• 수산해양교육연구
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• 제26권6호
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• pp.1193-1200
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• 2014

Edwardsiella tarda, Streptococcus iniae and S. parauberis are main bacterial pathogens in aquaculture farms of olive flounder, Paralichthys olivaceus. We have discussed the efficacy and safety of 3 type-combined vaccines (A: S. iniae 1mg + S. parauberis 1mg + E. tarda 1mg, B: S. iniae 1mg + S. parauberis 1mg + E. tarda 0.5mg, C: S. iniae 1.5mg + S. parauberis 1.5mg + E. tarda 1mg) through intraperitoneal injections in olive flounder. None of the vaccines gave rise to any signigicant side effects on histopathology and blood chemistry. The antibody titers and lysozyme activities of A type were higher than those of B, C and control. Four weeks after vaccination, RPS (relative percent survival rates) was 62.5~75% (A type), 50~66.7% (B type) and 55.6~62.5% (C type) respectively. As the results, the combined vaccines are possible to prevent edwardsiellosis and streptococcosis, and A type : S. iniae 1mg + S. parauberis 1mg + E. tarda 1mg, is the most effective out of them.

• 한국어병학회지
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• 제20권3호
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• pp.307-313
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• 2007

In this study, a QCM biosensor was made to detect Edwardsiella tarda (E. tarda) using a specific antibody. A 9 MHz AT-cut piezoelectric wafer layered with two gold electrodes of 5mm diameter had a reproducibility of 0.1 Hz in frequency response and was used as the transducer of the QCM biosensor. Self assembled layer (SAM) was conformed on a quartz crystal by treating with 3-mer-captopropionic acid (MPA) and activated with N-ethyl-N'-(3-dimethyl-aminopropyl) carbodiimide (EDC) and N-hydroxysuccinimide (NHS). The resulting NHS group was further converted to hydrazide by the reaction with hydrazine. Aldehyde group was introduced into the carbohydrate moiety of anti-E. tarda antibody by the reaction with periodic acid and was used to immobilise the antibody through the reaction with hydrazide group on the electrode surface. A baseline was established in the presence of phosphate-buffered saline (PBS) and a resonant frequency (F1) was measured. Sample was added to the sensor surface and second resonant frequency (F2) was measured after unbound substances were washed out with PBS several times. Finally, the frequency shift (ΔF) representing the mass change was calculated by subtracting F2 from F1. After adding the oxidized anti-E. tarda antibody to the electrode surface containing hydrazide group, frequency shift of 288.811.4 Hz (mean S.E) was observed, thus proving that considerable amount of antibody was immobilized. In the immunoassay test, the frequency shift of 1877.75 Hz, 580.67 Hz, 221.39 Hz, 7.671.83 Hz (mean S.E) were observed at doses of 1000, 500, 100, 50 g of bacterial cells, respectively. It was also demonstrated that the prepared sensor chip was stable enough to withstand repeated surface regeneration with 0.2 M Tris-glycine and 1 % DMSO, pH 2.3 more than ten times.

• 한국어병학회지
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• 제23권1호
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• pp.137-143
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• 2010

5가지 생약재로부터 얻어낸 열수추출물을 대상으로 시험관(in-vitro) 실험을 통하여 어류병원체에 대한 항세균, 항곰팡이, 항기생충 효과를 검토하였다. 황금의 효과가 가장 두드러졌으며, 황금의 열수추출물을 사료에 흡수시켜 넙치에 급여하고 4, 8, 12주 후에 다양한 생리학적 반응과 세균성질병(Edwardsiellosis, Streptococosis)에 대한 예방효과를 조사한 결과, 성장효과에 대한 변화 이외의 뚜렷한 생리학적변화는 나타나지 않았으며, 두 가지 세균성 질병에 대한 예방효과도 확인되지 않았다. 따라서 이 후 추가적인 조사 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.

• 한국어병학회지
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• 제5권2호
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• pp.61-75
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• 1992

틸라피아에 실험적으로 Edwardsiella tarda를 경구감염 시켰다. 틸라피아의 장을 자극시키지 않았을 때는 E. tarda가 감염되지 않았으나 과산화수소로 장을 자극시킨후 E. tarda를 투여하였더니 감염되었다. 150~200g되는 틸라피아 한마리에 $10^6CFU/m{\ell}$, $10^7CFU/m{\ell}$, $10^8CFU/m{\ell}$를 투여한 4일 후부터 죽은 실험어의 간장, 신장, 비장에 농창이 형성되었다. 또한 장관 장해부에서 세균이 증식되어 전신감염으로 급히 발병되어 죽은 예가 많았다. 자연감염어에서 볼 수 있는 증상이 나타났다.

• 한국어류학회지
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• 제19권2호
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• pp.83-87
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• 2007

어류 에드워드감염증에 대한 예방 재조합 ghost 백신을 개발하기 위한 연구의 일환으로 어류 병원성 세균인 Edwardsiella trada를 대상으로 플라스미드 형질전환을 실시하고 형질전환 안정성을 평가하였으며, 형질 도입된 재조합 ghost 세균의 E-lysis 유전자 발현을 분석하였다. E. tarda를 대상으로 한 ghost 유도는 대장균에 비해 상대적으로 장시간의 반응 시간이 요구되며 lysis의 개시가 지연된 점을 고려 시 발현된 E protein의 용해 능력 또는 E-gene의 전사발현 양이 E. tarda에서 다소 약화되는 것으로 나타났다. 그러나 대장균에 비해 ghost 유도 속도가 다소 낮음에도 불구하고 반응이 완성되었을 시점에서의 E. tarda의 ghost 효율은 대장균과 전혀 차이가 없이 99.99% 이상의 유도효율을 나타내었다.

• 한국어병학회지
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• 제22권3호
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• pp.327-334
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• 2009

본 연구는 넙치, Paralichthys olivaceus에서 Edwardsiella tarda와 Streptococcus iniae에 대한 혼합백신의 효능과 안전성에 대해 조사하고자 하였다. 혼합백신을 주사한 넙치에서 2, 4, 6, 8주 째에 채혈하여 E. tarda와 S. iniae에 대한 항체가 를 microtitre 법으로 조사하였다. 백신 주사 후 3주째에 E. tarda와 S. iniae를 각각 인위감염 시켰을 때 백신구에서 81.0-92.8%의 높은 상대생존율을 보여 혼합백신에 의한 항병력의 증가가 확인되었다. 백신 주사 후 초기에 백신구가 대조구에 비해 체중 증가가 느렸으나 사육기간이 길어지면서 회복되어 대조구와 백신구 체중의 차이를 보이지 않았다. 이 결과는 백신 주사가 넙치의 성장에 영향을 주지 않고 에드와드병과 연쇄구균증을 예방할 수 있음을 보여준다.

• 한국어병학회지
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• 제21권2호
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• pp.119-127
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• 2008

Oxytetracycline (OTC) has been widely used in eel culture as a therapeutic and prophylactic agent because of its broad-spectrum activity against gram-positive and -negative bacteria. The oral treatment dosage of OTC approved for the treatment of edwardsiellosis, furunculosis and vibriosis in eel is 50 mg/kg/day for 3-7 days in Korea. To determine new optimum dose of OTC in eel, the pharmacokinetics of OTC after single oral administration (100 mg/kg B.W., 200 mg/kg B.W.) in cultured eel, Anguilla japonica was examined. In oral dosage of 100 and 200 mg/kg body weight, the highest plasma concentrations of OTC were 1.19±0.42 ㎍/㎖ and 2.69±0.57 ㎍/㎖, respectively. Plasma concentrations of OTC were not detected after 720 h post-dose in all experiments. The kinetic profile of absorption, distribution and elimination of OTC in plasma wwas calculated fitting to a 1- and 2-compartment model by WinNonlin program. The following parameters were obtained for a single dosage of 100 and 200 mg/kg respectively: 1-compartment model, AUC= 82.48 and 432.68 ㎍*h/㎖, Tmax= 3.93 and 14.24 hr, Cmax= 0.94 and 2.34 ㎕/㎖; 2-compartment model, AUC= 448.73 and 530.65 ㎍*h/㎖, Tmax= 6.37 and 8.96 hr, Cmax= 0.90 and 3.21 ㎕/㎖.

• 한국어병학회지
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• 제31권2호
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• pp.93-99
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• 2018

Edwardsiella tarda predominantly causes edwardsiellosis in fish at high temperature, but is rarely isolated from water when water temperature is low. However, E. tarda is viable but nonculturable (VBNC) in low water temperature, but it can be revived when water temperature rises and cause disease to fish. Therefore, in order to prevent disease, it is very important to identify pathogens that are in the VBNC state in environmental water. In this study, E. tarda cells in the VBNC state were detected by the ethidium monoazide (EMA)-PCR method using the low-temperature oligotrophic sea water microcosm obtained by inoculation of E. tarda at a concentration of $10^8CFU/ml$. In order to distinguish between live and dead bacteria in E. tarda, each sample was treated with EMA at different concentrations, photoactivated with a 500 W halogen lamp, and PCR was performed with E. tarda specific primer. At the concentration of $10^7CFU/ml$ bacterium, DNA amplification was observed only in the live cells when treated with $60{\mu}g/ml$ of EMA, and smaller amounts of live cells could be distinguished from dead cells by adjusting the EMA concentration. In addition, the VBNC cells of E. tarda in the oligotrophic low temperature seawater microcosm were estimated to be in the range of $10^4{\sim}10^5CFU/ml$ by EMA-PCR. Therefore, it is possible to detect VBNC cells that will act as potential pathogens in environmental water using EMA-PCR method, and quantitative confirmation using concentration change is also possible.

• 수산해양교육연구
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• 제27권6호
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• pp.1656-1664
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• 2015

고삼 뿌리 열수 추출물을 농도별로 넙치 사료에 흡습시켜 12주 동안 어류에 급여 후 비특이적 면역 및 질병저항성에 대한 효과를 조사하였다. 고삼 추출물의 첨가는 어류 성장에는 아무런 영향을 미치지 않았다. 혈액화학적인 조사 결과에서도 고삼 첨가로 인한 넙치의 생리에는 아무런 영향을 나타내지 않았다. 라이소자임 활성은 0.05%의 고삼 추출물 농도로 흡습시킨 사료 그룹에서 라이소자임 활성이 증가됨을 알 수 있었다. 백혈구의 식세포 활성은 0.05%의 고삼 추출물로 흡습시킨 사료 그룹에서 유의적으로 증가되었다. 병리학적 결과를 통하여 고삼 추출물을 농도별로 넙치에 투여하였을때 병리조직학적 영향이 없음을 알 수 있었다. 에드와드균의 인위감염에 의한 질병저항성은 0.05%의 고삼 추출물로 흡습시킨 사료 그룹에서만 상대생존율이 높게 나타났다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 고삼뿌리 열수 추출물은 넙치에 대한 비특이적 면역력 증강 및 질병 저항성 증강에 효과가 있는 것으로 사료되었다.

• 생명과학회지
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• 제20권12호
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• pp.1743-1749
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• 2010

Edwardsiella tarda는 그람 음성의 장내세균과의 주요 어병세균으로 어류에 edwardsiellosis를 유발하는 전신감염성 병원체이다. 최근 병원성 세균의 외막 단백질들은 세균성 감염에 있어서 숙주와 반응하여 면역반응을 유도하는 것으로 여겨져 연구가 되고 있다. 일본의 연구팀은 어류에서 에드워드병의 원인체인 E. tarda의 37 kDa 단백질이 넙치에서 높은 항원성을 제시하는 것을 보고하였다. 또한 그 연구자들은 37 kDa 단백질의 N-말단 아미노산 서열이 GAPDH와 대응하는 것을 밝혔다. 본 연구에서는 다른 세균에서 알려진 N-말단 서열을 기반으로 primer를 제작하여 이에 상응하는 E. tarda DNA를 증폭하고 클로닝하였다. 이 DNA단편의 염기서열은 예상한 바와 같이 세균의 GAPDH유전자인 gapA와 높은 상동성이 있고, E. tarda GAPDH (etGAPDH)의 아미노산 서열은 다른 장내세균의 GAPDH와 70% 이상의 상동성을 보이는 것을 확인하였다. E. tarda의 외막단백질에 특이적으로 반응하는 항체를 이용하여 E. tarda의 GAPDH가 외막에 존재한다는 것을 증명하였고, gapA의 염기서열을 바탕으로하여 재조합 GAPDH를 과발현 시켰다. 과발현된 재조합단백질 GAPDH는 GAPDH 특이적인 항체를 제조하는데 사용되었고, 또한 넙치에 면역시켜 단일 단백질 백신으로서의 활용도를 모색하였다. 비록 재조합 GAPDH가 면역된 넙치에서 GAPDH에 특이적인 항체가 증가하였음에도 불구하고, E. tarda로 공격실험을 하였을 때 면역된 넙치의 생존율이 12.5%로 측정되어 면역된 그룹과 면역되지 않은 그룹간에 큰 차이가 없는 것이 확인되었다.