페기물로부터 얻어지는 보리새우(Penaeus japonicus) 껍질과 단백질이용의 전망성이 좋은 antarctic krill(Euphasis superba)을 시료로 하여, chitin의 산업적 이용을 위한 기초연구로서, 보다 효율적인 chitin의 추출조건을 설정하고, 새로운 방법으로 추출한 chitin들의 물리적, 화학적 성질들을 비교하였다. 본 연구에서 선정된 추출 방법으로 chitin을 추출한 결과 보리새우의 껍질을 출발물질로 한 정제 chitin은 순백색의 powder로 얻어졌으며, 정제 chitin의 질소함량 및 ash함량은 각각 6.64%와 0.4%로 나타났다. krill의 chitin의 경우에는 6.35%의 질소함량과 0.4%의 ash함량을 나타내었다. 고유점도를 측정하여 formic acid 용액계에서 구한 정제 chitin의 분자량은 krill의 경우 $1.56{\times}10^{5}$, 보리새우의 경우 $1.78{\times}10^{5}$, Sigma C 3641이 $0.18{\times}10^{5}$으로 나타났으며, N-acetylglucosamine의 중합도는 krill의 경우 약 750, 보리새우의 경우 약 850이었다. 본 연구의 추출방법으로 정제된 chitin은 비교적 아세틸화도가 큰 것으로 확인되었고, 추출후의 아미노산 잔존량 중에서 methionine이 많이 남아있는 것이 특징으로 나타났다.
우리나라 전남의 전통 발효식품인 토하젓(salt-fer-mented Toha shrimp)은 주 원료인 토하(Toha: Caridina denticulata denticulata $D_{E}$$H_{AAN}$)를 살아 있는 생토하의 껍질(갑각)이 붙어 있는 채로 소금에 절여서 제조하였다. 토하 껍질을 구성하는 토하 chitin이 토하젓의 숙성과정 중 발효에 의해 저분자량의 chitin oligosaccharides 생성이 예상되므로 본 연구에서는 토하젓 숙성과정의 기간별로 토하 chitin 분자량의 감소와 점도 변화 그리고 chitin 분자량 분포를 측정하였다. 토하젓 숙성과정 중 chitin의 점도와 평균 분자량은 숙성기간이 길어짐에 따라 뚜렷히 감소하였다. $10^3의$ 저분자량인 chitin oligosaccharides는 숙성 60일까지는 거의 나타나지 않았으나 숙성 75일 이후부터 6.85% 이상의 많은 양을 보였으며 $10^2의$ 분자량은 숙성 75일 이후부터 생성되기 시작하였다. 이 결과로부터 토하젓의 숙성과정 중 $10^{7}$ 이상 고분자량인 chitin이 가수분해됨에 따라 $10^2과$$10^3의$ chitin oligosaccharides가 생성됨이 확인되었다.다.
Chitin is known as biodegradable natural polymer. In spite of various application of chitin derivatives from waste marine sources, commercial use of chitin has been limited due to high resistance to chemicals and the absense of proper solvents. We chitin prepared through the decalcification, bleaching and deproteination from Protunus trituberculatus shells by change of Hackman's method. Also, Microcrystalline chitin made by hydrolysis that was reduce made of resistance solvents used by dilute hydrochloric acid, ultrasonic and hydrogen peroxide. Crosslinked chitin derivatives were preparaed from chitin with crosslink agents(epichlorohydrin, 1,3-dichloropropanol) follwed by crosslinkage at 6C position. The effects of these parameters on chitin dervatives were invastigated by IR, DSC, XRD, BET, PSA and SEM. SEM analysis showed that both chitin and crosslinked chitin had a particle shaped morphology.
최근 산업적으로 다양한 용도로 응용되고 있는 chitin을 게 껍질로부터 분리하였고 그 특성을 규명하였다. Chitin의 분리는 무기물 제거, 단백질 제거 및 탈색단계를 거쳐 이루어졌으며, 얻어진 chitin은 무기물 함량이 0.5% 이내였고, 단백질과 지방질이 거의 제거된 백색분말이였다. IR 분석결과 Sigma제품과 거의 같은 특성을 나타내었고, 단백질 제거 조건에 따라 chitin의 주요 특성치인 탈아세틸화도와 평균 분자량이 다르게 나타났다. 탈아세틸화도는 Sigma 제품보다 상당히 높았고, 점도평균 분자량은 $2.3{\times}10^5~3.0{\times}10^5$ 범위였다. SEM 분석결과 얻어진 chitin은 fibril 형태를 갖고 있음을 확인하였다.
CM-chitin의 고유특성 및 유동특성을 밝혀 효과적으로 식품산업에 이용하기 위하여 CM-chitin 수용액의 유동특성 중 임계농도와 유동방정식을 조사하였다. 물에서 CM-chitin의 환원농도는 2.5이었으며, 이 때의 임계농도는 $0.8\%(w/v)$이었다. 즉 $0.8\%$ 이하의 농도에서는 분자사슬간 상호작용이 일어나지 않았으며, $0.8\%$ 이상에서 상호작용이 일어나는 것으로 나타났다. $0.5\%$ CM-chitin 용액은 전단속도가 증가하여도 점도는 일정하게 유지되는 뉴우튼 유체의 특성을 보였으며, $1.0\%$ 용액은 전단속도가 증가하면 점도가 낮아지는 의가소성 유체의 특성을 보였다. $3.0\%$ CM-chitin 수용액의 유동상수 $\eta_\infty,\;\eta_0,\;\beta$, n은 각각 $0.0908(\fallingdotseq0.1)cp$, 770cp, 0.81, 0.36이었다. 따라서 $3.0\%$ CM-chitin 수용액의 유동방정식은 $\eta=0.1+\{{770/(1+0.81D^{0.36})\}$으로 나타낼 수 있다.
$\beta$-키틴의 글구코사민 단위에 클로로프로판, 산화프로필렌 및 클로로프로판 디올을 반응시켜 프로필키틴(PPC), 히드록시프로필 키틴(HPC) 및 디히드록시프로필 키틴(DHPC) 등의 $\beta$-키틴 유도체들을 합성하였고 이들을 99% 포름산에 용해시켜 30wt%이상의 고분자용액의 농도에서 액정을 형성시켰다. 액정이 형성된 용액으로 부터 필름을 제조하여 라이소자임이 포함된 유사체액 pH 1.2, pH 6.7, 및 pH 8.2 용액에서 in vitro 분해정도를 관찰한 결과 처음 일주일에서 $\beta$-키틴 유도체들이 $\beta$-키틴보다 급격히 분해되었으며 $\beta$-키틴 유도체들중에서는 DHPC가 가장 좋은 생분해정도를 나타냈다.
Chitin 및 그 유도체(chitosan, glucosamine)의 YPD 배지에서 알콜발효력을 비교한 결과, 대조구에 비하여 모든 첨가구간에서 알콜수율이 높게 나타나는 경향이었으며, 특히 chitin 첨가구간에서 가장 높았다. 타피오카의 알콜발효에 미치는 영향은 chitin 함량 0.9%, 발효 120시간째에 알콜함량 13.6%로 가장 높게 증가되었다 Chitin 첨가는 알콜수율을 증가시키며 acetaldehyde와 methanol 함량 감소 효과가 있는 것으로 나타나, 앞으로 타피오카의 무증자 알콜발효에 chitin의 이용이 상당히 기대된다.
In spite of various applications of chitin derivatives from waste marine sources, commercial use of chitin has been limited due to resistance to chemicals and the absense of proper solvents. We prepared chitin through decalcification, bleaching and deproteination from protunus trituberculatus shells by the application of Hackman's method. Structural and chemical properties of chitin were investigated to have proper specific surface area and particle size by IR, BET and PSA. The amount of absorbed water of chitin reached equilibrium by stirring about 15 minutes. The amount of absored water of the prepared chitin were large than the commercial chitin. When prepared chitin tested on dyeing wastewater, they showed better treatment efficiency in COD, suspended solid, and color tests than the commercial chitin. The adsorption capacity increased with decreasing particle size for the prepared chitin. Treatment efficiency for color was increased as the sitirring rate increased. Results show the possibility of the prepared chitin from waste marine sources as a treatment system for dyeing wastewater.
Chitin is an important structural component of fungal cell wall and is synthesized by chitin synthase I, II, and III. The chitin synthase II is an essential enzyme for the formation of primary septum in Saccharomyces cerevisiae. Therefore, specific inhibitors of this enzyme might block the formation of fungal cell wall and could be used as effective antifungal agents. To search chitin synthase IIinhibitors from natural products, 67 plants were extracted with methanol and examined for the inhibitory activities against chitin synthase II of S. cerevisiae by our cell free assay system. As a result, the extracts from 16 plants showed more than 70% inhibition at the concentration of $280{\;}\mu\textrm{g}/ml$. Of note, Laurus nobilis (81.4%), Lonicera maackii (81.5%), Berchemia berchemiaefolia (82.9%), Koelreuteria paniculata (87.9%), Chamaecyparis pisifera (86%) and Taxus cuspidata (83.9%) inhibited strogly the chitin synthase IIactivity.
CM-chitin은 화장품 분야에서 보습제, 유연제, 피부관리를 위한 세포활성제 및 미백제등으로 다양하게 이용되고 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 CM-chitin제조공정을 기존의 방법에서 몇가지 절차를 배재하여 단순화 하였다. Chitin분말을 NaOH와 혼합하고 16hrs 동안 동결 및 교반을 통해 ClCH2COONa와 isopropyl alcohol혼합액을 첨가하였다. 그 결과 높은 치환도의 CM-chitin을 얻을 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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