The purpose of this study was to compare the effects of various techniques on the quality and quantity of instrumentation in curved canals. Instrumentation time was evaluated too. Forty eight canals of resin blocks($35^{\circ}$) were divided into three groups and filed. In group A, 16 blocks were instrumented using a step-back technique with stainless steel(SS) K-file(Mani, Matsutani Seisakusho Co.,Japan). In group B, canals were prepared with SS K-files using the Endo-Angle (Nakanishi Dental MFG.CO.,LTD.,Japan). Group C was prepared using N i-Ti engine-driven instruments (Quantec Series $2000^{TM}$ system). Group A and B were filed from # 5 to # 25 at the apex followed by a 1 mm stepback technique, and the coronal half of the canals were flared with Gates Glidden burs(#2,3,4). Group C was instrumented from # 1 to # 8. After the instrumentation time was measured, canals were filled with India ink, and photographed, which to magnify the canal images 8 times. Using these photographs the apical portions were evaluated And scored from 1 to 4 according to the severity of ledging and zipping. On the same photographs, the area of the coronal two thirds of the canals were measured using a personal computer with the computer program Brain and Digitizer (SummaSketch III). The following results were obtained. 1. Instrumentation time was significantly shorter for group C, as opposed to group A and B(ANOVA, P<0.05). 2. The qualitative evaluation of the apical portions of the canals showed no significant difference between the groups(Kruscal-Wallis, p>0.05). 3. The area removed by group C was significantly smaller than group A and B(ANOVA, P<0.05).
The xynA gene encoding an alikali-tolerant endo-1,4-${\beta}$-xylanase (XYN) was cloned from the alkalophilic Bacillus pumilus A-30. The nucleotide sequence of a 974-bp DNA fragment containing the xynA was determined. An ORF of 684 nucleotides that encoded a protein of 228 amino aicds was detected. Asparagine-71 of XYN from B. Pumilus A-30 showed to be highly conservative in alkaline xylanases of family G/11, upon comparing the amino acid sequences of 17 family G/11 xylanases. Site-directed mutation of N71D of the xynA gene resulted in a decrease of 12.4% in the specific acitivity and a significant decline in the enzyme activity in the alkaline pH range.
Kim, Min-Su;Lim, Hyun-Joo;Lee, Ji Hwan;Park, Soo Bong;Won, Jeong-Il;Kim, Hyun Jong
Journal of Embryo Transfer
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v.33
no.4
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pp.195-203
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2018
Interferon-tau (IFNT) is known as a major conceptus protein that signals the process of maternal recognition of pregnancy in ruminants. Also, multiple interferon genes exist in cattle, However, molecular mechanisms of these bovine IFNT (bIFNT) genes whose expressions are limited have not been characterized. We and others have observed that expression levels of bovine subtype IFNT genes in the tissues of ruminants; thus, bIFNT1 and other new type I (bIFNTc1/c2/c3) gene co-exist during the early stages of conceptus development and non-trophoblast cells. Its genes transcription could be regulated through CDX2 and ETS2 and JUN and/or cAMP-response element binding protein (CREB)-binding protein (CREBBP) expression, a transcription factor implicated in the control of cell differentiation in the trophectoderm. Bovine ear-derived fibroblast cells, were co-transfected with luciferase reporter constructs carrying upstream (positions -1000 to +51) regions of bIFNT1 and other new type I gene and various transcription factor expression plasmids. Compared to each - 1kb-bIFNT1/c1/c2/c3-Luc increased when this constructs were co-transfected with CDX2, ETS2, JUN and/or CREBBP. Also, Its genes was had very effect on activity by CDX2, either alone or with the other transcription factors, markedly increased luciferase activity. However, the degree of transcriptional activation of the bIFNTc1 gene was not similar to that bIFNT1/c2/c3 gene by expression plasmid. Furthermore, Sequence analyses also revealed that the expression levels of bIFNT1/c2/c3 gene mRNAs expression were highest on day 17, 20 and 22 trophoblast and, Madin-Darby bovine kidney (MDBK), Bovine ear-derived fibroblast (EF), and endometrium (Endo) non-trophoblast cells. But, bIFNTc1 mRNA had not same expression level, bIFNTc1 lowest levels than those of IFNT1/c2/c3 gene in both trophoblast and non-trophoblast cells. These results demonstrate that bovine subtype bIFNT genes display differential, in the trophoblast and non-trophoblast cells.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.2
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pp.214-222
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2011
To examine the new practical utilization of mucilages in Opuntia humifusa, polysaccharides were isolated from O. humifusa and their anti-metastatic activity and structural analysis were carried out. In experimental lung metastasis of B16BL6 melanoma cells, prophylactically intravenous (i.v.) administration of the crude polysaccharide (CNC-0) from O. humifusa significantly inhibited lung metastasis in a dose-dependant manner. The main polysaccharide, CNC-Ia was purified to homogeneity from CNC-0 by two successive column chromatographies using DEAE-Sepharose FF and Sephadex G-100 and its structure was characterized. Molecular mass of CNC-Ia was estimated to be 700 kDa and it mainly consisted of arabinose, galactose and xylose in addition to two minor sugars such as rhamnose and fucose. Methylation analysis indicated that CNC-Ia comprised at least 18 different glycosyl linkages such as terminal Araf, 5-linked Araf, 4-linked Galp and terminal Xylp in addition to three characteristic linkages such as full branched Araf, 3,4,6-branched Galp and full branched Galp. To analyze the fine structure of CNC-Ia, it was sequentially digested by exo-${\alpha}$-L-arabinofuranosidase and endo-${\beta}$-1,4-D-galactanase. These analyses suggested that CNC-Ia belongs to be a highly branched Type I arabinogalactan which has a ($1{\rightarrow}4$)-${\beta}$-galactan backbone with arabinosyl oligosaccharide side chains.
Baek, Seong Yeol;Lee, You Jung;Yun, Hye Ju;Park, Hye Young;Yeo, Soo-Hwan
Food Science and Preservation
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v.21
no.3
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pp.442-450
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2014
In this study, we isolated a cellulase-producing bacterium isolated from traditional Korean fermented soybean paste and investigated the effect of culture conditions on the production of cellulase. This bacterium, which was identified as Bacillus subtilis 4-1 through 16S rRNA gene sequence analysis, showed the highest cellulase activity when the cells were grown at $45^{\circ}C$ for 24 hours in the CMC medium supplemented with 1.0% of soluble starch and 0.1% yeast extract. The initial optimum pH of the medium was observed in the range of 5.0~9.0. The optimal pH and temperature for the production of cellulase from B. subtilis 4-1 were pH 9.0 and $60^{\circ}C$ respectively. In addition, the enzyme showed significant activity in the temperature range of $20{\sim}90^{\circ}C$, which indicates that B. subtilis 4-1 cellulase is an alkaline-resistance and thermo-stable enzyme. This enzyme showed higher activity with CMC as the substrate for endo-type cellulase than avicel or pNPG as the exo-type substrates for exo-type cellulase and ${\beta}$-glucosidase. These results suggest that the cellulase produced from B. subtilis 4-1 is a complex enzyme rather than a mono-enzyme.
Kim, Do-Man;Kim, Young-Min;Park, Mi-Ran;Ryu, Hwa-Ja;Park, Don-Hee;Robyt, John F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.9
no.5
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pp.529-533
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1999
In addition to catalyzing the synthesis of dextran from sucrose as a primary reaction, dextransucrase also catalyzes the transfer of glucose from sucrose to other carbohydrates that are present or are added to the reaction digest. We have synthesized new glucans having new structures and new characteristics, by transferring D-glucose of sucrose to $\alpha$-cellulose and by using the constitutive dextransucrase obtained from Leuconostoc mesenteroides B-742CBM. The final reaction products were composed of soluble- and insoluble-glucans. The yields of soluble- and insoluble-glucans were theoretically 21% $\pm$ 2.2 and 68% $\pm$ 5.1, respectively. The remainder of the reaction products was recovered as a mixture of olgiosaccharides that could not be precipitated by 67%(v/v) ethanol. Treating the modified glucans with endo-dextranase and/or cellulase, oligosaccharides were produced that were not formed from the hydrolysis of native cellulose or B-742CBM dextran. The modification of the cellulose was confirmed by methylation and acid hydrolysis of the soluble-and insoluble-glucan. Both (1->4) and(1->6) glycosidic linkages were found in both of the glucans.
A 1.3-kb of chitosanase gene (choA) encoding 45-kDa polypeptide was cloned, expressed, and characterized from a newly isolated Bacillus cereus H-1. The chitosanase protein (ChoA) of B. cereus H-l was purified to homogeneity by ammonium sulfate precipitation and CM-sephadex column chromatography. Optimum pH was around 7, and stable pH range in the incubation at 50 C was 4-11. Optimum temperature was around 50 C, and enzyme activity was relatively stable below 45 C. ChoA showed the activities toward carboxymethyl cellulose (CMC) in addition to soluble or glycol chitosan. Based on MALDI-TOF MS analysis of purified ChoA, the entire amino acid sequence of ChoA was interpreted by database searching of previously known Bacillus chitosanases. A 1.6 kb of PCR product of corresponding chitosanase gene was obtained and its DNA sequence was determined. The deduced amino acid of choA revealed that ChoA have a 98% homology with those of Bacillus sp. No.7-M strain and Bacillus sp. KCTC0377BP. The recombinant ChoA protein was expressed in E. coli DH5$\alpha$. Deduced amino acid comparison of choA with other chitosanases suggested that it belongs to family 8 microbial endo-chitosanase with chitosanase-cellulase activity.
Proceedings of the Korean Journal of Food and Nutrition Conference
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2000.05a
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pp.1-3
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2000
A kind of traditional herbal prescription, Sip-Jeon-Dae-Bo-Tang (TJ-48), has been reported to improve the general condition of cancer patients receiving chemotherapy and /or radiation therapy, and to accelerate hematopoietic recovery from bone marrow injury by mitomycin C. In the present studies, we found that hot-water extract from Atractylodes lancea DC. rhizomes contributed mainly to intestinal immune modulating activity of TJ-48 on Peyer's patch cells mediated-hematopoietic response. After the fractionation, ALR-5 II a-1-1, 5 II b-2-2 and 5 II c-3-1 were further purified from crude polysaccharide fraction. Chemical analyses of each fraction indicated that ALR-5 II a-1-1 mainly contained arabinogalactan fraction whereas ALR-5 II b-2-2 and 5 II c-3-1 mostly comprised pectic polysaccharide fractions as the active polysaccharide ingredients. In order to analyze the essential structure of the activity, ALR-5 II a-1-1 was treated by sequential enzymatic digestion using exo-${\alpha}$-L-arabinofuranosidase and exo-${\beta}$-D-(1\longrightarrow3)-galactanase. Based upon the results of chemical and MALDI-TOF-MS analyses and activity on the digested fractions, the galactosyl side chains consisting of 6-linked Galf and Galp over tetrasaccharide in ALR-5 II a-1-1 might be responsible for the potent intestinal immune modulating activity. To characterize moiety of ALR-5 II c-3-1 for the expression of activity, endo-${\alpha}$-D-(1\longrightarrow4)-polygal acturonase (GL-PGase) purified from dried leaves of Panax ginseng digested ALR-5 II c-3-1. The results of structural analyses and activity on the digested fractions showed that PG-2, which structurally resembles to rhamnogalacturonan II (RG II), and PG-3 (galacturono-oligosaccharides) contained potent intestinal immune modulating activity. Further purification of the other acidic fraction (ALR-5 II b-2-2) indicated that ALR-5 II b-2-2Bb showed that the most potent activity. ALR-5 II b-2-2Bb also contained the unusual component sugars characteristics in RG- II as well as PG-2 derived from ALR-5 II c-3-1, but it could not be digested with GL-PGase. The present studies of relationship between structures and intestinal immune modulating activity of the active polysaccharides purified from A. lancea DC. rhizomes suggested that neutral galactosyl chains consisting mainly of (1\longrightarrow6)-linked Galf and Galp, and RG- II -like moiety with unique component sugars, such as 2-Me-Xyl, 2-Me-Fuc, Api, AceA, Kdo and Dha should play an important role in the potent intestinal immune modulating action of A. lancea DC. rhizomes.
Objectives: To compared the effect of different levels of moisture of root canal on the sealing ability after filling with four different types of sealer. Materials and Methods: Single-rooted teeth (n = 90) instrumented to and apical size of 0.06 / 45 were randomly assigned to 12 experimental groups (n = 7 per group), positive/negative control groups (n = 3 per group). The teeth of the experimental groups (a. DRY; b. PAPER POINT DRY; c. WET) were obturated with sealer (Group 1-3: Sealapex; Group 4-6: AH plus; Group 7-9: Tubuli-seal; Group 10-12: EndoRez) and warm vertical compaction method. After 7 days in $37^{\circ}C$, 100% humidity, the coronal-to-apical microleakage was evaluated quantitatively using a glucose leakage model. The leaked glucose concentration was measured with spectrophotometer at 1, 3, 7, 14, 21, and 30 days. Data were recorded ad mmol/L and statistically analysed with the two-way ANOVA and Duncan test (p = 0.05). Results: Throughout the experimental period Tubuli-seal/WET (Group 9) showed the highest mean cumulative glucose penetration (178.75 mmol/L), whereas AH plus/DRY (Group 4) had the least (20.78 mmol/L). Conclusions: The results of this study demonstrated that the moisture condition of root canals at the time of obturation and the type of sealer that was used had a significant effect on leakage and sealing ability. Thus drying procedure according to sealer types is a critical step and should not be missed in endodontic treatment.
Kim, Sung-Young;Lee, Mi-Jeong;Moon, Jang-Won;Lee, Se-Joon;Yu, Mi-Kyung
Restorative Dentistry and Endodontics
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v.30
no.1
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pp.31-37
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2005
The aim of this study was to evaluate the effectiveness of sealer placement in simulated root canal extensions. Forty resin blocks were attained from the Endo-training Bloc. In each block. The simulated root canal was made with $\#20$, 80taper GT file. After each block was longitudinally split into two halves, a standardized groove was prepared on one canal wall of two halves to simulate the canal extensions with various irregularities. The two halves of each block were assembled and all simulated root canals were obturated by single cone method with AH26 sealer. Four different methods of sealer placement were used: group A, $\#20$ K-file; group B, ultrasonic file; group C, lentulo spiral; group D, EZ-Fill bi-directional spiral. All obturated blocks were stored in $100\%$ humidity at $37^{\circ}C$ for 1 week, Using a low speed saw, each block was sectioned horizontally. Images of the sections were taken using a stereomicroscope at $\times$ 30 magnification and a digital camera. The amount of the sealer in the groove was evaluated using a scoring system, a higher score indicated better sealing effectiveness. The data was statistically analysed by Fisher's Exact Test. The sealing score was the lowest, specially at the middle area of canal extensions in group A, and that was statistically significant difference from other groups. In conclusion, the ultrasonic file, lentulo spiral and EZ-Fill bi-directional spiral were effective methods of sealer placement in simulated canal extensions. The K file was the least effective method, specially at the middle area of canal extensions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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