Kim, Sung-Su;Park, Soo-Hyun;Lee, Jae-Ryung;Jung, Jun-Sub;Suh, Hong-Won
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제21권5호
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pp.495-507
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2017
The effect of clonidine administered intrathecally (i.t.) on the mortality and the blood glucose level induced by sepsis was examined in mice. To produce sepsis, the mixture of D-galactosamine (GaLN; 0.6 g/10 ml)/lipopolysaccharide (LPS; $27{\mu}g/27{\mu}l$) was treated intraperitoneally (i.p.). The i.t. pretreatment with clonidine ($5{\mu}g/5{\mu}l$) increased the blood glucose level and attenuated mortality induced by sepsis in a dose-dependent manner. The i.t. post-treatment with clonidine up to 3 h caused an elevation of the blood glucose level and protected sepsis-induced mortality, whereas clonidine post-treated at 6, 9, or 12 h did not affect. The pre-treatment with oral D-glucose for 30 min prior to i.t. post-treatment (6 h) with clonidine did not rescue sepsis-induced mortality. In addition, i.t. pretreatment with pertussis toxin (PTX) reduced clonidine-induced protection against mortality and clonidine-induced hyperglycemia, suggesting that protective effect against sepsis-induced mortality seems to be mediated via activating PTX-sensitive G-proteins in the spinal cord. Moreover, pretreatment with clonidine attenuated the plasma tumor necrosis factor ${\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) induced by sepsis. Clonidine administered i.t. or i.p. increased $p-AMPK{\alpha}1$ and $p-AMPK{\alpha}2$, but decreased p-Tyk2 and p-mTOR levels in both control and sepsis groups, suggesting that the up-regulations of $p-AMPK{\alpha}1$ and $p-AMPK{\alpha}2$, or down-regulations of p-mTOR and p-Tyk2 may play critical roles for the protective effect of clonidine against sepsis-induced mortality.
우렁쉥이 껍질은 다량의 색소를 함유하지만 껌질 자체는 어류가 소화시킬 수 없는 구조를 갖기 때문에 색소분해가 일어나지 않도록 고압 가열하거나 효소처리하여 소화할 수 있는 상태로 만들면 어류 사료에 직접 첨가할 수 있게 된다. 따라서 본 실험은 우렁쉥이 껍질 분말에 viscozyme, celluclast, visco-cell (1:1), ultrazyme 등의 복합효소를 일정량 첨가한 후 $50^{\circ}C$에서 일정시간 분해시키면서 일어나는 화학적 변화를 조사하였다. 불용성 고형분과의 분리능력을 의미하는 상청액율은 효소 첨가구의 농도가 $55.20\~71.88\%$로 효소 무처리구의 $52.68\%$에 비하여 높았고, 고형분 수율도 $800{\mu}l$ 첨가시 까지는 증가하다가 이후 감소하는 경향이었다. 이를 토대로 Duncan multiple test를 하여 각 인자간의 상관관계를 고려한 후 기준 첨가량을 $400{\mu}l$로 하였다. 각 효소의 최적 반응시간을 결정하기 위하여 껍질 분말에 각 효소 $400{\mu}l$를 첨가한 후 20, 40, 60, 120, 180, 240분간 반응시켰다. 효소의 종류에 관계없이 고형분 수율, 상청액율 및 고형분 농도 값이 반응 60분 후에는 거의 변화가 없는 것으로 나타났다. 상청액 중 당 조성을 분석한 결과 viscozyme 처리구는 glucose, N-acetyl-D-galactosamine이 주성분이었고, celluclast 처리구는 glucose, N-acetyl-D-glucosamine이, ultrazyme 처리구는 glucose가 주성분이었으며, visco-cello(1:1) 혼합효소구는 celluclast에 의한 영향이 큰 것으로 나타났다. 껍질은 약 $40\%$의 단백질 (건물량)을 함유하지만, 각 부위별 아미노산 조성은 내피 중의 함량이 가장 높아 21.00g/100g sample이었다. 이들 아미노산 함량중 Asp와 Glu가 가장 많았고, 내피 중 필수아미노산의 함량도 껍질보다 높았다. 껌질 중의 지방산 조성은 매우 다양하였으며, 포화 지방산 중에서는 14 : 0, 16 : 0, 18 : 0가 주성분이었으며, 불포화지방산 중에서는 n-3 계열의 총지질 (TL), 중성지질 (NL), 극성지질 (PL)이 각각 $19.72\%,\;20.44\%,\;20.10\%$였고, n-6 계열의 TL, NL, PL이 각각 $9.21\% \;9.10\%,\;12.18\%$였다. 총 포화지방산의 함량은 PL이 $40.31\%$, NL이 $36.44\%$, TL이 $35.41\%$로 PL의 함량이 높았다.
The aim of this study was to investigate the protective activity of gomisin A and gomisin N, bioactive lignan components isolated from Schizandae Fructus, on hepatocyte injury induced by carbon tetrachloride($CCl_4$, 10 mM), t-butyl hydroperoxide(TBH, 0.5 mM), and D-galactosamine(GalN, 30 mM). Primary cultures of rat hepatocyte(18 h culture) were treated with $CCl_4$, TBH or GalN and various concentrations(0.1, 1, 10, $100{\mu}M$) of gomisin A or gomisin N. $CCl_4$ significantly increased the levels of lactate dehydrogenase(LDH), alanine aminotransferase(ALT), and aspartate aminotransferase(AST). These increases were inhibited by gomisin N. TBH significantly increased the level of AST; an increase that was inhibited by gomisin N. GalN markedly increased the levels of LDH and ALT, and these increases was significantly inhibited by both gomisin A and gomisin N. These results suggest that gomisin A and gomisin N have the hepatoprotective activity.
The aim of this study was to investigate the protective activity of curcumin, demethoxycurcumin and bisdemethoxycurcumin, isolated from Curcuma longa Linne, on hepatocyte injury induced by carbon tetrachloride (CCl$_4$,10 mM), t-butyl hydroperoxide (TBH, 0.5 mM) and D-galactosamine (GaIN,30 mM). Primary cultures of rat hepatocyte (18 h culture) were treated with CCl$_4$, TBH or GaIN and various concentrations (0.1, 1, 10 and 100 ${\mu}$M) of curcumin, demethoxycurcumin and bisdemethoxycurcumin CCl$_4$ significantly increased the levels of lactate dehydrogenase (LDH), alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST). The increases in LDH, ALT and AST levels were inhibited by curcumin. Demethoxycurcumin and bisdemethoxycurcumin decreased the levels of AST. Curcumin inhibited the increases in ALT and AST levels induced by TBH. The increased levels of LDH, ALT and AST induced by TBH were inhibited by bisdemethoxycurcumin. GaIN markedly increased the levels of LDH, ALT and AST. These increases were significantly inhibited by bisdemethoxycurcumin. The increase in AST level was inhibited by curcumin. These results suggest that curcumin and bisdemethoxycurcumin have potent hepatoprotective activities.
Park, Hyun Jung;Lee, Sung Won;Park, Hwangseo;Park, Se-Ho;Hong, Seokmann
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제35권11호
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pp.3307-3312
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2014
The anti-inflammatory effect of a tubulin inhibitor, N-(5-benzyl-1,3-thiazol-2-yl)-3-(furan-2-yl)prop-2-enamide (1), on innate immune responses remains unclear. Thus, we investigated the effect of 1 on the immune responses mediated by lipopolysaccharide (LPS). The in vitro addition of 1 to dendritic cells and macrophages dose-dependently reduced tumor necrosis factor alpha production elicited by LPS stimulation. Additionally, the stimulation of natural killer (NK) and natural killer T (NKT) cells with 1 resulted in the decrease of interferon gamma ($IFN{\gamma}$) induced by LPS treatment. Moreover, 1 substantially reduced interleukin 12 in dendritic cells (DC) as well as $IFN{\gamma}$ in NKDCs induced by LPS in vitro. Furthermore, the in vivo administration of 1 ameliorated LPS/D-galactosamine-induced endotoxic lethality in mice. Taken together, our results demonstrate for the first time that 1 possesses anti-inflammatory properties, most notably by modulating LPS-induced innate immune responses. Therefore, 1 might have therapeutic potential for the treatment of inflammation-mediated diseases such as sepsis.
Hovenia dulcis which is distributed in Korea, China and Japan is known to show hepatoprotctive effect and reduce the acute alcohol toxicity. In this study, the hepatoprotective effect against the chemically induced experimental liver injury models and lowering effect of blood alcohol level in animal models acutely administered alcohol by the peduncle extracts of Hovenia dulcis var. koreana were investigated. HdfHW-1, and HdfM-1 which are the extracts of fruit peduncles and young branches with hot water or 70% methanol and followed with 100% methanol, were significantly reduced the $CCl_4$ or D-galactosamine/LPS induced damage in sliced liver. The hot water or methanol extracts of fruit peduncle protected dose-dependently against $CCl_4$ induced toxicity in primary hepatocyte culture and particularly, the amount of LDH release was reduced to the control level at 500 $\mu\textrm{g}$/ml of hot water extracts. HdfHW-1 also decreased the hepatotoxicity induced by $CCl_4$ in rats. The active components of HdfHW-1 seemed to be high molecular weights because 0.2 M NaCl HdfHW-1 fraction was the most effective among NaCl fractions of HdfHW-1 eluted with various concentrations of NaCl on DEAE 650C column chromatography. HdfM and HdfHW were significantly reduced the levels of blood alcohol in rats and mice administered 40% alcohol. These results indicated that the hot water or methanol extracts of fruit peduncle of Hovenia dulcis var. koreana have hepatoprotective effect and may be reduce alcohol toxicity.
The aim of this study was to investigate the protective activities of daidzin, daidzein, genistein or puerarin, active isoflavonoids of Puerariae Radix, on the hepatocyte injury induced by carbon tetrachloride (CCl$_4$, 10 mM), tert-butyl hydroperoxide (TBH, 0.5 mM) and D-galactosamine (GalN, 30 mM). Primary cultures of rat hepatocytes (18 hr cultured) were treated with CCl$_4$, TBH or GalN and various concentrations (0.1, 1, 10 and 100 ${\mu}$M) of daidzin, daidzein, genistein or puerarin. CCl$_4$ significantly increased the levels of lactate dehydrogenase (LDH), alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST). The increase in LDH level was attenuated by daidzein, genistein and puerarin. Puerarin also inhibited the increase in AST level induced by CCl$_4$. The increases in LDH and ALT levels induced by TBH were significantly attenuated by daidzin and genistein treatments. GalN markedly increased the levels of LDH, ALT and AST These increases were significantly attenuated by daidzein. Daidzin also inhibited the increases in LDH and AST levels induced by GalN. The increases in LDH and ALT levels were attenuated by genistein and puerarin, respectively. These results suggest that daidzin and daidzein possess hepatoprotective activities.
한국산 바지락으로부터 새로운 렉틴을 아세톤파우더, 황산암모늄 침전, 친화력 크로마토그라피 및 FPLC의 이온교환 크로마토그라피법으로 분리 정제하였다. 이 렉틴은 사람의 적혈구를 비특이적으로 응집시켰으며, 생쥐와 토끼의 적혈구 및 생쥐의 복수 Sarcoma 180 세포를 응집시키지 않았고 사람의 말초혈관 임파구도 분열 촉진시키지 못하였다. 전기영동상에서 하나의 주된 띠로 나타났으며 분자량은 Biogel P-300겔 여과에서 131,000, SDS 전기영동상에서는 125,000으로 나타났다. Subunit는 33,000과 30,000의 다른 폴리펩타이드로 tetramer로 추정된다. EDTA에 의해서 활성이 저해된 바지락 렉틴은 $Ca^{++}$과 $Mn^{++}$에 의하여 적혈구 응집력이 회복되었다. 또한 이 렉틴은 약 4.2% 중성당을 함유한 당단백질임이 확인되었다.
The aim of this study was to investigate the protective effects of glycynhizin, active glycosides of Glycyrrhizae Radix, and baicalin, bioactive flavonoid isolated from Scutellariae Radix, on hepatocyte injury induced by carbon tetrachloride(CCl$_4$, 10 mM), tert-butyl hydroperoxide (TBH, 0.5 mM), and D-galactosamine (GaIN, 30 mM). Primary cultures of rat hepatocyte (18 hr cultured) were treated with CCl$_4$, TBH, or GaIN and various concentrations (0.1, 1, 10, and 100 ${\mu}$M) of glycyrrhizin or baicalin. Activity was accessed by determining the release of lactate dehydrogenase (LDH) and aminotransferses. CCl$_4$ significantly increased the levels of LDH, alanine aminotransferase (ALT), and aspartate aminotransferase(AST) and these increases were prevented by baicalin concentrations of 0.1,1, and 100 ${\mu}$M. The increases in ALT and AST levels were reduced by glycyrrhizin concentration of 100 ${\mu}$M. The level of LDH was markedly increased by TBH, and this increase was reduced by both glycyrrhizin and baicalin. ALT and AST levels were increased by TBH, which were prevented by glycynhizin and bacalin, respectively: GaIN markedly increased the levels of LDH, ALT and AST These increases was significantly reduced by both glycyrrhizin and baicalin. These results suggest that glycynhizin and baicalin possess the hepatoprotective activity.
겨우살이는 전통적으로 항암활성이 있는 약용식물의 하나로 알려져 왔고, 렉틴은 세포독성 및 면역자극 자극 활성을 가지는 대표성분으로 인정되고 있다. 한국산 겨우살이에 함유되는 렉틴은 유럽산의 그것과는 달리 galactose와 N-acetylgalactosamine(GalNAc) 특이성을 동시에 가지는 렉틴 성분인 KML인 것으로 나타났다. Sandwich ELISA법을 이용하여 각기 다른 종류의 숙주나무에서 유래된 5종의 겨우살이로부터 렉틴 함량을 비교한 결과, 숙주나무별 차이가 인정되어 밤나무 겨우살이는 참나무 겨우살이에 비하여 약 10배 많은 렉틴을 함유하고 있었다. L5178Y-ML25 lymphoma 세포에 약 90%의 세포독성을 나타내는 농도의 KML과 한국산 참나무 유래 겨우살이 추출물인 KM-100에 두 종류의 단일클론 항체(9H7-10 and 8B11-2C5)를 동시처리한 후 세포독성 중화효과를 조사한 결과, KML의 경우 약 10%, KM-110의 경우 약 30%의 세포독성을 보였다. 이러한 결과는 겨우살이에서 렉틴 외에도 세포독성을 가지는 다른 성분이 존재할 것으로 사료되었다. RAW 264.7 대식 세포주에 KM-110과 KM-110으로부터 렉틴이 제거된 분획인 LFKM-110을 자극시킨 결과, LFKM-110에서 $TNF-{\alpha}$ 및 IL-6와 같은 cytokine의 생산을 증진시키는 결과를 보였다. 따라서 KM-110에서 면역 세포를 자극하는 다른 성분의 존재하고 있음을 강하게 제시되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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