A survey for entomopathogenic nematodes was conducted throughout the nine provinvrd and within three city limits during the summer of 1990 and 1991. Six of the nine provinces and one of the three cities were positive for entomopathogenic nematodes. Out of the total 499 soil samples, 23(4.6%) were positive for entomopathogenic nematodes with 19(3.8%) containing Steinernema and 4(0.8%) containing Heterorhabditis. Heterorhabditis bacteriopora and three distinct groups of Steinernema species were idintified. One groups was indentified as S. carpocapsae, another S. glaseri and the other S. monticola based on cross breeding studies. Positive sample sites in each habitat includes 15 of the 415(3.6%) from forests including regrowth areas with shrubs, 1 of the 27(3.7%) from turfgrass including golf courses and parks, 3 of the 24(12.5%) from agricultural fields, 2 of the 16(12.5%) along riparian areas, and of the 17(11.8%) near the seashore. We advocate that more surveys be conducted for entomopathogenic nematodes before commercial sources of nematodes are widely applied which may obscure the naturally-occurring nematodes. A key to Steinernema is provided for the identification.
본 연구는 해충에 대한 생물적 방제제로서 유용한 곤충병원성 선충의 효율적 검색과 in vitro에서의 대량 증식 가능성을 조사하였으며 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 토양으로부터 곤충병원성 선충의 검색을 위한 trap용 곤충으로는 꿀벌부채명나방보다 누에가 감수성이 높았다. 2. Sterinernema, Rhabditidae, Diplogastroidae과 계통의 선충은 꿀벌부채명나방 유충에서의 증식은 5만 마리 이하였으나, 누에 유충에서는 15만에서 35만 마리의 선충 증식이 일어났으며, 누에 번데기에서는 25만 마리 이상의 선충이 증식되었다. 누에 증식에 있어 누에 번데기를 사용했을 때가 가장 우수하였다. 3. Sterinernema, Rhabditidae, Diplogastroidae과 계통의 선충에 대한 증식률은 열풍건조 번데기의 흡수처리 후 배양 및 기타 천연물 인공배지에서 증식은 가능하였으나 살아있는 누에 유충보다는 증식률이 낮았다. 4. 이상의 결과로 토양으로부터 곤충병원성 선충을 분리하는데 누에를 이용한 trap이 매우 우수하였으며, 선충의 증식에 있어 누에 유충 및 번데기가 효과적인 것으로 판단된다.
In round numbers the 100 strains of entomopathogenic nematodes were isolated through the investigation of cultivated including the ginseng forming cultivated and forest soil samples by silkworm trap. The 28 strains of nematodes were selected among the isolated entomopathogenic nematodes that were confirmed the pathogenicity against Holotrichia morosa, Hoiotrichia diomphalia and Ectinus sericeus, the pest of korean ginseng and silkworm. Pathogenicity of the 2025, 2027, 2028, 2034, 2039 and 2057 strains was excellent. Selected entomopathogenic nematodes are classified of two species by morphologiacl and molecular studies, which were Sterinernma carpocapsae sp. and Diplogaster lethier sp.. Diagnostic characters include body length, lateral field pattern, tail shape and so on. The DNA sequences of the ITS region of rDNA shows similar to S. carpocapsae and .D. lethier. Isolated entomopathogenic nematodes were demonstrates that are quite within the realms of possibility for biological control agents of the pests of Korean Ginseng.
Park, Sun-Ho;Yu, Yeon-Su;Park, Jae-Sung;Choo, Ho-Yul;Bae, Soon-Do;Nam, Min-Hee
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제6권2호
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pp.139-143
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2001
The efficacies of several entomopathogenic nematodes of Steinernema and Heterorhabditis spp. were examined against tobacco cutworm, Spodoptera litura Fabricius. H. bacteriophora HY showed 100% mortality after 20 h against 2nd instar of tobacco cutworm. In the case of 3-4th instar, S. carpocapsae PC, H. bacteriophora HY and S. monticola CR showed 100% mortality after 47 h. In the case of 5-6th instar, S. carpocapsae PC proved more effective than the others. Generally, the number of nematodes harvested as their size decreased. Also, the highest number of nematodes was obtained in the 5-6th instar of S. litura by H. bacteriophora HY, showing about $1.3{\times}10^6$ nematodes per larva. In vitro cultured S. carpocapsae PC showed 100% mortality after 73 h against 5-6th instar tobacco cutworm, indicating that nematodes produced in vitro can be potentially used for the biological control of S. litura instead of nematodes in vivo.
The toxic effects of four pesticides on the entomopathogenic nematodes. Heterorhabditis bacteriophora NC strain, Steinernema glaseri NC and Dongrae strain were tested by checking the mortality of infective juveniles(Ijs) in aqueous solution of pesticide. Mortality of Ijs was influenced by pesticide and concentration and soaking time. The herbicide alachlor and insecticide fenitrothion were toxic to Ijc of three entomopathogenic nematodes. But, the fungicides mepronil and tolclofos-methyl were nontoxic to Ijs. Tolclofos-methyl showed significantly very week toxicity at 28 days after soaking for S. glaseri NC strain. H. bacteriophora NC strain was more highly sensitive to high temperature condition then were the other nematodes.
곤충병원성 선충의 효율적 검색법 확립과 생물적 방제제로서 유용한 선충 종의 탐색을 위하여 수행된 연구로서 남한 각지의 다양한 생태환경에서 토양을 채집하고, 병원성 검정과 병행하여, 감염력과 증식력 및 보존력이 강한 계통을 선발하였으며, 각종 해충에 대한 살충력을 검정하여 생물적 방제제로서의 유용성을 시험하였다. 우리나라에서 검출된 곤충병원성 선충은 주로 Rhbditida에 속하는 Steinermatidae 및 1 Heterorhabditidae였으며, 본 연구에서도 Rhabditida의 선충이 다수를 차지하는 경향은 같았다. 그러나, Rhabditidae에서는 현재까지 알려진 Steinernematidae와 Heterorhabditidae외에도 19계통의 Rhabditidae와 2 계통의 Diplogasteridae가 새로 검출되었고, Tylenchida에 속하는 선충도 5계통이 발견되었으며, 금후 속 및 종 단위의 상세한 동정이 필요할 것이다. 병원성이 우수한 선충계통은 생존 유충과 번데기에서 개체당 20만∼30만 마리가 증식하였으므로, 증식용 숙주 1마리 분의 병원체로 구제가능한 해충의 이론치는 십만을 초월할 것으로 추산되었다. 선발 계통의 선충은 대부분 통성활물기생이며, 능동적인 숙주의 추적 및 감염치사한 사체에서 증식함은 "적극적 사물기생" 또는 "살생부생성"으로 간주할 수도 있었다. 본 연구는 생물살충제 연구를 위한 생태환경기술 개발에 필요한 자료를 제공할 뿐 아니라, 기초생명과학 연구용 선충 계통의 선발과 증식 및 보존 관리를 비롯하여 널리 활용될 수 있을 것이다.
곤충병원성 선충의 종류 및 배양방법에 따른 지방산 함량비를 조사하였다. In vivo로 배양된 곤충병원성 선충 7계통의 지방산 조성은 비슷하였으나, 지방산 함량비에서 차이가 있었다. 곤충병원성 선충 S. carpocapsae 종을 in vivo 및 in vitro로 배양하여 분석한 결과 배양방법에 따라 지방산의 함량비가 달라질 뿐만 아니라 선충의 토양내 침투력이 달라지는 것을 확인하였다. Olive oil을 첨가하여 선충을 배양했을 경우 주요 지방산 함량비를 in vivo로 배양된 결과와 유사하게 조절할 수 있었으며 선충의 병원성도 soy oil을 첨가하여 배양한 선충에 비해 크게 향상되는 것을 확인할 수 있었다.
In order to use the symbiotic bacteria from ethomophatogenic nematodes as a biological control agent for agriculture, the cultural condition for maintaining phase I and antifungal activity was investigated. Symbiotic bacteria (SB) 1 stain from nematodes were selected from the three strains isolated from entomopathogenic nematodes. The growth of the SB 1 strain in NB, TSB, TY and YS medium was higher than that of the SB 2 and SB 3 strain. The packed cell volume of the SB 1 strain was reduced in NB medium which showed radical pH change. Phase I of the SB 1 strain was maintained in TSB medium after being stored for 2 weeks at $4^{\circ}C$. Culture broth with the SB 1 strain in TSB medium for 6 days and 7 days showed antifungal activities against Rhizoctonia solani KACC 40142, Botrytis cinerea Pers. KACC 40854, and Botrytis cinerea Pers. KACC 41008. Culture broth with the SB 1 strain in TSB medium containing 100 mM L-proline for 5 days showed antifungal activities against Rhizoctonia solani KACC 40142, and Botrytis cinerea Pers. KACC 40854.
Entomopathogenic nematodes, Steinernema carpocapsae, was able to invade and kill the several lepidopteran pests including the beet armyworm, Spodeptera exigua Hubner, which was the most effective target host. The beet armyworms treated with the effective nematode concentrations were died within 48 hrs. The lethal effect of the nematode was varied among the developmental stages of the host. The fifth instar larvae of the beet armyworm was more vulnerable to the nematode than the third instar larvae. Pupae was, however, refractory to the nematode. All three bioessays (topical application, filter paper test, and soil treatment) showed the positive correlation between the number of the treated nematodes and the mortality of the host. Topical application was the most effective and fast-acting method so that it gave the lethal effect 2 days earlier than did filter paper test at the same number of the treated nematodes. Soil treatment required higher number of the nematodes to get the effective lethality than did filter paper test. The fifth instar larvae of the beet armyworm expressed the specific hemolymph proteins of 5 to 10 kDa in response to nematode infection.
이화명나방 유충을 방제할 목적으로 이화명충이 가해한 벼 줄기에 곤충병원성선충인 Steinernema carpocapsae와 Heterorhabditis bacteriophora를 살포한 결과 효과가 좋았다. 8cm 길이의 벼 줄기 2본에 S. carpocapsae 250, 500, 1,000, 2,000마리/ml를 살포한 결과 68.6$\pm$10.0~94.9$\pm$2.6%의 치사율을 얻었으며 H. bacteriophora 100, 200, 400, 800마리 ml살포구에서는 91.4$\pm$0.7~100%의 방제를 얻었다. 그러나 3본의 벼줄기를 H.bacteriophora 현탁액에 침적한 경우는 100마리/ml 구에서는 42.6$\pm$4.7%, 200마리/ml구에서는 63.1$\pm$4.7%로 선충의 현탁액을 살포하는 것보다는 치사율이 낮아 효과가 적었다. 벼 줄기는 선충의 생존과 기주 탐색에 좋은 환경을 유지해 주어 곤충병원 성선충은 이화명충의 방제에 유용한 생물적 인자로 확인 되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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