Four coumarins (1-4) and one polyacetylene (5) were isolated from the roots of Anglica purpuraefolia Chung (Umbelliferae) through repeated column chromatography. Four coumarins, isoscopoletin (1), oxypeucedanin hydrate (2), arnottinin (3) and isokhellactone (4), and a polyacetylene, (+)-9(Z), 17-octadecadience-12,14-diyne-1,11,16-triol (5), were identified by spectroscopic analysis including two dimensional NMR and mass. These compounds were examined for their anti-complement activity against the classical pathway of the complement system. However, compounds 1-5 were inactive in this assay system.
Two kinds of complement activating (anti-complementary) polysaccharides, which were expected to be immunomodulators were purified from Arecae Pericarpium (the pericarps of Areca catechu), and their action modes have been studied. The active polysaccharides, AC-2-IIIa and AC-2-IIIc from Arecae Pericarpium showed dose-dependent anti-complementary activities on $TCH_{50}$. The anti-complementary activities of AC-2-IIIa and AC-2-IIIc in metal ion-free condition were completely decreased in comparison with control whereas in case of $Ca^{2+}$-free condition, these activities were maintained, considerably. Also AC-2-IIIa and AC-2-IIIc showed relatively potent alternative complement pathway activities. Furthermore, after incubation of the normal human serum with polysaccharide of Arecae Pericarpium in the absence of $Ca^{2+}$ ion, a cleavage of C3 in the serum was found to have occurred through immunoelectrophoresis (IEP) with anti-human C3. Also, from the results of IEP using anti-human whole serum, the ratios of the height of 3rd peak to ${\alpha}2-M$ peak by AC-2-IIIa and AC-2-IIIc proved to be $1.50{\pm}0.04$ and $1.22{\pm}0.08$, respectively. These results indicate that the modes of complement activation by AC-2-IIIa and AC-2-IIIc from Arecae Pericarpium are via both the classical pathway and the alternative pathway.
To screen inhibitors on complement system from natural resources, micro-screening method was established by using hemolytic complement assay. Complement fixation reaction was carried out in the microplate system. For standard hemolysis (50% hemolysis) of the classical pathway (CP), hemolysin and complement serum were diluted to $1/75{\sim}1/100\;and\;1/80{\sim}1/120$, respectively, when sheep erythrocytes were $5.0{\times}10^8\;cells/ml$. In case of the alternative pathway (AP), complement serum was diluted to 1/5 and EGTA and $Mg^{2+}$ were added 4 mM, $4{\sim}8\;mM$, respectively, when rabbit erythrocytes were $4.0{\times}10^8\;cells/ml$. Dimethyl sulfoxide was used for the assay of non-aquous soluble compounds or extracts and its final concentration was not more than 1%. Three phenylpropanoids showed anticomplementary activities in proportion to the concentration for both pathways and rosmarinic acid exihibited the highest inhibitory activities: $5.4{\pm}3.6%(0.063\;mM){\sim}95.8{\pm}0.2%(0.5\;mM)\;and\;35.1{\pm}0.9%(0.063\;mM){\sim}95.6{\pm}1.1%(1\;mM)$ on the CP and the AP, respectively.
Screenings were performed on edible plants to examine their complement-system activating ability (anti-complementary activity) by hemolytic complement assay $(TCH_{50})$. Among 38 kinds of plant extracts, 5 kinds showed relatively strong anti-complementary activity which decreased $TCH_{50}$ more than 60% comparison with control and the order of activity was Zingiber officinale>Colocasia antiquorum>Capsella bursapastoris>Ginkgo biloba>Alium monanthum in $1000{\mu}g/ml$. The anti-complementary activity of ZR-1 prepared from the root of Zingiber officinale which was showed the most potent activity, did not change by pronase treatment, but decreased greatly by periodate oxidation. These results indicate that not protein moiety but carbohydrate moiety in ZR-1 fraction may also contribute to the anti-complementary activity. Also, the anti-complementary activity of ZR-1 was reduced partially in the absence of the $Ca^{2+}$ ion. When crossed immunoelectrophoresis using anti-human C3 serum was carried out after incubation of normal human serum with the ZR-1 in $Ca^{2+}$ free condition, a cleavage of C3 precipitin line was observed. Furthermore this polysaccharide fraction considerably inhibited $ACH_{50}$. These results also indicate that the mode of complement activation by polysaccharide from Zingiber officinale is via not only the classical pathway but also the alternative pathway.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.2
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pp.248-253
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1997
The paper describes the activation mode and the glycosic linkage of anti-complementary polysaccharide isolated from Cinnamomum cassia. The polysaccharide fractions, CC-IIIa, CC-IIIb, and CC-IIIc, activated C3 component existed in normal human serum and produced C3 cleavage segments, C3a and C3b. The polysaccharide, CC-2-IIIa-3 activated the complement system both in the presence and absence of $Ca^{++}$, suggesting that it involved in both classical and alternative complement pathways. Methylation of CC-2-IIIa-3 was performed with methylsulphinyl carbanion and methyl iodide in DMSO. The methylated products was hydrolyzed, then converted into the partially methylated alditol acetates. Gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS) revealed derivatives of terminal $Glc{\rho}$ and $Gal{\rho}$, 1,2-linked $Rha{\rho}$, 1,6-linked $Man{\rho}$, 1,3-linked $Glc{\rho}$, 1,6-linked $Gal{\rho}$ etc.
The crude biopolymer (AS-S1) and endobiopolymer (AS-S2) were isolated from the dry stem bark of Acanthopanax sessiliflorus and tested for anti complement activity. The two potent anticomplement biopolymers, AS-1 and AS-2-Fr.I, were isolated by the combination of ion-exchange chromatography and gel filtration methods from the endo-biopolymers (AS-S2). The anticomplement activity of AS-1 (MW 12 kDa) and AS-2-Fr.I (MW 180 kDa) were found to be 84.4% and 100.0%, respectively, at the concentration of $25{\mu}g/ml$. Activated pathway of the complement system occurred in both classical and alternative pathways, as evidenced by crossed immunoelectrophoresis(CIEP), where a major pathway was detected to be the classical one. It was found that the anticomplement activities of the periodate oxidized were decreased significantly, but those of pronase digested biopolymers of AS-1 and AS-2-Fr.I were decreased very little. The AS-1 contained 2,4,6-tri-O-methyl-D-glucitol, 2,3,6-tri-O-methyl-D-galacitol, and 2,3,6-tri-O-methyl-D-galacitol, which indicated that AS-1 contained a $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}4)-linked$ glucopyranosyl residue and a $(1{\rightarrow}4)-linked$ galactosyl residue. AS-2-Fr.I contained mainly 2,4-di-O-methyl-D-mannitol and 2,3,4-tri-O-methyl-D-galacitol, which contained $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}6)$ linked mannosyl and $(1{\rightarrow}6)$ linked galactosyl residues.
From December 1993 to April 1994, to investigate complement activation and pulmonary leukostasis, thirty adult patients were studied during cardiopulmonary bypass[CPB for cardiac surgery in Department of Cardiovascular & Thoracic Surgery, Pusan Paik Hospital, Inje University. Total patients were divided into group I and II according to the purpose of study ; Group I was 15 patients undergoing CPB with bubble oxygenator, Group II was 15 patients undergoing CPB with membrane oxygenator. The results of study were summarized as follows.1. The decrease of C3 and C4 levels were observed within few minutes of beginning of CPB in all patients[P<0.05 , and this decrease was proved to be due to complement activation, not by the influence of hemodilution.2. In the correlation between the change of C3 and C4, group I showed linear correlation each other suggesting complement activation occurred through the classical pathway, group II showed a correlation at only partial sampling times suggesting complement activation via both classical and alternative pathway, however there was no significant statistical difference at the change of C3 and C4 concentrations in two groups[P>0.05 .3. After switching to partial CPB, a few difference between right atrial and left atrial WBC count was observed, but statistically not significant and median cell count difference between group I and II was not significant, too [P>0.05 . With the above result, we concluded that CPB itself contributes to the activation of complement system, but bubble oxygenator does not activate always complement system more than membrane oxygenator.
The present study uses quasi-classical trajectory procedures to examine the vibrational relaxation and dissociation of the methyl and ring C-H bonds in excited methylpyrazine (MP) during collision with either N2 or O2. The energy-loss (-ΔE) of the excited MP is calculated as the total vibrational energy (ET) of MP is increased in the range of 5,000 to 40,000cm-1. The results indicate that the collision-induced vibrational relaxation of MP is not large, increasing gradually with increasing ET between 5,000 and 30,000 cm-1, but then decreasing with the further increase in ET. In both N2 and O2 collisions, the vibrational relaxation of MP occurs mainly via the vibration-to-translation (V→T) and vibration-to-vibration (V→V) energy transfer pathways, while the vibration-to-rotation (V→R) energy transfer pathway is negligible. In both collision systems, the V→T transfer shows a similar pattern and amount of energy loss in the ET range of 5,000 to 40,000cm-1, whereas the pattern and amount of energy transfer via the V→V pathway differs significantly between two collision systems. The collision-induced dissociation of the C-Hmethyl or C-Hring bond occurs when highly excited MP (65,000-72,000 cm-1) interacts with the ground-state N2 or O2. Here, the dissociation probability is low (10-4-10-1), but increases exponentially with increasing vibrational excitation. This can be interpreted as the intermolecular interaction below ET = 71,000 cm-1. By contrast, the bond dissociation above ET = 71,000 cm-1 is due to the intramolecular energy flow between the excited C-H bonds. The probability of C-Hmethyl dissociation is higher than that of C-Hring dissociation.
The immunomodulating activities and chemical characteristics of a water-soluble exopolymer from submerged mycelial culture of Phellinus pini were studied. Anticomplementary activity of this polymer was found to be $73.2\%$, and its activation system occurred through both classical and alternative pathways, where the classical pathway was detected to be the major one by crossed immunoelectrophoresis. Nitric oxide (NO) release ability and acid phosphatase activity of macrophage were increased by 1.6-fold ($100{\mu}g/ml$) and 3.4-fold ($500{\mu}g/ml$), respectively, and splenocyte proliferation in mixed lymphocyte reaction (MLR) was also increased by 2.6-fold ($200{\mu}g/ml$), compared to the control. The molecular weight of this polymer, determined by HPLC, was under 5 kDa. Total sugar and protein contents were 89.7 and 10.3%, respectively. Both sugar and amino acid compositions of the exopolymer were also analyzed.
Park, Young-Hoon;Jeong, Suk;Ha, Ki-Tae;Yu, Hak Sun;Jang, Se Bok
BMB Reports
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v.50
no.5
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pp.269-274
/
2017
The biological activities of macrophage migration inhibitory factor (MIF) might be mediated through a classical receptor-mediated or non-classical endocytic pathway. JAB1 (C-Jun activation domain-binding protein-1) promotes the degradation of the tumor suppressor, p53, and the cyclin-dependent kinase inhibitor, p27. When MIF and JAB1 are bound to each other in various intracellular sites, MIF inhibits the positive regulatory effects of JAB1 on the activity of AP-1. The intestinal parasite, Anisakis simplex, has an immunomodulatory effect. The molecular mechanism of action of As-MIF and human JAB1 are poorly understood. In this study, As-MIF and hJAB1 were expressed and purified with high solubility. The structure of As-MIF and hJAB1 interaction was modeled by homology modeling based on the structure of Ace-MIF. This study provides evidence indicating that the MIF domain of As-MIF interacts directly with the MPN domain of hJAB1, and four structure-based mutants of As-MIF and hJAB1 disrupt the As-MIF-hJAB1 interaction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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