To study the acute effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA, $C_{22:6}$) on the expression of adipocyte determination and differentiation-dependent factor 1 (ADD1) mRNA in pig tissues, weaned, crossbred pigs (28 d of age) were fed with either 10% (on as-fed basis) tallow (high stearic acid), soybean oil (high linoleic acid), or high DHA algal oil for 2 d. The plasma and liver DHA reflected the composition of the diet. The adipose tissue and skeletal muscle DHA did not reflect the diet in the short term feeding. The results also showed that the diet containing 10% algal DHA oil significantly decreased the total plasma cholesterol (39%) and triacylglycerol (TG; 46%) in the pigs. Soybean oil significantly decreased plasma TG (13.7%; p<0.05), but did not have an effect on plasma cholesterol. The data indicate that different dietary fatty acid compositions have different effects on plasma lipids. The ADD1 mRNA was decreased (p<0.05) in the liver of DHA oil-treated pigs compared with the tallow-treated pigs. The diets did not have significant effect on the ADD1 mRNA in adipose tissue. Addition of algal DHA oil in the diet increased acyl CoA oxidase (ACO) mRNA concentration in the liver, suggesting that dietary DHA treatment increases peroxisomal fatty acid oxidation in the liver. However, dietary soybean oil supplementation did not affect mRNA concentrations of ADD1 or ACO in the tissues of pigs. Because ADD1 increases the expression of genes associated with lipogenesis, and ACO is able to promote fatty acid oxidation, feeding DHA oil may change the utilization of fatty acids through changing the expression of ADD1 and ACO. Therefore, feeding pigs with high DHA may lead to lower body fat deposition.
The effects of dietary n-3 fatty acids, ${\alpha}$-linolenic acid (18:3), eicosapentaenoic acid (EPA, 20:5), and docosahexaenoic acid (DHA, 22:6), on brain phospholipid content and fatty acid composition were compared in rats fed with a diet containing constant ratios of saturated fatty acid/monounsaturated fatty acid/polyunsaturated fatty acid (PUFA) and n-3/n-6. The dietary fat in each diet was added at the level of 10%. In each diet, n-3 PUFA comprised two-thirds of the PUFA and the remaining one-third was linoleic acid (18:2). Dietary fat containing linoleic acid as the sole source of PUFA was also given to the control group. The content of brain phospholipid in the three n-3 PUFA groups was significantly lower than that of the linoleic acid group. This reduction was greater in the EPA and DHA groups than in the ${\alpha}$-linolenic acid group. The decrease in phospholipid content in rats fed n-3 fatty acid-rich diets was largely due to the decrease in the phosphatidylethanolamine fraction. Each dietary n-3 PUFA was found to affect the fatty acid composition of brain phospholipids; the most pronounced alteration was observed in phosphatidylethanolamine fraction. Furthermore, the proportion of DHA in the phosphatidylethanolamine fraction tended to be higher in the DHA group than in other PUFA groups. In conclusion, dietary ${\alpha}$-linolenic acid, EPA and DHA can influence the phospholipid content, phospholipid subclass, and fatty acid composition in rat brain.
We studied the difference effects of dietary ${\alpha}-linolenic\;acid\;({\alpha}-LA,\;18:3\;n-3)$, eicosapentaenoic acid (EPA, 20:5 n-3) and docosahexaenoic acid (DHA, 22:6 n-3) on the lowering of triacylglycerol in the liver and serum on lipid metabolism in rats. Rats were fed semipurified diets containing 10% fat with constant polyunsaturated/monounsaturated/saturated fatty acids (1:1:1) and n-6/n-3 ratio (1:2). EPA (98%) and DHA (98%) were added in diets as the ethyl esters. The concentration of liver triacylglycerol was significantly lower in rats fed both EPA and DHA than in those fed ${\alpha}-LA$. The concentration of liver phospholipid was significantly higher in rats fed DHA than in those fed ${\alpha}-LA$ and EPA. Both EPA and DHA reduced serum triacylglycerol concentration compared with ${\alpha}-LA$, but this effect was more pronounced in the EPA diet. The activity of phophatidate phosphohydrolase in the liver microsome was significantly lower in rats fed both EPA and DHA than in those fed ${\alpha}-LA$. but, there was no significant difference on the activities of diacylglycerol acyltransferase among the three groups. The concentration of liver triacylglycerol were correlated with changes in the microsomal phosphatidate phosphohydrolase activity (r=0.84). Hepatic NADPH generating enzyme, glucose-6-phosphate dehydrogenase was more effective to reduce the activity in rats fed both EPA and DHA than in those fed ${\alpha}-LA$. In conclusion, EPA or DHA reduced the hepatic triacylglycerol concentration by inhibiting microsomal phosphatidate phosphohydrolase, thereby inhibiting synthesis of triacylglycerol in the liver.
Docosahexaenoic acid (DHA, 22:6n-3) and ecosapentaenoic acid (20:5n-3) have attracted increasing attention since the first epidemiological report on the importance of n-3 essential fatty acids. It is thought that DHA has important functions in brain and retinal tissues. Thraustochytrids, a group of marine protists, are capable of heterotrophic growth, and are potential omega-3 producers for industrial use, especially the members of the Schizochytrium and Thraustochytrium genera. The aims of this work were to isolate, identify and screen thraustochytrids from 17 different locations. Twenty-three isolates were screened for biomass, total fatty acid (TFA) and DHA content. Analysis of the fatty acid methyl esters revealed four distinct clusters biomass ranged from $8.68-9.36gL^{-1}$, and lipid and DHA contents ranged from $3.11-4.10gL^{-1}$ and $1.05-1.93gL^{-1}$ biomass, respectively. B-12 isolates were screened for biomass ($9.36gL^{-1}$), TFA ($4.10gL^{-1}$) and DHA (47.01%, w/w) content. C-6 isolates were also screened for biomass ($8.92gL^{-1}$), TFA ($3.30gL^{-1}$) and DHA (49.41%, w/w) content. The 18S rRNA gene sequencing results identified Schizochytrium mangrovei as B-12 and Crypthecodium cohnii as C-6.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Docosahexaenoic acid (DHA), an n-3 long chain polyunsaturated fatty acid (LCPUFA), is acquired by dietary intake or the in vivo conversion of ${\alpha}$-linolenic acid. Many enzymes participating in LCPUFA synthesis are regulated by peroxisome proliferator-activated receptor alpha ($PPAR{\alpha}$). Therefore, it was hypothesized that the tissue accretion of endogenously synthesized DHA could be modified by $PPAR{\alpha}$. MATERIALS/METHODS: The tissue DHA concentrations and mRNA levels of genes participating in DHA biosynthesis were compared among $PPAR{\alpha}$ homozygous (KO), heterozygous (HZ), and wild type (WT) mice (Exp I), and between WT mice treated with clofibrate ($PPAR{\alpha}$ agonist) or those not treated (Exp II). In ExpII, the expression levels of the proteins associated with DHA function in the brain cortex and retina were also measured. An n3-PUFA depleted/replenished regimen was applied to mitigate the confounding effects of maternal DHA. RESULTS: $PPAR{\alpha}$ ablation reduced the hepatic Acox, Fads1, and Fads2 mRNA levels, as well as the DHA concentration in the liver, but not in the brain cortex. In contrast, $PPAR{\alpha}$ activation increased hepatic Acox, Fads1, Fads2, and Elovl5 mRNA levels, but reduced the DHA concentrations in the liver, retina, and phospholipid of brain cortex, and decreased mRNA and protein levels of the brain-derived neurotrophic factor in brain cortex. CONCLUSIONS: LCPUFA enzyme expression was altered by $PPAR{\alpha}$. Either $PPAR{\alpha}$ deficiency or activation-decreased tissue DHA concentration is a stimulus for further studies to determine the functional significance.
The effects of deoxygenizer (Deoxy) and sodium-erythorbate (Na-ery) on the changes in fatty acid compositions were investigated to prevent the loss of n-3 polyunsaturated fatty acids in lipid of bolied and dried-anchovy during storage. After storage for 5 months, docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA) of total lipid (TL) in Deoxy group decreased only $3.0\%\;and\;0.5\%$, respectively, compared to those of before storage. However, those in Control group decreased 9.5\%\;and\;2.3\%,$ respectively. In the case of Naery group, the percentages of DHA and EPA decreased were lower than those of Control. Most of DHA and EPA in n was lost in the early stage of storage. Total DHA remained in phospholipid (PL), triglyceride (TG), and free fatty acid (FFA) fractions after storage for 5 months were $98\%,\;66\%\;and\;62\%$ in Deoxy, Na-ery and Control group, respectively, and total EPA remained was slightly high level compared with those of DHA. The loss of DHA was more in PL than in TG. Consequently, deoxygenizer was recognized as a good material to prevent the loss of DHA and EPA of the boiled and dried-anchovy during storage.
Chum salmon (Oncorhynchus keta) meat oil contained high amounts of eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) compared to oils extracted from other tissues of the fish. EPA and DHA occupied more than 25% of the total fatty acids in chum salmon meat oil. The main lipid classes in the meat oil were triacylglycerides and phospholipids. The major fatty acids of the molecular species composition of phosphatidylcholine isolated from the meat oil were DHA and EPA. DHA and EPA were the major molecular species in the phosphatidylcholine of chum salmon meat oil, representing 44% and 17%, respectively.
In order to determine the position and the content of fatty acids attached to glycerides and the migration degree of fatty acids in the migration reaction, hydrolysis of fish oil was carried out with lipolase-100T derived from Aspergillus oryzae. The content of fatty acids in the glyceride mixture was analyzed and compared with that of fish oil. The amounts of fatty acid in 2-position and the migration degree of the fatty acid in 2,3-DG (diglyceride) and 2-MG (monoglyceride) were calculated. The results showed that approximately 95% (w/w) of DHA (docosahexaenoic acid) and 65% of EPA (eicosapentaenoic acid) was attached to the 2-position of glycerides in the fish oil. Approximately 87% (w/w) of DHA and 75% of EPA remained in 2,3-DG and 88% of DHA and 65% of EPA in 2-MG were not involved in the migration reaction.
To study the effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA) enrichment on the expression of hepatic genes in pigs, weaned, crossbred pigs (30 d old) were fed diets supplemented with either 2% tallow or DHA oil for 18 d. Hepatic mRNA was extracted. Suppression subtractive hybridization was used to explore the hepatic genes that were specifically regulated by dietary DHA enrichment. After subtraction, we observed 288 cDNA fragments differentially expressed in livers from pigs fed either 2% DHA oil or 2% tallow for 18 d. After differential screening, 7 genes were found to be differentially expressed. Serum amyloid A protein 2 (SAA2) was further investigated because of its role in lipid metabolism. Northern analysis indicated that hepatic SAA2 was upregulated by dietary DHA enrichment (p<0.05). In a second experiment, feeding 10% DHA oil for 2d significantly increased the expression of SAA2 (compared to the 10% tallow group; p<0.05). The porcine SAA2 full length cDNA sequence was cloned and the sequence was compared to the human and mouse sequences. The homology of the SAA2 amino acid sequence between pig and human was 73% and between pig and mouse was 62%. There was a considerable difference in SAA2 sequences among these species. Of particular note was a deletion of 8 amino acids, in the pig compared to the human. This fragment is a specific characteristic for the SAA subtype that involved in acute inflammation reaction. Similar to human and mouse, porcine SAA2 was highly expressed in the liver of pigs. It was not detectable in the skeletal muscle, heart muscle, spleen, kidney, lung, and adipose tissue. These data suggest that SAA2 may be involved in mediation of the function of dietary DHA in the liver of the pig, however, the mechanism is not yet clear.
Supercritical fractional extraction of DHA and EPA from the mixture of fatty acids composing the fish oil was performed. The compositions, extracted quantities, and cumulative extracted quantities of fatty acids in the extract and the raffinate were investigated according to the fractional steps. The temperature and pressure for the miximum concentration of DHA and EPA in the extract or the raffinate were 60$^{\circ}C$ and 101 bar respectively among the extraction conditions considered in this study. In this case, the weight percent of EPA in the extract was 50% and that of DHA in the raffinate was 40%. These values were two times higher than those in fish oil. THe same temperature and pressure were used to extract DHA and EPA from the mixture of fatty acids whose the initial weight percent of DHA was 34%. The weight percent of DHA in the raffinate after the fourth fractionation was 7-%. And the remaining weight of DHA in the raffinate was 80% of DHA initially loaded in the extraction vessel.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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