Kim, Mi-Sun;Yoon, Suk-Ran;Jun, Woo-Jin;Park, So-Young;Yang, Young;Shim, Sang-In;Hwang, Kwang-Woo;Chung, Jin-Woong
Molecular & Cellular Toxicology
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제1권4호
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pp.262-267
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2005
Using genetic engineering, the Vitreoscilla (bacterial) hemoglobin gene (vgb) was integrated stably into the chromosomes of and Burkholderia cepacia. Similar to previous results, the wild type VHb improved growth for Burkholderia cepacia and degradation of benzoic acid under both normal and low aeration conditions. The stable expression of VHb enhanced these parameters. The results demonstrate the possibility that the positive effects provided by VHb may be augmented by protein engineering.
Cockroaches have been recognized as a major cause of asthma. Bla g 4 is one of the most important German cockroach allergens. The aim of this study is to investigate IgE reactivity to the recombinant Bla g 4 (rBla g 4) in the sera of allergic patients and identify linear IgE binding epitope. For protein expression, full-length Bla g 4 (EF202172) was divided into 5 overlapping peptide fragments (E1: aa 1-100, E2: aa 34-77, E3: aa 74-117, E4: aa 114-156, and E5: aa 153-182). The full-length and 5 peptide fragments of Bla g 4 was generated by PCR and over-expressed in E. coli BL21 (DE3). The IgE binding reactivities of the full-length and peptide fragments were measured by ELISA using 32 serum samples of cockroach allergy. The sera of 8 patients (25%) reacted with rBla g 4. Four sera (100%) showed IgE-binding reactivity to full-length and peptide fragment 4, and 2 sera (50%) reacted with peptide fragment 2. One (20%) serum reacted with peptide fragment 3. The results of ELISA using overlapping recombinant fragments indicated that the epitope region was located at amino acid sequences 34-73 and 78-113, and major IgE epitope of Bla g 4 was located at amino acid sequences 118-152 of C-terminal. B-cell epitope analysis of German cockroach allergen Bla g 4 could contribute to the strategic development of more specific and potentially efficacious immunotherapy.
Objectives: In order to investigate the relation between environmental pollution and its effect on human health in large-scale industrial complex regions, monitoring studies have been conducted since 2003. The main purpose of this Gangneung study is to produce background data which can be compared with several large-scale industrial complex regions such as Ulsan, Sihwa, Banwol, Gwangyang, Yeosu, Pohang and Cheongju Daesan industrial complexes. Methods: In this Gangneung study, 1,007 local residents were recruited and the framework of this study was designed to evaluate and monitor health effects associated with low-level but long-term exposure to environmental pollutants. A survey was performed based on personal questionnaires, medical check-ups, and allergy skin prick tests for twelve common allergens. The authors reviewed the prevalence rate of skin allergens in Gangneung compared with in large-scale industrial areas. The results are summarized as follows. Results: The diagnosis prevalence and medical treatment prevalence of asthma were lower than in industrial complex regions, but allergic rhinitis was higher. The allergy skin test prevalence was 26.0% and the most common allergens were dust mites (D. pteronysinus 16.7% and D. farinae 16.3%). Conclusions: The positive findings of the skin prick test were similar with large-scale industrial complex regions in Korea. Further study is required to find the cause of the regional differences in skin prick prevalence.
Electronic cigarettes (e-cigarettes) are becoming increasingly popular worldwide and their cellular effects warrant further evaluation. In this study, we investigated the effects of an e-cigarette cartridge solution on allergen related asthmatic airway inflammation (AI) and airway hyperresponsiveness (AHR), when it is delivered by intratracheal route in mice. Asthmatic AI and AHR were induced by systemic sensitization to ovalbumin (OVA) followed by intratracheal, intraperitoneal, and aerosol allergen challenges in BALB/c mice. The cartridge solution of e-cigarette (containing 16 mg/ml nicotine) was diluted 50 times and $100{\mu}l$ of the diluted solution was intratracheally instilled to OVA-sensitized (OVA-S) mice two times a week for 10 weeks. Long-term e-cigarette inhalation elicited no remarkable changes in the activities of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase enzymes in serum, however, increased infiltration of inflammatory cells including eosinophils, into airways from blood, aggravated the asthmatic AI and AHR, and stimulated the production of cytokines such as interleukin (IL)-4, IL-5 and IL-13, and OVA-specific IgE production. Our data suggest that the inhalation of e-cigarette solutions can function as an important factor to exacerbate the allergy-induced asthma symptoms. Further studies are needed to address the effects of e-cigarette solutions on human health.
Seogwon Lee;Myung-Hee Yi;Yun Soo Jang;Jun Ho Choi;Myungjun Kim;Soo Lim Kim;Tai-Soon Yong;Ju Yeong Kim
Parasites, Hosts and Diseases
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제61권1호
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pp.60-71
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2023
Cockroaches can cause allergic sensitization in humans via contact with their feces or frass. Antibiotics can affect concentration of major allergen and total bacteria production in German cockroaches (Blattella germanica). This study examined the ability of antibiotic-treated German cockroaches to induce allergic airway inflammation and the effect of antibiotics on their lipopolysaccharide and Bla g1, 2, and 5 expression levels. Specifically, we measured the ability of German cockroach extract (with or without prior antibiotic exposure) to induce allergic inflammation in human bronchial epithelial cells and a mouse model of asthma. Bacterial 16S rRNA and lipopolysaccharide levels were lower in ampicillin-treated cockroaches than in the control group. The Bla g1, Bla g2, and Bla g5 expression in ampicillin-treated cockroaches decreased at both the protein and RNA levels. In human bronchial epithelial cell lines BEAS-2B exposed to the ampicillin-treated extract, expression levels of interleukin-6 and interleukin-8 were lower than that in the control group. The total cell count and eosinophil count in bronchoalveolar lavage fluid was also lower in mice exposed to the ampicillin-treated extract than in those exposed to normal cockroach extract. Mouse lung histopathology showed reduced immune cell infiltration and mucus production in the ampicillin group. Our results showed that ampicillin treatment reduced the symbiont bacterial population and major allergen levels in German cockroaches, leading to reduced airway inflammation in mice. These results can facilitate the preparation of protein extracts for immunotherapy or diagnostics applications.
To assess exposure of allergy patients to a biological environment, measurements were made of levels of airborne bacteria and fungi, house dust endotoxin and mite allergens in homes of 7 allergy patients and 12 healthy families. Concentrations of airborne total bacteria and the ratio of indoor and outdoor concentrations(I/O) in allergy patient's homes were high compared to non-allergy houses. But no significant differences could be shown for the concentration of spores of viable fungi and staphylococcus in indoor air between the homes of allergic patients and healthy families. The results of investigation on house dust mites, Dermatophagoids farinae were detected in all mattress samples and the levels in the allergy patient's homes were generally high, with individual measurements exceeding $2{\mu}g/g$ dust found in $30\%$ samples. In contrast with, Dermatophagoids pteronyssinus were detected in only $60\%$ samples and the concentrations were very low. The levels of endotoxin in dust samples collected from the allergy patient's home mattresses were higher than those of control houses. There was a positive correlation between the endotoxin levels and the house dust mite allergens.
A murine local lymph node assay(LLNA) has been developed as an alternative method to guinea pig maximization test for contact sensitization potential. This study was carried out to investigate the potential use of cytokine producing cells to discriminate between allergens and irritant in the LLNA.(omitted)
Allergic contact dermatitis (skin sensitization) may be caused by a wide variety of chemicals. A murine local lymph node assay (LLNA) has been developed as an alternative to guinea pig models for assessing the contact sensitization potential of chemical. This study was carried out to evaluate the skin sensitization potential for chemicals in Balb/c mice by LLNA. Contact allergen, dinitrochlorobenzene (DNCB), respiratory allergen, toluene diisocyanate (TDI) and a weak allergen, $\alpha$-hexlycinnamaldehyde (HCA) were wed as positive chemicals and irritant, sodium lauryl sulfate(SLS) also wed as a reference chemical in this study. The weights of lymph node in the mice treated with DNCB, TDI, and HCA were increased compared to vehicle control. There was a significant increase in lymph node weight of mice treated with high concentration of SLS compared to vehicle control. The stimulation index (SI) of Lymph node cell in the mice treated with DNCB, TDI, and HCA revealed over three-fold increase compared to vehicle control by $3^H$-thymidine uptake. All allergens correctly identified in this LLNA study wing Balb/c mice. These results suggest that LLNA wing Balb/c mice could be a useful method for screening the allergenic potential of chemicals. The expression of IL-2 mRNA was slightly increased in draining auricular lymph node cell of the mice treated with TDI and HCA by RT-PCR. However the IL-2 levels in DNCB and SLS of treated animals were not significantly changed.
Objectives: Animal husbandry workers could be exposed to various work hazards including toxic gases, chemicals such as pesticides or organic dust. Immunological evaluation focusing on respiratory allergic hypersensitivity occurrence was under-taken for swine farm workers as a part of the study on immunologic status of dairy barn, swine confinement, and poultry farm workers. Materials and Methods: Peripheral bloods were collected from 25 workers at the year of 2001 and 12 workers at the year of 2012 from swine farms located at Gyeonggi province, Korea. Seven adults not involved with animal husbandry were recruited at the year of 2001 from the same residential area as the swine farm workers'. Level of plasma IgE and 20 respiratory allergen-specific IgE were evaluated using commercially available ELISA kit. Results: Plasma IgE level was approximately five-fold higher in the swine farm workers regardless of the sampling year than the control subjects. Plant allergens from outdoor environments such as golden rod, pigweed, Russian thistle, or ragweed were the major allergens with positive reaction(allergen specific IgE${\geq}$0.7 IU/mL) for the swine farm workers at 2001 year. Meanwhile, house dust mite(Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus) and cockroach, typical indoor allergens in Korea, were the major respiratory allergens for the swine farm workers at 2012 year. Conclusions: Overall, even though our results are primitive, the results suggest that immunological function of swine farm workers could be modulated toward type-2 reactivity.
Enhancement of antigen-specific IgE is a hallmark of allergic hyperresponsiveness, therefore it is necessary to adopt or develop a highly sensitive and specific assay for determination of allergen-specific IgE levels in vivo. In this presentation, we introduce an ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) system developed to measure the levels of chicken egg ovalbumin (OVA)-specific IgE in serum. The ELISA method uses a commercially available purified rat anti-mouse IgE as a capture Ab and biotinylated OVA as a detection reagent. Avidin-peroxidase with its substrate is used for color development resulting in optical density measurement at 405 nm. The ELISA system produces a highly sensitive dose-response relation-ship between optical density levels and the dilution titer of the OVA-IgE standard serum but no cross-reaction with unrelated IgE or IgG. It is believed that the system is an Efficient tool to delineate an adjuvant effect of environmental pollutants on development of asthmatic and atopic responses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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