Gilson Khang;Park, Myoung-Kyu;Jong M. Rhee;Lee, Sang-Jin;Lee, Hai-Bang;Yasuhiko Iwasaki;Nobuo Nakabayashi;Kazuhiko Ishihara
Macromolecular Research
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제9권2호
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pp.107-115
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2001
Poly(L-lactide-co-glycolide)(PLGA) was blended with poly[$\omega$-methacryloyloxyethyl phospho-rylcholine-co-ethylhexylmethacrylate (PMEH)] (PLGA/PMEH) to endow with new functionality i.e., to improve the cell-, tissue- and blood-compatibility. The characteristics of surface properties were investigated by measurement of contact angle goniometer, Fourier-transform infrared spectroscopy with attenuated total reflectance (FTIR-ATR) and electron spectroscopy for chemical analysis (ESCA). NIH/3T3 fibroblast and bovine aortic endothelial cell were cultured on control and PLGA/PMEH surfaces for the evaluation of ceil attachment and proliferation in terms of surface functionality such as the concentration of phosphoryl-choline. Also, the behavior of platelet adhesion on PLGA/PMEH was observed in terms of the surface functionality. The contact angles on control and PLGA/PMEH surfaces decreased with increasing PMEH content from 75$^{\circ}$ to about 43$^{\circ}$. It was observed from the FTIR-ATR spectra that phosphorylcholine groups are gradually increased with increasing blended amount of MPC. The experimental P percent values from ESCA analysis were more 3.28∼7.4 times than that of the theoretical P percent for each blend films. These results clearly indicated that the MPC units were concentrated on the surface of PLGA/PMEH blend. The control and PLGA/PMEH films with 0.5 to 10.0 wt% concentration of PMEH were used to evaluate cell adhesion and growth in terms of phosphorylcholine functionality and wettability. Cell adhesion and growth on PLGA/PMEH surfaces were less active than those of control and both cell number decreased with increasing PMEH contents without the effect of surface wettability. It can be explained that the fibronectin adsorption decreased with an increase in the surface density of phosphorylcholine functional group. One can conclude the amount of the protein adsorption and the adhesion number of cells can be controlled and nonspecifically reduced by the introduction with phosphorylcholine group. Morphology of the adhered platelets on the PLGA/PMEH surface showed lower activating than control and the number of adhered platelets on the PLGA/PMEH sample decreased with increasing the phosphorylcholine contents. The amount of fibrinogen adsorbed on the PLGA/PMEH surface demonstrated that the phospholipid polar group played an important role in reducing protein adsorption on the surface. In conclusion, this surface modification technique might be effectively used PLGA film and scaffolds for controlling the adhesion and growth of cell and tissue, furthermore, blood compatibility of the PLGA was improved by blending of the MPC polymer for the application of tissue engineering fields.
Voltage-sensitive ion channels contribute to establishment of the cell excitablity and the generation of the cellular function. At hamster oocytes in the primitive stage during developing process, an inward current elicited by voltage pulses was found to be carried mainly by $Ca^{2+}$. Even at present, $Ca^{2+}$ channels serve as the most probable route to pass this inward current but there is no evidence of the presence of this channels in eggs. To date, both the characteristic properties and the physiological role in the early stage of development remain unclear. Here we examined the characteristic properties of the inward current and changes in this currents at unfertilized oocytes, fertilized zygotes and two-cell embryos using whole-cell voltage clamp technique. The inward current carried reportedly by $Ca^{2+}$ was remained following removing external $Ca^{2+}$ but completely abolished by further replacement of impermeants such as tetramethylammonium ion ($TMA^+$) or $choline^+$ instead of $[Na^+]_0$. Tetrodotoxin did not affect on this inward current remained at $[Ca^{2+}]_0$-free condition. Removal of $Na^+$ ion out of the experimental solution clearly decreased the current. After adding 2mM $Ca^{2+}$ to the $Na^+$-free media, the inward current was restored. Interestingly, this current carried by either $Ca^{2+}$ or $Na^+$ was decreased by the reduction of intracellular $Cl^-$ concentration, or by $Cl^-$ channel blockers such as niflumic acid, DIDS and SITS. When $Cl^-$ concentration was lowered without changes in other ionic components, this inward current was reduced. At fertilized oocytes and two-cell embryos, the inward current carried by $Ca^{2+}$ and $Na^+$ was severely reduced. Also $Cl^-$ component could not be observed. From these results, the inward current is composed of $Ca^{2+}$, $Na^+$ and $Cl^-$ component, suggesting that the channel carrying this inward current is not selective specifically to $Ca^{2+}$. During early stage of development, the voltage-sensitive ion current seems not to contribute essentially to the cell cleavage and differentiation. The loss of $Cl^-$ component after fertilization suggests that $Cl^-$ may play a role in maintaining the viability of unfertilized ova.
경골어류의 혈관평활근에 대한 choline 작동성 조절기작을 규명하기 위한 목적의 일환으로 틸라피아의 배대동맥(dorsal aorta)에 대한 acetylcholine 효과와 이들 효과의 매개에 관여하는 수용체의 subtype에 대한 연구를 수행하였으며 그 결과는 다음과 같다. 1. Acetylcholine은 틸라피아의 배대동맥에 대하여 농도의존적인 혈관수축반응만을 나타내었으며, 이와 같은 반응은 혈관내피세포와 methylene blue에 의해 영향을 받지 않았다. 2. Acetylcholine에 의한 농도의존적인 혈관수축반응곡선은 비선택적인 muscarine 수용체 길항제인 atropine과 선택적인 $M_2$-수용체 길항제인 gallamine의 경우 그 농도가 증가함에 따라 현저하게 오른쪽으로 평행이동되었으나, 선택적인 $M_1$-수용체 길항제인 pirenzepine에 의해서는 고농도($1{\times}10^{-5}$M)에서만 약간 이동되었다. 3. Acetylcholine의 수축효과는 cyclooxygenase 억제제인 indomethacin에 의해 거의 영향을 받지 않았다. 4. Acetylcholine의 혈관수축반응은 calcium제거 생리적 완충용액에서는 거의 소실되었으나, calcium 유입차단제인 verapamil에 의해서는 거의 영향을 받지 않았다. 이상의 실험결과에서 acetylcholine은 틸라피아 배대동맥에 대하여 내피세포와는 무관하게 혈관수축효과를 나타내었다. Acetylcholine에 의한 이 수축은 주로 $M_2$-subtype의 수용체를 매개하며 receptor-linked $Ca^{2+}$ channel을 통하여 유입된 세포질내의 $Ca^{2+}$에 의해 일어난다고 사료된다.
목적: 본 연구에서는 한국관박쥐 망막에서의 시각계를 이해하기 위하여 한국관박쥐의 망막 내 글루타메이트 및 ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA), 아세틸콜린과 같은 중추신경계의 주요 신경전달물질과 수용체, 신경교세포인 뮬러세포의 분포를 분석하였다. 방법: 성체 한국관박쥐의 망막을 대상으로 하였다. 망막을 수직 절편한 다음, 표준면역세포화학법을 적용하였다. 공초점 현미경을 사용하여 면역형광이미지 내 면역반응성을 확인하였다. 결과: 한국관박쥐의 망막에서 글루타메이트에 대한 면역반응성을 나타내는 신경세포들은 주로 신경절세포층에 존재하였다. GABA에 대한 면역반응성을 가지는 신경세포들은 내핵층에 주요하게 분포했으며, GABA의 수용체들은 내망상층에 존재하였다. 아세틸콜린의 면역반응성 신경세포들은 주로 내핵층에 위치하고 있었으며, 니코틴성 아세틸콜린 수용체 각각의 면역반응성들은 대부분 내망상층에 밀집해 있었다. 한국관박쥐의 망막에서 신경교세포 중 하나인 뮬러세포는 신경절 세포층에서 외핵층까지 길게 뻗어 있었다. 결론: 본 연구를 통하여 한국관박쥐의 망막에도 다른 포유동물의 망막에 있는 주요 신경전달물질 및 수용체, 뮬러세포가 존재한다는 것이 밝혀졌다. 이와 같은 연구결과는 한국관박쥐는 조직화된 망막 신경회로를 가지는 기능적 망막을 가지고 있음을 의미한다.
Park, Hyun-Jung;Lee, Mi-Sook;Shim, Hyun Soo;Lee, Gyeong-Ran;Chung, Sun Yong;Kang, Young Mi;Lee, Bae-Jin;Seo, Yong Bae;Kim, Kyung Soo;Shim, Insop
ALGAE
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제31권1호
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pp.73-84
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2016
Marine organisms are frequently used to be harmful and have lower side effects than synthetic drugs. The cognitive improving efficacy of gamma aminobutyric acid-enriched fermented Saccharina japonica (FSJ) on the memory deficient rats, which were induced by trimethyltin chloride (TMT), was investigated by assessing the Morris water maze test and by performing choline acetyltransferase (ChAT), cAMP response element binding protein (CREB), and brain derived neurotrophic factor (BDNF) immunohistochemistry. The neurite outgrowth of Neuro2a cells was assessed in order to examine the underlying mechanisms of the memory enhancing effects of FSJ. Treatment with FSJ tended to shorten the latency to find the platform in the acquisition test of the Morris water maze at the second and fourth day compared to the control group. In the probe trial, the FSJ treated group increased time spent in the target quadrant, compared to that of the control group. Consistent with the behavioral data, these treatments recovered the loss of ChAT, CREB, and BDNF immunepositive neurons in the hippocampus produced by TMT. Treatment with FSJ markedly stimulated neurite outgrowth of the Neuro2a cells as compared to that of the controls. These findings demonstrate that FSJ may be useful for improving the cognitive function via regulation of neurotrophic marker enzyme activity.
To improve the shelf-life of mushrooms, Lentinula edodes GNA01 mushrooms were treated with gel packs containing slow-released chlorine dioxide ($ClO_2$) gas at 5~10 ppm for 5 days at $20^{\circ}C$ and the weight loss rate as well as the changes in pH, color and texture properties of the treated samples were investigated. The weight of the control and $ClO_2$ gas treated samples were decreased slightly, and there were no differences during the storage period. However, the weight of the control changed faster than those of the $ClO_2$ gas treated samples during storage period. The pH in the control and in the $ClO_2$ gas treated samples were decreased during storage period, but the samples treated with 5 and 7 ppm $ClO_2$ gas were the least changed. On the other hand, the samples treated with 10 ppm $ClO_2$ gas showed no difference from the other treatments during 4 days, but the pH was lower than that of the control on the fifth day. The lightness of inside and outside in mushroom were decreased whereas redness and yellowness were increased during storage period. However, color changes in the $ClO_2$ gas treated samples were lower than those of the control. Especially, the samples treated with 5 and 7 ppm $ClO_2$ gas were the least changed. The texture of the mushroom were decreased consistently during storage period. The texture of the control changed faster than those of the $ClO_2$ gas treatments during 5 days. Especially, the samples treated 5 ppm $ClO_2$ gas were the least changed.
이 연구에서는 유기인제 농약으로 인한 acetylcholinesterase와 pseudolcholinesterase의 활성도 변화와 알콜과 유기인제 농약의 상호 작용시 효소 활성도 변화를 비교하고, 임상적으로 쓰이고 있는 가역성 항콜린에스터라제 약물과도 비교하여 여러 항콜린에스터라제 약물의 효능과 알콜 섭취가 콜린에스터라제 활성도에 미치는 영향을 파악하는 것에 이 실험의 목적을 두었다. 남자 대학생 15명을 무작위 추출하여 상박부 정맥에서 채혈하여 혈액중 적혈구내에 존재하는 acetylcholinesterase와 혈장에 존재하는 acetylcholinesterase를 분리하였고 cholinesterase가 acetylcholine을 acetic acid와 choline으로 가수분해한다는 점을 이용하여 각 효소에 acetylcholine을 기질로서 주입한 후 1시간 후 생성된 acetic acid에 의해 변화된 pH를 pH meter로 측정하여 간접적으로 활성도를 알아내는 electrometric method를 이용하여 활성도 변화를 측정하였다. 위 실험 조건에서 가역성 항콜린에스터라제 약물이 유기인제 농약보다 콜린에스터라제 활성도를 감소시켰고, 유기인제로 인한 acetylcholinesterase와 pseudocholinesterase의 활성도 변화는 에탄올 처치시 더욱 현저하게 감소되는 것으로 나타났으며, 콜린에스터라제 활성제인 oxime은 acetylcholinesterase에 대해서는 효소 활성도를 높이지만 pseudocholinesterase의 효소 활성도에는 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.
연구에서는 백삼이나 홍삼의 기억력 개선 효과 연구를 기초로 흑삼의 기억력 개선효과 여부를 판단하고자 scopolamine으로 유도된 시험동물에게 7주간 시료 물질(백삼, WG; 홍삼, RG; 흑삼, BG) 추출액을 투여한 후, 행동학적인 평가 및 뇌 조직 내 malondialdehyde 농도, ChAT 활성 변화를 비교 분석하여 기억력 및 학습능력 손상에 대한 개선효과를 알아보고자 하였다. 수동회피시험에서 BG군과 RG군의 latency time이 scopolamine 투여한 PC군(positive control)에 비해서 유의적으로 길어지는 결과를 나타냈다. 수중미로시험에서도 BG군과 RG군의 scopolamine에 의한 기억 손상이 유의적으로 개선되어 NC군의 escape latency 수준 정도로 낮아짐을 확인할 수 있었다. 또한 probe test에서도 BG군과 RG군에서 장기 기억력 손상이 유의적으로 개선됨이 확인되었다. BG군과 RG군의 뇌조직 ChAT 효소 활성은 PC군에 비해 각각 42%, 71% 수준의 유의성 있는 활성증가를 보였다. 지질 과산화도 malondialdehyde 측정 결과에서 PC군 대비 RG군과 BG군에서 각각 37%, 33% 수준의 유의성 있는 감소를 보였다. 이상의 결과를 요약하면 시험물질 가운데 흑삼의 반복 경구투여는 scopolamine으로 유도된 흰쥐에서 기억력 감퇴를 개선하는 데 가장 효과적인 것으로 사료된다.
This study was conducted to determine the effects of dietary multi-nutritional targeted supplementation according to different growth stages on performance, blood metabolites and carcass characteristics of Korean native Hanwoo steers. Thirty two Hanwoo steers, 6 months of age and weighing $159.2{\pm}24.1\;kg$, were distributed into 2 groups: control group without any supplements, and multi-nutritional targeted supplementation (MNTS) treatment group supplied with wheat bran and catechins (WBC, 8 to 16 months of age), ruminally protected amino acid-enriched fatty acid (RPAFA, 17 to 28 months of age) and ruminally protected choline with vitamin E (RPCV, 22 to 28 months of age), respectively. Average daily gain was not significantly different between the two groups. During the late fattening period, concentrate, rice straw and dry matter intakes were relatively lower in MNTS than in the control group. Rib eye area, back fat thickness and yield index were similar between the two groups. Meat color was relatively lower in MNTS compared with the control group. The appearance rate of high quality grade ($1^{++}$, $1^+$ and 1) tended to be higher in MNTS compared with the control group. Thus, the present results indicate that dietary multi-nutritional targeted supplementation at different growth stages could be recommendable to increase income according to production of high quality Hanwoo beef without any negative effects on growth performance and carcass characteristics.
We checked the presence of phospholipase $A_2(PLA)_2$ which could split the ester bond at the position 2 in the glycerol backbone of glycerophospholipids, in the cells of hyperthermophiles of Pyrococcus horikoshii and Sulfolobus acidocaldarius. The results obtained are as follows; (1). Pyrococcus horikoshii cells were grown in obligate anaerobic conditions at $95^{\circ}C$ and they needed sulfur as energy source instead of oxygen, while Sulfolobus acidocaldarius species grew well in the aerobic medium (pH 2.5) containing yeast and sucrose at $75^{\circ}C$. (2). Pyrococcus horikoshii cells produced phospholipase $A_2$ in the cell culture media although this species did not show lipase activity at least in the pH range of 1.5 ${\sim}$ 3.5. Sulfolobus acidocaldarius cells produced lipase hydrolyzing triacylglycerols such as triolein, but did not split any kind of phospholipids used as substates. (3). The compound of 1-decanoyl-2-(p-nitrophenylglutaryl) phosphatidylcholine was not suitable for a substrate in this experiment, though frequently used as a subtrate for checking presence of phospholipase $A_2$, for its decomposi-tion in this experiment. The L-${\alpha}$-phosphatidylcholine-${\beta}$-[N-7-nitrobenz-2-oxa-1, 3-diazol]aminohexanoyl-${\gamma}$-hexadecanoyl labelled with a fluorescent material, did not show any migration of acyl chains in the molecule during the reaction with phospholipase $A_2$ under a hot condition. (4). Phospholipase $A_2$ in the cells of Pyrococcus horikoshii, showed the optimum activity at $pH6.7{\sim}7.2$ and $95{\sim}105^{\circ}C$, respectively, and was activated by addition of calcium chloride solution. Andthe phospholipase $A_2$ specifically hydrolyzed glycero-phospholipids such as phosphatidyl choline, phosphatidyl ethanolamine, phosphatidyl serine and phosphatidyl inositol, but could not split phospholipid containing ether bonds in the molecule such as DL -${\alpha}$-phosphatidylcholine-${\beta}$-palmitoyl-${\gamma}$-O-hexadecyl, DL-${\alpha}$-phosphati- dylcholine-${\beta}$- oleoyl-${\gamma}$-O-hexadecyl, DL-phosphatidylcholine-dihexadecyl.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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