Lee Kang-Mu;Choi Sun-Uk;Park Hae-Ryong;Hwang Yong-Il
Korean Journal of Microbiology
/
v.41
no.2
/
pp.140-145
/
2005
Streptomyces natalensis ATCC27448 produces natamycin, a commercially important macrolide antifungal antibiotic. For molecular genetic study of S. natalensis, we have developed a system for introducing DNA into S. natalensis via conjugal transfer from Escherichia coli. An effective transformation procedure for S. natalensis was established based on transconjugation from E, coli ET12567/pUZ8002 using a ${\Phi}C31$-derived integration vector, pSET152, containing oriT and attP fragments. The high frequency was obtained on MS medium containing 10 mM $MgCl_2$ using $6.25\times10^8$ of E.coli donor cells without heat treatment of spores. In addition, southern blot analysis of exconjugants and the sequence of plasmids containing DNA flanking the insertion sites from the chromosome revealed that S. natalensis contains a single ${\Phi}C31$ attB site and at least a secondary or pseudo attB site. Similar to the case of various Streptomyces species, a single ${\Phi}C31$ attB site of S. natalensis is present within an ORF encoding a pirin-homolog, but a pseudo-attB site is present within a distinct site (GenBank accession no. $YP\_117731$) and also its sequence deviates from the consensus sequences of attB sequence.
Foxo1 plays an important role in the integration of hormone-activated signaling pathways with the complex transcriptional cascade that promotes preadipocyte differentiation of clonal cell lines from rodents. We isolated the full-length cDNA of porcine FoxO1 gene using RACE, confirmed by visual Northern blotting. The deduced amino acids indicated 94% and 90% identities with the corresponding human and mice aa. Analysis of the aa sequence, showed that it included a Forkhead domain (aa 167-247), a transmembrane structure domain (aa 90-113), a LXXLL motif (aa 469-473), and 51 Ser, 8 Thr, and 4 Tyr phosphorylation sites, indicating a potential important role for FoxO1 transcriptional activity in vivo. Using the IMpRH panel, we mapped FoxO1 gene to chromosome 11p13. Our data provide basic molecular information useful for the further investigation on the function of FoxO1 gene. Time-course analysis of FoxO1 expressions indicated that levels of mRNA and protein gradually increased from day 0 to 3, and it reached almost maximal level at day 3, then decreased from day 5 to 7 in porcine primary preadipocyte differentiation. After induction by IGF-1, GPDH activity and accumulation of lipid increased, however, expressions of FoxO1 mRNA and protein were inhibited in a dose dependent manner. These results suggest that FoxO1 takes part in porcine preadipocyte differentiation and expressions of FoxO1 were regulated by IGF-1.
Map-based cloning to find genes of interest, marker-assisted selection (MAS), and marker-assisted breeding (MAB) all require good genetic maps with high reproducible markers. For map construction as well as chromosome assignment, development of single copy PCR-based markers and map integration process are necessary. In this study, the 132 markers (57 STS from BAC-end sequences, 13 STS from RFLP, and 62 SSR) were newly developed as single copy type PCR-based markers. They were used together with 1830 markers previously developed in our lab to construct an integrated map with the Joinmap 3.0 program. This integrated map contained 169 SSR, 354 RFLP, 23 STS from BAC-end sequences, 6 STS from RFLP, 152 AFLP, 51 WRKY, and 99 rRAMP markers on 12 chromosomes. The integrated map contained four genetic maps of two interspecific (Capsicum annuum 'TF68' and C. chinense 'Habanero') and two intraspecific (C. annuum 'CM334' and C. annuum 'Chilsungcho') populations of peppers. This constructed integrated map consisted of 805 markers (map distance of 1858 cM) in interspecific populations and 745 markers (map distance of 1892 cM) in intraspecific populations. The used pepper STS were first developed from end sequences of BAC clones from Capsicum annuum 'CM334'. This integrated map will provide useful information for construction of future pepper genetic maps and for assignment of linkage groups to pepper chromosomes.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
/
1995.07a
/
pp.57-86
/
1995
Molecular mapping of plant genomes has progressed rapidly since Bostein et al.(1980) introduced the idea of constructing linkage maps of human genome based on restriction fragment length polymorphism (RFLP) markers. In recent years, the development of protein and DNA markers has stimulated interest for the new approaches to plant improvement. While classical maps based on morphological mutant markers have provided important insights into the plant genetics and cytology, the molecular maps based on molecular markers have a number of inherent advatages over classical genetic maps for the applications in genetic studies and/or breeding schemes. Isozymes and DNA markers are numerous, discrete, non-deleterious, codominant, and almost entirely free of environmental and epistatic interactions. For these reasons, they are widely used in constructing detailed linkage maps in a number of plant species. Plant breeders improve crops by selecting plants with desirable phenotypes. However a plant's phenotyes is often under genetic control, positioning at different "quantitative trait loci" (QTLs) together with environmental effects. Molecular maps provide a possible way to determine the effect of the individual gene that combines to produce a quantitative trait because the segregation of a large number of markers can be followed in a single genetic cross. Using market-assisted selection, plants that contain several favorable genes for the trait and do not contain unfavourable segments can be obtained during early breeding processes. Providing molecular maps are available, valuable data relevant to the taxonomic relationships and chromosome evolution can be accumulated by comparative mapping and also the structural relationships between linkage map and physical map can be identified by cDNA sequencing. After constructing high density maps, it will be possible to clone genes, whose products are unknown, such as semidwarf and disease resistance genes. However, much attention has to be paid to level-up the basic knowledge of genetics, physiology, biochemistry, plant pathology, entomology, microbiology, and so on. It must also be kept in mind that scientists in various fields will have to make another take off by intensive cooperation together for early integration and utilization of these newly emerging high-techs in practical breeding. breeding.
Aspergillus oryzae M-2-3 strain (argB$\^$-/) was transformed with pTAalp plasmid which was constructed for expression of the alkaline pretense gene, alpA, and 16 transformants were selected on arginine minus medium. When these transformants were tested for productivity of alkaline proteases using agar plate containing skim milk, the halo was observed around each colony of transformants, but not observed around the host strain in this condition. Southern analysis showed that the pTAalp plasmid having alpA gene was integrated into the chromosome of the host strain. The highest level of alkaline protease production was obtained in the culture filtrate of the transformant No. 14, which was estimated to 80-90% of total secreted proteins, and the enzyme activity was 64-450 times higher than those of host strain and industrial strain. Total nitrogen content and the digestion rate in soybean Koji extracts were also increased to 1.5 times in Aspergillus oryzae transformant No. 14.
Xu, Zhaoxian;Cao, Changhong;Sun, Zhuzhen;Li, Sha;Xu, Zheng;Feng, Xiaohai;Xu, Hong
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.25
no.11
/
pp.1819-1826
/
2015
Poly(ε-ʟ-lysine) (ε-PL) is a novel bioactive polymer secreted by filamentous bacteria. Owing to lack of a genetic system for most ε-PL-producing strains, very little research on enhancing ε-PL biosynthesis by genetic manipulation has been reported. In this study, an effective genetic system was established via intergeneric conjugal transfer for Streptomyces albulus PD-1, a famous ε-PL-producing strain. Using the established genetic system, the Vitreoscilla hemoglobin (VHb) gene was integrated into the chromosome of S. albulus PD-1 to alleviate oxygen limitation and to enhance the biosynthesis of ε-PL in submerged fermentation. Ultimately, the production of ε-PL increased from 22.7 g/l to 34.2 g/l after fed-batch culture in a 5 L bioreactor. Determination of the oxygen uptake rate, transcriptional level of ε-PL synthetase gene, and ATP level unveiled that the expression of VHb in S. albulus PD-1 enhanced ε-PL biosynthesis by improving respiration and ATP supply. To the best of our knowledge, this is the first report on enhancing ε-PL production by chromosomal integration of the VHb gene in an ε-PL-producing strain, and it will open a new avenue for ε-PL production.
Rapid and accurate diagnosis of diseases is very important for appropriate treatment of patients. Recent advances in molecular-level interaction and detection technologies are upgrading the clinical diagnostics by providing new ways of diagnosis, with higher speed and accuracy. In particular, DNA microarrays can be efficiently used in clinical diagnostics which span from discovery of diseaserelevant genes to diagnosis using its biomarkers. Diagnostic DNA microarrays have been used for genotyping and determination of disease-relevant genes or agents causing diseases, mutation analysis, screening of single nucleotide polymorphisms (SNPs), detection of chromosome abnormalities, and global determination of posttranslational modification. The performance of DNA-microarray-based diagnosis is continuously improving by the integration of other tools. Thus, DNA microarrays will play a central role in clinical diagnostics and will become a gold standard method for disease diagnosis. In this paper, various applications of DNA microarrays in disease diagnosis are reviewed. Special effort was made to cover the information disclosed in the patents so that recent trends and missing applications can be revealed.
Sporulation mutants of Bacillus subtilis were developed for overproduction of heterologous proteins. The strains spoOJ spoIIG, and spoOJ spoIIG double mutant were constructed from two pretense-delfted mutant (DB104). The vector containing aprE gene was integrated in the chromosome of each strain, then the morphology of each strain was observed by TEM (trasmission electron microscopy). The morphology of spoOJ mutant and spoIIG mutant coincides with the description of the previous reports, respectively. The sporulating cells of spoOJ SpoIIG double mutation resemble spoIIG mutant more similarly, but with a little rougher cell wall membrane. The spoOJ mutation in B. subtilis gives negative effect on aprE activity with only a decreased sporulation frequency. On the contrary spoIIG mutation increases the aprE activity twice with an undetectable sporulation frequency. In the case of spoOJ and spolIG, i. e. double mutation, the effect of spoOJ on aprE activity seems to be relieved and the double mutant shows more or less the same aprE activity compared to spoIIG mutant.
Porphyromonas gingivalis, the gram-negative anaerobic oral bacterium, initiates periodontal disease by binding to saliva-coated oral surface. The cholera toxin B subunit (CTB) genetically linked to FimA1 (1-200 aa) or FimA2 (201-337 aa) of the P. gingivalis fimbrial antigen were introduced into Solanum tuberosum cells by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation method. The integration of CTB-FimA1 or CTB-FimA2 fusion genes were confirmed in the chromosome of transformed leaves by genomic DNA PCR amplification method. Synthesis and assembly of the CTB-FimA fusion proteins into oligomeric structures with pentamer size was detected in transformed tuber extracts by immunoblot analysis. The binding activities of CTB-FimA fusion proteins to intestinal epithelial cell membrane receptors were confirmed by GM1-ganglioside enzyme-linked immunosorbent assay (GM1-ELISA). The ELISA showed that the expression levels of the CTB-FimA1 or CTB-FimA2 fusion proteins were 0.0019, 0.002% of the total soluble protein in transgenic tuber tissues, respectively The synthesis of CTB-FimA monomers and their assembly into biologically active oligomers in transformed potato tuber tissues demonstrates the feasibility of using edible plants for the production of enterocyte targeted fimbrial antigens that could elicit mucosal immune responses.
Kim, Hee Kyoung;Go, Ji Yun;Park, So-Young;Kang, Kwon Kyoo;Jung, Yu Jin
Journal of Plant Biotechnology
/
v.47
no.3
/
pp.227-234
/
2020
To produce the miraculin protein in suspension cultures, rice (Oryza sativa L.) was transformed with Agrobacterium tumefacience EHA105 containing the miraculin AB512278 gene. The cell suspension cultures were established using cell lines selected from transgenic rice callus. The integration of the miraculin gene into the rice chromosome was confirmed using genomic PCR analysis. In addition, RT-PCR analysis indicated that the miraculin gene is expressed in the selected suspension cell lines. Thus, the recombinant miraculin was expressed in the transgenic suspension cell line, HK-2. Therefore, we have successfully developed a HK-2 line that produces miraculin. These results demonstrate that transformed cell suspension cultures can be used to produce a taste-modifying protein such as miraculin.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.