and light microscopy and finally germin enzymatic activity was localized by using appropriate enzyme assay. The results revealed that in coleoptiles germin genes, proteins and their enzymatic activity were predominantly associated with the cells of epidermis and vascular bundle sheath cells.
Hizikia fusiformis hydroysates by five carbohydrases (Viscozyme, Celluclast, Termamyl and Ultraflo) and five proteases (Protamex, Kojizyme, Neutrase, Flavourzyme and Alcalase) were investigated for their extraction efficacy (yield and total total polyphenolic content) and antioxidative activity (DPPH radical and hydrogen peroxide scavenging activity). Termamyl and Ultraflo of the carbohydrases and Flavourzyme and Alcalase of proteases were selected by their high eficacy of extraction and antioxidative activity. Selected enzymes were used to investigate the optimum enzymatic reaction time and dosage (enzyme/substrate ratio) suitable for hydorolysis. Optimum reaction time for the enzymatic hydrolysis was 3 days and optimum dosage of hydrolysis was observed as 5%. Simultaneously, Ultraflo of the two carbohydrases and Alcalse of the two proteases were selected as the most effective enzymes. Combination of Ultraflo and Alcalase under optimum hydrolysis conditions could intensify the extraction efficacy of antioxidative materials form H. fusiformis. The hydrolysate obtained by combining the enzymes was separated into four different molecular weight fractions (<1kD, 1-10 kD, 10-30 kD and >30 kD) and recorded the polyphenolic content distribution and respective antioxidative ability. The fraction <1kD was identified as less effective and those fractions > 1kD indicated comparatively higher antioxidative activities related to their polyphenolic content.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.37
no.3
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pp.9-16
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2005
This study was carried out to investigate the characteristics of extracellular cellulase and xylanase from 4 selected different species, such as enzyme activity and stability by pH, temperature and metal ions, for application into enzymatic deinking system. The optimal temperature and pH for enzyme activity of Bacillus pumilus I, B. subtilis I, B. pumilus II and B. subtilis II were mainly $40{\sim}60^{\circ}C$ and pH $6.0{\sim}7.0$, respectively. Certain metal ions, calcium and cobalt, elevated enzyme activity, even though there were different results of enzyme activities based on various metal ions in 4 different species. With these results we suggest that enzymatic deinking system should be proceed at $50^{\circ}C$ with neutral pH condition.
Enzymatic extracts were prepared from the blueberry (Vaccinium corymbosum L.) collected in Jeju, Korea. Five carbohydrases namely AMG, Celluclast, Termamyl, Ultraflo and Viscozyme, and five proteases namely Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex were used to prepare the enzymatic extracts. Antioxidant properties of each extracts were studied using stable 1,1-diphenyl 2-picrylhydrazyl (DPPH), reactive oxygen species (ROS), nitric oxide (NO) scavenging, metal chelating assays and lipid peroxidation inhibitory activity in hemoglobin-induced linoleic acid system. The phenolic content of all enzymatic extracts was in the range of 517.85-597.96 mg/100 g dried sample. DPPH and NO${\cdot}$scavenging, and metal chelating assays exhibited prominent activities. Viscozyme showed the highest DPPH activity $(0.046{\pm}0.002\;mg/mL)$ while AMG Showed the highest activity in NO${\cdot}$scavenging $(0.339{\pm}0.011\;mg/mL)$. All the extracts exhibited strong metal chelating activities. Blueberry enzymatic extracts also showed relatively good activity in hydrogen peroxide scavenging. AMG showed the highest lipid peroxidation inhibitory activity $(0.28{\pm}0.01\;mg/mL)$ in hemoglobin-induced linoleic acid system. In this results, the blueberry, which has potential antioxidant components, may be a good candidate as a natural antioxidant source.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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