집단식중독 환자에서 분리한 Staphylococcus aureus에 대한 항생제 감수성, enterotoxin 형별을 PCR로 조사한 결과는 다음과 같았다. 1. 의심환자분변 413건중 105건(25.4%)에서 Staphylococcus aureus coagulase 양성 균주가 분리되었다. 2. enterotoxin 생산성을 PCR로 조사한 결과 총 45주(42.9%)에서 enterotoxin gene이 확인되었으며, 이 중 H형 단독생산주가 29주(64.4%)로 가장 많았으며. A형 단독생산주 5주(11.1%), A형 및 H형 혼합생산주 4주(8.9%), G형 생산주 2주(4.4%)및 I형 생산주 1주(2.2%)이었다. 3. 시험한 105주 중 48주(45.7%)에서 항생제 내성이 확인되었으며, 이 중 penicillin에 대한 내성이 38.1%로 가장 높았으며, ampicillin과 penicillin은 중등도 내성이 각각 42.9%, 61.0%이었다. chloramphenicol, clindamycin, methicillin. trimethoprim, vancomycin은 모두 감수성이었다. 또한 단제 내성이 85.4%를 차지하였으며, 2제 내성이 12.5%, 3제내성이 2.1%이었다.
To determine the prevalence of Escherichia (E.) coli O157 : H7 from pigs after the Hazard Analysis and Critical Control Point (HACCP) system has been applied to Korean swine farm since 2006, 291 fecal samples were tested between May and December in 2008. Four E. coli O157:non-H7 (1.4%) were isolated from 4 different non-HACCP-accredited farms and they didn't have virulent genes which can cause illness for human. Also, Clostridium (C.) perfringens, Salmonella spp. and E. coli enterotoxins were tested using multiplex PCR. The positive rate for these pathogens of non-HACCP-accredited farms was higher than that of HACCP-accredited farms, and especially in case of C. perfringens, E. coli enterotoxins LT and STa, it was statistically significant (p < 0.05). Thus, the early implementation of the HACCP program is expected to greatly contribute to the safety of livestock products as well as food hygiene.
Role of enterotoxin from Salmonella in pathogenesis is not know. Enterotoxin gene from Salmonella typhimurium(stn) encodes a 29kDa toxin that has no homology to any other known enterotoxins. Expression of stn is enthanced upon contact with epithelial cell but not all strains having the stn gene express Stn, Based on PCR analysis, we found that all 36 clinical strains of Salmonella isolated in Korea tested carried the stn gene. To understand the trgulation of the stn transcription, the expression of stn was studies in vitro. RNA polymerase was purified by polymin P fraction-ation, DNA-agarose affinity chromatography, and Mono-Q ion exchange chromatography from Salmonella. The expression of stn was inhibited by cAMP·CRP complex by about 50%.
Staphylococcus aureus strains are important foodborne pathogens that produce various toxins. To evaluate the risk of the enterotoxins, four S. aureus strains from kimbap and two clinical samples were isolated and identified, and their expression of the enterotoxin genes were analyzed using a reverse transcription real-time PCR. Various enterotoxin genes were detected, including sea, seg, seh, sei, sen, seo, and sem, where each isolate contained one or two. When the mRNA detection of the enterotoxin genes was analyzed using a reverse transcriptase PCR, various levels of expression were found depending on the species and enterotoxin gene. Therefore, it is reasonable to suggest that the poisoning risk of S. aureus can be effectively evaluated based on the gene expression at the mRNA level.
Staphylococcus aureus, the most salt-tolerant food-borne pathogen, produces enterotoxins which may cause symptoms such as vomiting, diarrhea, nausea, and cramps. Since this bacterium has been able to grow at extremely high osmolarity its identity in foods with low water activity values such as salted or dried foods is of great concern. In this study, the growth of S. aureus at high osmolarity has been studied and the doubling time of S. aureus grown at TSB medium containing 15% NaCl has been found to be increased to 4∼5 hours. The stimulation of proline uptake after exposure of cells to high concentration of both extracellular KCl and sucrose was not increased. Stimulation of proline uptake at these environment only occured when 25mM NaCl was present I transport buffer. In additional experiments, the time required to reach mid-logarithmic phase in defined medium of high osmolarity found to be reduce by the presence of glycine betaine, proline, and choline.
A multiplex-polymerase chain reaction (PCR) assay was used to detect staphylococcal enterotoxin production by 12 strains of Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens. To evaluate the efficacy and/or sensitivity of this method, the results were compared to those obtained with the reversed passive latex agglutination kit (SET-RPLA, Denka Seiken, Japan). Of 10 strains positive by PCR were positive by RPLA but two strains, representing high sensitivity of the former method. Enterotoxin B was the most prevalent by the two methods. The kappa index between the two methods was 0.826, indicating a higher agreement and fully reliable for use. These results would suggest that sensitive, inexpensive, and relatively rapid multiplex-PCR technique may be an effective means for the detection of staphylococcal enterotoxin genes as an alternative to traditional methods such as kits or immunological methods, which depend upon the amount of enterotoxin produced.
목적: 소아의 급성 위장관염의 세균성 원인 중 살모넬라균, 이질균, 대장균 등은 임상양상과 합병증에 대해 많이 알려져 있는 반면, 황색포도알균의 임상양상에 대한 연구는 드물다. 본 연구는 소아의 분변에서 발견된 황색포도알균의 빈도와 임상적 연관성을 밝히고자 하였다. 방법: 2012년 1월부터 2015년 12월까지 일개 이차병원에서 급성 위장관염 증상으로 입원한 18세 이하 소아 환자의 분변 검체를 서울시보건환경연구원에 보내어 원인 세균 및 바이러스를 검사하였다. 임상양상에 대해 후향적으로 의무기록지를 검토하였다. 결과: 총 663명에서 세균 검출률은 26.2% (174명), 바이러스 검출률은 29.7% (197명), 아무것도 검출되지 않은 미검출군은 43.1% (286명)으로 나타났다. 황색포도알균 양성이면서 장독소가 확인된 사례는 총 102례(15.4%)였고, 그 중 단일 원인체로 황색포도알균이 확인된 경우는 53례(8.0%)로 단일원인체로는 세 번째로 높은 비율을 차지했다. 황색포도알균 단독 검출군의 연령에 따른 검출률은 0-2세에서 45.3% 로 가장 높았고, 주로 여름철에 발생하였다. 증상은 설사(71.7%), 구토(67.9%), 발열(49.1%), 복통(37.7%) 순으로 발생하였고, 미검출군 286명의 증상과 비교하여 유의한 차이를 보인 것은 구토 증상이 유일하였다(P=0.001). 장독소 중 표준형 장독소 (SEA, SEB, SEC, SED, and SEE)와 SEH에 의한 경우 구토 발생률이 더 높았다(P=0.027). 결론: 황색포도알균은 급성 위장관염 소아에게서 흔히 분리되는 균주였다. 본 연구를 통해 소아의 분변에서 발견된 황색포도알균 위장관염의 특징적인 임상 증상 및 호발연령과 계절적 분포, 장독소와의 연관성을 확인할 수 있었다.
We have earlier reported on the cloning and identification of bft-k from an enterotoxigenic strain of Bacteroides fragilis 419, which was isolated from the blood of a Korean patient who suffered from systemic infections [4,5]. The bft-k gene encodes a 397-amino-acids metalloprotease enterotoxin, and the protein has been identified as a new isoform of B. fragilis enterotoxins (BFTs), which are cytopathic to intestinal epithelial cells to induce fluid secretion and tissue damage in ligated intestinal loops [4, 6, 18, 20]. This report describes the cloning and sequencing of the enterotoxin pahogenicity islet of B. fragilis 419 which contains the bft-k gene. the cloned enterotoxin pathogenicity islet was found to have 6,045 bp in length and to contain 120bp direct repeats near its end. In the pathogenicity islet, in addition to the BFR-K, two putative open reading frames (ORFs) were identified; (1) the t-3 gene encoding a 396-amino-acids protein of a putative metalloprotease; (2) the third gene encoding an ORF of a 59-amino-acids protein, whose function has not yet beenn characterized. The expression of the t-3 gene in B. fragilis 419 was verified by western blot analysis.
Using the previous established multiplex PCR (mPCR), the presence of six kinds of staphylococcal superantigen (SAg) genes was investigated for nineteen Staphylococcus aureus isolates from the commercialized meat sources. As a result, only one isolate from pork among 19 S aureus isolates (5.3%) was confirmed as a potential SAg producer and harbored sec gene. The results in this study suggest that meat may not be major contagion of staphylococcal food poisoning (SFP) in Korea and that staphylococcal enterotoxin type C may be associated with the disease. Also, the mPCR method in this study can be a useful genotypic method which can overcome the typical disadvantages of conventional antibody-based methods due to antigenic homology, and furthur survey on food-borne S aureus isolates can provide the important epidemiological data for SFP in Korea.
Staphylococcal enterotoxin B (SEB) is bacterial toxin that induces the activation of immune cells. Because the inhibition of pro-inflammatory effect of SEB can resolve the inflammation, I determined the influence of functional or structural change of SEB on immune cells. The post translational modification of protein occurs through carbamylation. Carbamylation can change the structure of proteins and can modify the biological activity of protein. In the present study, I investigated the effect of carbamylated SEB (CSEB) on the inflammatory response mediated by LPS in HL-60 cells. To determine the anti-inflammatory effect of CSEB, I produced carbamylated SEB using potassium cyanate (KCN) and then examined whether CSEB involved in cytokine releases and apoptosis of LPS-stimulated HL-60 cells. Although CSEB had not any effect on the LPS-stimulated HL-60 cells, the protein levels of IL-8, TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ were significantly decreased by CSEB without cytotoxicity. CSEB also blocked Akt and NF-${\kappa}B$ activation. These results indicate that the suppressive effect of CSEB in LPS-stimulated cytokine releases is occurred by inhibition of Akt and NF-${\kappa}B$ activity. Through further studies, CSEB may be used as anti-inflammatory molecule that makes the immune system more efficient.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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