Kim, Jeong Jun;Xie, Ling;Han, Ji Hee;Lee, Sang Yeob
Mycobiology
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v.42
no.4
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pp.346-352
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2014
Recently, the Q biotype of tobacco whitefly has been recognized as the most hazardous strain of Bemisia tabaci worldwide, because of its increased resistance to some insecticide groups. As an alternative control agent, we selected an Isaria javanica isolate as a candidate for the development of a mycopesticide against the Q biotype of sweet potato whitefly. To select optimal mass production media for solid-state fermentation, we compared the production yield and virulence of conidia between 2 substrates (barley and brown rice), and we also compared the effects of various additives on conidia production and virulence. Barley was a better substrate for conidia production, producing $3.43{\times}10^{10}$ conidia/g, compared with $3.05{\times}10^{10}$ conidia/g for brown rice. The addition of 2% $CaCO_3+2%$$CaSO_4$ to barley significantly increased conidia production. Addition of yeast extract, casein, or gluten also improved conidia production on barley. Gluten addition (3% and 1.32%) to brown rice improved conidia production by 14 and 6 times, respectively, relative to brown rice without additives. Conidia cultivated on barley produced a mortality rate of 62% in the sweet potato whitefly after 4-day treatment, compared with 53% for conidia cultivated on brown rice. The amendment of solid substrate cultivation with additives changed the virulence of the conidia produced; the median lethal time ($LT_{50}$) was shorter for conidia produced on barley and brown rice with added yeast extract (1.32% and 3%, respectively), $KNO_3$ (0.6% and 1%), or gluten (1.32% and 3%) compared with conidia produced on substrates without additives.
The production of conidia of entomopathogenic Beauveria bassiana by solid-state fermentation was studied for the development of a biocontrol agent against aphid Myzus persicae. The optimal conditions for conidia production on polished white rice were 40% moisture content, $25^{\circ}C$ culture temperature, 2-day-old seeding culture grown in 3% corn meal, 2% rice bran, 2% corn steep powder medium, initial conidia concentration of $10^7$ conidia/g in the wet rice, 10% inoculum size, and use of a polyethylene bag as a container. The polyethylene bag containing inoculated rice was hand-shaken every 12 hr during fermentation. Using optimal conditions, the maximum conidia production obtained was 4.05 g conidia/100 g dry rice after 14 days of cultivation, a rate 2.83 times higher than conidia yield of pre-optimization.
Choi, Eu Ddeum;Kim, Gyoung Hee;Lee, Young Sun;Jung, Jae Sung;Song, Jang Hoon;Koh, Young Jin
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.1
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pp.75-79
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2017
The causal fungus of pear scab, Venturia nashicola, grows slowly and rarely produces conidia on artificial media in the laboratory, but it produced conidia on the Cheongah medium containing Cheongah powder. V. nashicola grew too slow to produce conidia until 15 days after cultivation but produced conidia with $4{\time}10^4$ conidia/plate 30 days after cultivation on the Cheongah medium containing 1% Cheongah powder. V. nashicola showed a peak production of conidia with $4.5{\times}10^5$ conidia/plate 60 days after cultivation on the carrot medium containing 2% carrot powder, one of the constituents of Cheongah powder. The carrot medium is considered to be the best medium to obtain conidia of V. nashicola in the laboratory until now. This is the first report on the development of a suitable medium for conidia production of V. nashicola, as far as we know.
The production of aerial conidia of Lecanicillium lecanii 41185, a highly virulent fungus, by solid-state fermentation was studied for use as a biocontrol agent against aphids. Among several agro-industrial solid media, steamed polished rice was found to produce the highest amount of aerial conidia. The optimal conditions for aerial conidia production were determined to be a 28.5% moisture content in the rice, 25$^{\circ}C$ culture temperature, rice pH of 6.0, 75% ambient relative humidity, 4-dold seeding culture, 0.6% $KNO_3$, and 12 d of culture time. The conidia yield increased from $5.7\times10^9$ conidia/g polished rice to 18.2 $18.2\times10^9$ conidia/g polished rice following application of these optimized conditions.
Hyun, Jae-Wook;Paudyal, Dilli Prasad;Hwang, Rok-Yeon
Research in Plant Disease
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v.21
no.3
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pp.231-234
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2015
Elsinoe fawcettii and E. australis are two currently recognized scab pathogens of citrus. E. fawcettii has at least six pathotypes while E. australis has at least two pathotypes. Colonies of E. fawcettii and E. australis do not sporulate in artificial media including potato dextrose agar (PDA). Whiteside's method has been widely used for preparing conidial inoculum in vitro. This study was carried out to develop efficient method for conidia production from artificial media. We developed a shaking method which included the following steps: 1) Colony grown on PDA was mashed with a steel spatula; 2) Mycelia fragments were cultured in 50 ml sterilized rain water in a rotary shaker-incubator (180 rpm) at $25^{\circ}C$ for 24 h: 3) The conidia suspension was filtered through two layers of cheesecloth. Average conidia production of all isolates tested using this shaking method was approximately 13.1 times higher than that from Whiteside's method in this study.
For mass production of entomopathogenic fungus Beauveria bassiana 149, isolated from moth larva, by two-phase fermentation, we performed selection of carbon and nitrogen sources for liquid culture and examined solid fermentation on carrier, ingredient, temperature, and water content. Spore production with rice powder, corn powder, and starch from sweet potato was higher than that of sucrose and dissolvable starch for liquid fermentation as first-phase fermentation. As a nitrogen source, addition of peptone and yeast powder showed higher spore production than $NaNO_3$, fish powder, and soybean powder. The isolate produced more conidia in sawdust + wheat bran + corn powder, sawdust + wheat bran and rice shell + wheat bran as carrier and ingredient than vermiculite as carrier. Conidia production of B. bassiana 149 in solid-phase fermentation was twice higher at 30 than 20. Conidia yield was higher at 60% and 70% water content ($26.9{\times}10^8$ and $38.6{\times}10^8conidia/g$) than 40% and 50% ($13.9{times}10^8 $and $11.6{\times}10^8conidia/g$), respectively.
The effects of media, incubation time, temperature and pH on production of conidia and chlamydospore of Cylindrocarpon destructans (Zinssm.) Scholen causing root rot of Panax ginseng were studied. Microconidia of the pathogen were abundantly produced on V-8 juice agar as a solid substrate with 5.73(log conidia/mm2) and in V-8 broth as a liquid substrate with 6.65 (log conidia/ml) among media tested. No difference was observed on the length of microconidia produced from the media with a range of 9.50∼11.38 $\mu\textrm{m}$. However, tryptic soy agar produced the broadest microconidia (average 5.00 $\mu\textrm{m}$) among the media tested. All the media produced chlamydospores In a range of 1.06∼4.37 (log chlamydospores/mm2) without a significant difference in number, while V-8 juice agar produced the bigger one (18.39 $\mu\textrm{m}$ in diameter) as compared to the tested media. The fungus began to sporulate conidia after three days of incubation and reached maximum at the 8th day. It seemed to be in a stationary phase until 30 days of incubation but was decreased thereafter. Chlamydospore was produced at 4th day after incubation. Maximum production was observed at 8th day and the number seemed to be maintained during the observation period. Both conidia and chlamydospore of the pathogen were able to be spoluated at 10∼25$^{\circ}C$. However, optimum temperatures of conidia and chlamydospore formation were 15∼25$^{\circ}C$ and 10∼20$^{\circ}C$, respectively. C. destrmtans produced conida with an wide range of pH from 3.3 to 8.0 and chlamydospore from 2.8 to 8.0. Number of conidia was increased with an increase of pH up to 4.0. There was no significant difference in the number between 4.0 to 8.0. It seemed to have two optimum pH ranges, 3.3∼4.0 and 7.1∼8.0 for the chlamydospore formation.
Fusarium graminearum (teleomorph Gibberella zeae) is an important plant pathogen that causes head blight of major cereal crops such as wheat, barley, and rice, as well as causing ear and stalk rot on maize worldwide. Plant diseases caused by this fungus lead to severe yield losses and accumulation of harmful mycotoxins in infected cereals [1]. Fungi utilize spore production as a mean to rapidly avoid unfavorable environmental conditions and to amplify their population. Spores are produced sexually and asexually and their production is precisely controlled. Upstream developmental activators consist of fluffy genes have been known to orchestrate early induction of condiogenesis in a model filamentous fungus Aspergillus nidulans. To understand the molecular mechanisms underlying conidiogenesis in F. graminearum, we characterized functions of the F. graminearum fluffy gene homologs [2]. We found that FlbD is conserved regulatory function for conidiogenesis in both A. nidulans and F. graminearum among five fluffy gene homologs. flbD deletion abolished conidia and perithecia production, suggesting that FlbD have global roles in hyphal differentiation processes in F. graminearum. We further identified and functionally characterized the ortholog of AbaA, which is involved in differentiation from vegetative hyphae to conidia and known to be absent in F. graminearum [3]. Deletion of abaA did not affect vegetative growth, sexual development, or virulence, but conidium production was completely abolished and thin hyphae grew from abnormally shaped phialides in abaA deletion mutants. Overexpression of abaA resulted in pleiotropic defects such as impaired sexual and asexual development, retarded conidium germination, and reduced trichothecene production. AbaA localized to the nuclei of phialides and terminal cells of mature conidia. Successful interspecies complementation using A. nidulans AbaA and the conserved AbaA-WetA pathway demonstrated that the molecular mechanisms responsible for AbaA activity are conserved in F. graminearum as they are in A. nidulans. F. graminearum ortholog of Aspergillus nidulans wetA has been shown to be involved in conidiogenesis and conidium maturation [4]. Deletion of F. graminearum wetA did not alter mycelial growth, sexual development, or virulence, but the wetA deletion mutants produced longer conidia with fewer septa, and the conidia were sensitive to acute stresses, such as oxidative stress and heat stress. Furthermore, the survival rate of aged conidia from the F. graminearum wetA deletion mutants was reduced. The wetA deletion resulted in vigorous generation of single-celled conidia through autophagy-dependent microcycle conidiation, indicating that WetA functions to maintain conidia dormancy by suppressing microcycle conidiation in F. graminearum. In A. nidulans, FlbB physically interacts with FlbD and FlbE, and the resulting FlbB/FlbE and FlbB/FlbD complexes induce the expression of flbD and brlA, respectively. BrlA is an activator of the AbaA-WetA pathway. AbaA and WetA are required for phialide formation and conidia maturation, respectively [5]. In F. graminearum, the AbaA-WetA pathway is similar to that of A. nidulans, except a brlA ortholog does not exist. Amongst the fluffy genes, only fgflbD has a conserved role for regulation of the AbaA-WetA pathway.
A method for inoculum production of Botryosphaerisa dothidea was developed using cucumber disks and cereal media. Disks of cucumber fruits, and cereal media of barley, wheat, and rice seeds were inoculated with mycelial plugs of B. dothidea and incubated at 27$^{\circ}C$. Pycnidia were produced on the surface of cucumber disks and seeds after 5 days of inoculation. When the inoculated barley seeds were immersed in sterilized distilled water for 5 minutes, abundant conidia of B. dothidea were exuded from mature pycnidia. Conidia were held together by mucilage as they were released from an ostiole. Compared with the conventional method for inoculum preparation using agar media, such as potato-dextrose agar and oatmeal agar, this method could minimize the tedious work required for inoculum preparation within a shorter period of time.
In an attempt to find a satisfactory environmental factors which facilitate abundant conidial production of Piriculariaoryzae Cav. on tomato juice media, various environmental factors were studied for their effect on sporulation and mycelial growth of the fungus. Those factors were conditions of irradiation, color of light, age of culture and pH of the media. l) Continuous exposure to fluorescent light (Mitsubish FL-20-35 W) produced more conidia and much mycelial growth than did intermittent photoperiods and darkness. 2) Of 3 cellophane filters and direct exposure to fluorescent light used, conidia were produced best under the direct exposure to the light. Conidial production in color filter conditions sequently decreased with red, yellow and blue. Growth of mycelium was not significantly different within colors. 3) Periodic irradiation of 12-hour unit brought about zones on mycelial growth no matter what the color filter was used. 4) Older cultures responding to the light were more stimulated by light than were the younger one in the conidia production, but maximum production of conidia was 48 hours of age in this case. 5) Color of the mycelial mat and the aerial mycelium seemed to have a close relation to the production of conidia. The more darkness of the mycelial mat was produced the more conidia and the much aerial mycelium was produced the least conidia. The color of mycelium was more dark under the continuous irradiation than continuous darkness, while the periodic irradiation showed intermediate effect. 6) The concentration of hydrogen ion for growth and sporulation of the fungus was investigated the ranges between 5 and 9. The best pH for the fungus was also noted at 7. whereas the below of pH 4 was not occurred any mycelial growth and sporulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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