Compared with conventional adsorption-based coloration, the photoreactions of dyes such as photo-copolymerization and photo-crosslinking under UV irradiation can be employed for the coloration of textiles, which can be carried out without salt addition at room temperature. C.I. Reactive Black 5, a homo-bifunctional reactive dye containing two sulfatoethylsulfone groups, is used as a photo-reactive dye for wool fibers. Upon UV irradiation, the photo-reactive dye was grafted onto wool fabrics without photoinitiators. Since the disulfide bonds in the cystine residues of wool can be easily photodecomposed to active thiyl radicals which initiate the polymerization, the dye can be polymerized to an oligomeric dye of a degree of polymerization of 12 or more. The grafted fabrics reached a grafting yield of 2.3% o.w.f. and a color yield (K/S) of 18.2 by the photografting of an aqueous dye concentration of 9% using a UV energy of 25J/$cm^2$. Furthermore, the photochemically dyed wool fabric showed higher colorfastness properties to light, laundering and rubbing comparable to conventional reactive dyeing.
Cobrotoxin, a venom of Vipera lebetina turanica, is a group of basic peptidescomposed of 233 amino acids with six disulfide bonds formed by twelve cysteins. NF-kB is activated by subsequent release of inhibitory IkB and translocation of p50. Since sulfhydryl group is present in kinase domain of p50 subunit of NF-kB, cobrotoxin could modify NF-kB activity by protein-protein interaction. We therefore examined effect of cobrotoxin on NF-kB activities in lipopolysaccharide (LPS) and sodium nitroprusside (SNP)-stimulated Raw 264.7 mouse macrophages. Cobrotoxin suppressed the LPS and SNP-induced release of IkB and p50 translocation resulted in inhibition of DNA binding activity of NF-kB. Inhibition of NF-kB resulted in reduction of the LPS and SNP-induced production of inflammatory mediators NO and PGE2 generation. The inhibitory effect of cobrotoxin on the NF-kB activity were blocked by addition of reducing agents dithiothreitol and glutathione. These results demonstrate that cobrotoxin inhibits activation of NF-kB, and suggest that pico to nanomolar range of cobrotoxin could inhibit the expression of genes in the NF-kB signal pathway.
Objective: The objectives of this study were to investigate the thermal gelation properties and molecular forces of actomyosin extracted from two classes of chicken breast meat qualities (normal and pale, soft and exudative [PSE]-like) during heating process to further improve the understanding of the variations of functional properties between normal and PSE-like chicken breast meat. Methods: Actomyosin was extracted from normal and PSE-like chicken breast meat and the gel strength, water-holding capacity (WHC), protein loss, particle size and distribution, dynamic rheology and protein thermal stability were determined, then turbidity, active sulfhydryl group contents, hydrophobicity and molecular forces during thermal-induced gelling formation were comparatively studied. Results: Sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis showed that protein profiles of actomyosin extracted from normal and PSE-like meat were not significantly different (p>0.05). Compared with normal actomyosin, PSE-like actomyosin had lower gel strength, WHC, particle size, less protein content involved in thermal gelation forming (p<0.05), and reduced onset temperature ($T_o$), thermal transition temperature ($T_d$), storage modulus (G') and loss modulus (G"). The turbidity, reactive sulfhydryl group of PSE-like actomyosin were higher when heated from $40^{\circ}C$ to $60^{\circ}C$. Further heating to $80^{\circ}C$ had lower transition from reactive sulfhydryl group into a disulfide bond and surface hydrophobicity. Molecular forces showed that hydrophobic interaction was the main force for heat-induced gel formation while both ionic and hydrogen bonds were different significantly between normal and PSE-like actomyosin (p<0.05). Conclusion: These changes in chemical groups and inter-molecular bonds affected protein-protein interaction and protein-water interaction and contributed to the inferior thermal gelation properties of PSE-like meat.
Transition metal dichalcogenides (TMDs) with two-dimensional layered structure, such as molybdenum disulfide (MoS2) and tungsten diselenide (WSe2), are considered attractive materials for future semiconductor devices due to its relatively superior electrical, optical, and mechanical properties. Their excellent scalability down to a monolayer based on the van der Waals layered structure without surface dangling bonds makes semiconductor devices based on TMD free from short channel effect. In comparison to the widely studied transistor based on MoS2, researchs focusing on WSe2 transistor are still limited. WSe2 is more resistant to oxidation in humid ambient condition and relatively air-stable than sulphides such as MoS2. These properties of WSe2 provide potential to fabricate high-performance filed-effect transistor if outstanding electronic characteristics can be achieved by suitable metal contacts and doping phenomenon. Here, we demonstrate the effect of two different metal contacts (titanium and platinum) in field-effect transistor based on WSe2, which regulate electronic characteristics of device by controlling the effective barreier height of the metal-semiconductor junction. Electronic properties of WSe2 transistor were systematically investigated through monitoring of threshold voltage shift, carrier concentration difference, on-current ratio, and field-effect mobility ratio with two different metal contacts. Additionally, performance of transistor based on WSe2 is further enhanced through reliable and controllable n-type doping method of WSe2 by triphenylphosphine (PPh3), which activates the doping phenomenon by thermal annealing process and adjust the doping level by controlling the doping concentration of PPh3. The doping level is controlled in the non-degenerate regime, where performance parameters of PPh3 doped WSe2 transistor can be optimized.
A lectin with in-vitro anticancer activity against established human cancer cell lines has been purified by affinity chromatography on asialofetuin-linked amino activated silica beads from the tubers of Arisaema tortuosum, popularly known as Himalayan Cobra lily, a monocot plant from the family Araceae. The bound Arisaema tortuosum lectin (ATL) was eluted with glycine-HCl buffer, pH 2.5. ATL was effectively inhibited by asialofetuin, a complex desialylated serum glycoprotein as well as by N-acetyl-D-lactosamine, a disaccharide. It gave a single band corresponding to a subunit molecular weight of 13.5 kDa in SDS-PAGE, pH 8.8 both under reducing and non reducing conditions. When subjected to gel-filtration on Biogel P-200, it was found to have a molecular weight of 54 kDa, suggesting a homotetramer structure, in which individual polypeptides are not bound to each other with disulfide bonds. ATL is a glycoprotein with 0.9% carbohydrate content, stable up to $55^{\circ}C$ and at pH 2 to 10. The lectin had no requirement for divalent metal ions i.e. $Ca^{2+}$ and $Mn^{2+}$ for its activity. However, as reported for other monocot lectins, ATL gave multiple bands in isoelectric focusing and Native PAGE, pH 8.3. The lectin was found to inhibit in vitro proliferation of human cancer cell lines HT29, SiHa and OVCAR-5.
Resistance to PAI-1 is a factor which confers clinical benefits in thrombolytic therapy. The only US FDA approved PAI-1 resistant drug is Tenecteplase$^{(R)}$. Deletion variants of t-PA have the advantage of fewer disulfide bonds in addition to higher plasma half lives. A new variant was developed by deletion of the first three domains in t-PA in addition to substitution of KHRR 128-131 amino acids with AAAA in truncated t-PA. The specific activity of this new variant, $570\;IU/{\mu}g$, was found to be similar to those found in full length t-PA (Alteplase$^{(R)}$), $580\;IU/{\mu}g$. A 65% and 85% residual activity after inhibition by rPAI-1 was observed for full length and truncated-mutant form, respectively. This new variant as the first PAI-1 resistant truncated t-PA may offer more advantages in clinical conditions in which high PAI-1 levels makes the thrombolytic system prone to re-occlusion.
We previously found that cobrotoxin inhibited $NF-{\kappa}B$ activity by reacting with signal molecules of $NF-{\kappa}B$ which is critical contributor in cancer cell growth by induction of apoptotic cell death. We here investigated whether cobrotoxin inhibits cell growth of human prostate cancer cells through induction of apoptotic cell death, which is related with the suppression of the $NF-{\kappa}B$ activity. Cobrotoxin $(0{\sim}8\;nM)$ inhibited prostate cancer cell growth through increased apoptosis in a dose dependent manner. Cobrotoxin inhibited DNA binding activity of $NF-{\kappa}B$, an anti-apoptotic transcriptional factor. Consistent with the induction of apoptosis and inhibition of $NF-{\kappa}B$, cobrotoxin increased the expression of pro-apoptotic proteins caspase 3. Cobrotoxin, a venom of Vipera lebetina turanica, is a group of basicpeptides composed of 233 amino acids with six disulfide bonds formed by twelve cysteins. NF-kB is activated by subsequent release of inhibitory IkB and translocation of p50. Since sulfhydryl group is present in kinase domain of p50 subunit of NF-kB, cobrotoxin could modify NF-kB activity by protein-protein interaction. And Cobrotoxin down regulated Akt signals. Salicylic acid as a reducing agent of Sulf-hydryl group and LY294002 as a Akt inhibitor abrogated cobrotoxin-induced cell growth and DNA binding activity of $NF-{\kappa}B$. These findings suggest that nano to pico molar range of cobrotoxin could inhibit prostate cancer cell growth, and the effect may be related with the induction of apoptotic cell death through Akt dependent inhibition of $NF-{\kappa}B$ signal.
상피세포 성장인자(Epidermal Growth Factor, EGF)는 세포 분열을 자극하고 의약적 용도가 다양하다. EGF는 3개의 이황화 결합을 갖고 불용성으로, 대장균에서 고효율 발현에 대한 연구가 잘 이루어지지 않았다. EGF 유전자를 작은 유비퀴틴 관련 유전자(small ubiquitin-related modifier gene, SUMO)와 결합하고 DE3 대장균에서 발현시켰다. IPTG (Isopropyl-${\beta}$-D-Thiogalactopyranoside)로 유도하여 대장균 세포 단백질의 38.9%로 융합단백질이 발현되었고, Ni-NTA 친화성 크로마토그래피로 분리하였다. 그 후 유비퀴틴 분해효소반응으로 융합단백질에서 EGF를 얻은 후 다시 Ni-NTA 크로마토그래피로 분리 하였다. 최종적으로 정제된 EGF의 순도는 HPLC로 분석하였으며, 98%이상의 순도를 얻을 수 있었다.
Kim, Won-Tae;Bae, Sung-Woo;Kim, A-Young;Park, Kwan-Ho;Lee, Sang-Beom;Choi, Young-Cheol;Han, Sang-Mi;Park, Young-Han;Koh, Young-Ho
BMB Reports
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제44권6호
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pp.387-392
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2011
To investigate the molecular scavenging capabilities of the larvae of Hermetia illucens, two serine proteases (SPs) were cloned and characterized. Multiple sequence alignments and phylogenetic tree analysis of the deduced amino acid sequences of Hi-SP1 and Hi-SP2 were suggested that Hi-SP1 may be a chymotrypsin- and Hi-SP2 may be a trypsin-like protease. Hi-SP1 and Hi-SP2 3-D homology models revealed that a catalytic triad, three disulfide bonds, and a substrate-binding pocket were highly conserved, as would be expected of a SP. E. coli expressed Hi-SP1 and Hi-SP2 showed chymotrypsin or trypsin activities, respectively. Hi-SP2 mRNAs were consistently expressed during larval development. In contrast, the expression of Hi-SP1 mRNA fluctuated between feeding and molting stages and disappeared at the pupal stages. These expression pattern differences suggest that Hi-SP1 may be a larval specific chymotrypsin-like protease involved with food digestion, while Hi-SP2 may be a trypsin-like protease with diverse functions at different stages.
본 연구에서는 연속확산식 무세포 단백질 발현 시스템을 이용한 이황화결합 함유 단백질의 생산 시, 발현된 단백질의 응집으로 인한 비활성화의 문제점이 분파샤페론을 통한 발현 단백질의 용해도 증가, 세포 파쇄액의 화학적 처리를 통한 환원활성 제거, 산화환원완충액을 이용한 적절한 산화환원전위의 제공 등을 통해 단백질의 폴딩에 유리한 반응조건을 구축함으로써 해결될 수 있음을 보였다. 이러한 연구 결과는 각종 게놈 시퀀싱 프로젝트의 빠른 진척에 따라 현재 요구되고 있는 고속, 고효율의 단백질 발현 수단으로써 무세포 단백질 발현 시스템이 적용될 수 있는 가능성을 높여 줄 수 있을 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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