Dao, Hoai Thu;Do, Van Tan;Truong, Quang Lam;Hahn, Tae-Wook
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.30
no.7
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pp.1037-1043
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2020
Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) is a causative agent of porcine pleuropneumonia. Therefore, the development of an effective vaccine for APP is necessary. Here, we optimized the culture medium and conditions to enhance the production yields of Apx toxins in APP serotype 1, 2, and 5 cultures. The use of Mycoplasma Broth Base (PPLO) medium improved both the quantity and quality of the harvested Apx toxins compared with Columbia Broth medium. Calcium chloride (CaCl2) was first demonstrated as a stimulation factor for the production of Apx toxins in APP serotype 2 cultures. Cultivation of APP serotype 2 in PPLO medium supplemented with 10 ㎍/ml of nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) and 20 mM CaCl2 yielded the highest levels of Apx toxins. These findings suggest that the optimization of the culture medium and conditions increases the concentration of Apx toxins in the supernatants of APP serotype 1, 2, and 5 cultures and may be applied for the development of vaccines against APP infection.
Fed-batch fermentation was used to produce the high concentrations of poly-$\beta $-hydroxybutyrate (PHB) and poly-$\beta $-(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) (PHB/V). Specific growth rate ($\mu $), yield of cell from glucose (Y$_{x/s}$) were calculated from the two samples in 3 to 5 hours of interval and they were reflected on the determination of glucose feeding rate to maintain the glucose concentration at around 10 g/l in the culture broth. PHB was accumulated after the nitrogen became limited at 60 g/l of dry cell weight by changing ammonia water to 4N-NaOH solution. As results, the final dry cell weight (DCW) of 170 g/l, PHB of 115 g/l were obtained in 50 hours and the overall productivity was 2.4 g/l$\cdot $h. After PHB accumulation, cosubstrate of glucose and propionic acid (PA) was fed to accumulate PHB/V. But, PA feeding rate was decreased from 3 g/l$\cdot $h to 1 g/l$\cdot $h to prevent PA from accumulating to high level in the broth, which is very inhibitory to the cells. As results, DCW, PHB and PHV were 147.5 g/l, 90 g/l and 8 mole % of hydroxyvalerate, respectively.
Gamma-amino butyric acid (GABA) is a kind of pharmacological and biological component and its application is wide and useful in Korea specially, becoming aging society in the near feature. GABA is request special dose for the purposed biological effect but the production of concentrated GABA is very difficult due to low concentration of glutamic acid existed in the fermentation broth. To increase GABA concentrate using fermentation technology, high content of glutamic acid is required. For this reason, various strains which have the glutamic acid decarboxylase (GAD) and can convert glutamic acid to GABA, were isolated from various fermented foods. Most of GABA producing strains are lactic acid bacteria isolated from kimchi, especially added monosodium glutamate (MSG) as a taste enhancer. Optimizing the formulation of culture media and the culture condition, GABA conversion yield and amounts were increased. Finally GABA concentration of fermentation broth in batch or fed batch fermentation reached 660 mM or 1000 mM, respectively. Furthermore formulation of culture media for GABA production developed commercially. Many studies about GABA-rich product have been continued, so GABA-rich kimchi, cheese, yogurt, black raspberry juice and tomato juices has been also developed. In Korea many biological effects of GABA are evaluated recently and GABA will be expected to be used in multipurpose.
The effect of nutritional and cultural conditions for the production of anti-complementary polysaccharide from Pleurotus sajor-caju was studied. Maximum anti-complementary activity from its culture broth and mycelium was obtained by using lactose and maltose as a carbon source, respectively. Ammonium phosphate (monobasic) and serine were chosen for the highest activity among the inorganic nitrogen compounds and amino acids tested. Optimum temperature for the production of the anti-complementary polysaccharide was $25^{\circ}C$.
Lactobacillus plantarum strain KK3 with tannase activity was isolated from Gochunipkimchi (red pepper leaf kimchi) and showed a high antagonistic activity against five kinds of food pathogens. Strain KK3 secreted antibacterial compound into culture medium and 24-h culture in MRS broth at $30^{\circ}C$ was enough for the antibacterial compound production. The crude antibacterial compound prepared from culture supernatant inhibited the growth of some Gram-negative bacteria and Bacillus cereus but not Listeria monocytogenes. The antibacterial activity was sensitive to proteinase K treatment, confirming its proteinaceous nature (bacteriocin). The crude bacteriocin was active in the pH range 3.5-8.5 and extremely stable after 15 min of heat treatment at $121^{\circ}C$. The strain KK3 produced equally active bacteriocin in Chinese cabbage juice as it produced in MRS broth.
Phyllosticta melochiae, an endophytic fungus isolated from the healthy leaves of Melochia corchorifolia, was screened for the production of an anticancer drug, taxol on modified liquid medium and potato dextrose broth medium in culture for the first time. The presence of taxol was confirmed by spectroscopic and chromatographic methods of analysis. The amount of taxol produced by this fungus was quantified by high performance liquid chromatography. The maximum amount of fungal taxol production was recorded as $274{\mu}g/L$. The production rate was increased to $5.5{\times}1,000$ fold than that found in the culture broth of earlier reported fungus, Taxomyces andreanae. The fungal taxol extracted also showed a strong cytotoxic activity in the in vitro culture of tested human cancer cells by apoptotic assay. The results designate that the fungal endophyte, P. melochiae is an excellent candidate for an alternate source of taxol supply and can serve as a potential species for genetic engineering to enhance the production of taxol to a higher level.
Kim, B. M.;Lee, M.;Lee, J. H.;I. S. Doo;M. K. Son;S. H. Kang;Kim, W. B.;J. W. Kwon
Proceedings of the SCSK Conference
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2003.09a
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pp.659-659
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2003
In this study, we have investigated the potent anti-aging effect of DA-3711, a cosmetic ingredient derived from artificial skin culture. The artificial skin was originally developed as a skin replacement for the treatment of chronic skin wounds. To produce DA-3711, neonatal human fibroblasts were seeded into biocompatible collagen/chitosan/glycosaminoglycan (GAG) scaffolds and cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) supplemented with fetal bovine serum and nonessential amino acids. Analysis of the culture broth (DA-3711) showed that growth factors such as VEGF, TGF-$\beta$, KGF were present at significantly higher levels that in the culture broth of fibroblasts cultured in monolayer. The biological activity of DA-3711 was assessed by measuring in vitro cell proliferation and collagen synthesis of normal human fibroblasts. Fibroblasts treated with 10% DA-3711 showed a 2-fold higher proliferation and 2 to 4-fold higher collagen synthesis than untreated cells. DA-3711 also exhibited anti-oxidative effects, since cells under peroxide-induced oxidative stress showed a 30% higher viability in DA-3711-containing medium than in medium without DA-3711 addition. The results suggest that DA-3711 may have anti-aging effects by stimulating skin regeneration and protecting against oxidative stress.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.3
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pp.399-404
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2002
The fermented fruit and vegetable mixed broth was prepared by using bacteriocin-producing lactic acid bacteria to evaluate the possibility of developing isotonic beverage with anticariogenic activity. Optimum conditions were also established to produce bacteriocin by a mixed culture system consisting of Lc. lactis and Leu. mesenteroides in a fruit and vegetable mixture. Production of bacteriocin was not observed when both strains were simultaneously innoculated, but pH adjustment of the broth fermented by Leu. mesenteroides to nearneutral pH stimulated the production of bacteriocin by Lc. lactis. The concentration of sodium of the fermented broth was higher than those of commercial products. Color change of the fermented broth was not observed during storage. The fermented broth showed strong inhibitory effect against Streptococcus mutans which is an oral inhabitant with a cariogenic activity. Bacteriocin activity in the fermented broth was retained very stable for 4 weeks at 4$\^{C}$. The results indicated that bacteriocin-producing lactic acid bacteria can be used for the preparation of a Korean style thirst-quenching beverage containing bacteriocin.
This study is focused on establishing the optimal conditions to enhance the production of antilisterial substances by Lactobacillus paracasei BK57 isolated from Baikkimchi. In addition, the growth and in situ lactic acid and bacteriocin production of this strain were investigated during the manufacture of fresh cheese. And then the efficacy of using Lactobacillus starter as a protective culture to improve the safety of fresh cheese against Listeria monocytogenes KCTC 3569 was estimated. Maximum growth rate and activity of antibacterial substances were obtained in Lactobacilli MRS broth at $37^{\circ}C$ with controlled pH 6.0 after 30 h of incubation under aerobic condition. However, the growth rate and antimicrobial activity of bacteriocin produced in whole milk supplemented with yeast extract (2.0%) as a substrate were lower than those obtained in MRS broth. Live cells and cell-free culture supernatant of BK57 strain were effective in the suppression of L. monocytogenes in milk, whereas the inhibitory of the bacteriocin obtained from BK57 strain was higher in BHI broth than in milk. During storage at $4^{\circ}C$ and $15^{\circ}C$ for 6 days, no significant difference was found in the cell viability and antimicrobial activity of BK 57 strain in fresh cheese. In samples held at two temperatures, there was at least a 15% reduction in the numbers of the pathogen in fresh cheese artificially contaminated with approximately $10^5CFU/ml$ of L. monocytogenes within 6 days. Our results demonstrated the usefulness of L. paracasei BK57 having antilisterial activity as a biopreservative in the cheese making process.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.24
no.2
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pp.449-459
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1997
The main component of dental plaque is the mutan containing the a-1,3 bond. The following results were obtained by using a blue mutan to assess the factors affecting the mutan-digesting activity of Streptomyces exfoliatus isolated from soil. A clear zone was produced by mutanase-producing Streptomyces exfoliatus on the minimal essential agar containing blue mutan. Streptomyces exfoliatus digested more blue mutan in the minimal essential broth at pH 7.0 than at pH 5.5 or 8.5. Streptomyces exfoliatus digested more blue mutan at $37^{\circ}C$ than at $32^{\circ}C$ or $42^{\circ}C$ (P<0.05). When the concentration of $CaCl_2$ was increased in the minimal essential broth, the digestion of blue mutan was increased (P<0.05). The optimal concentration of KCl was 10mM to digest blue mutan, but a similar amount of blue mutan was digested at the range of 0.1mM to 6.4mM of $MgCl_2$. When the culture supernatant of Streptomyces exfoliatus was mixed with 2X brain heart infusion broth containing 0.5% yeast extract and 10% sucrose, less artificial plaque was formed by Streptococcus mutans on the orthodontic wire (P<0.05). These results indicated that the secretion of mutanase was identified in culture supernatant of mutan-digesting Streptomyces exfoliatus, suppressing the formation of artificial plaque by Streptococcus mutans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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