전형적인 음이온 교환수지인 Dowex 1-X8 (50∼100메쉬)에 술폰기를 갖는 킬레이트 시약인 8-hydroxyquinoline-5-sulfonic acid (HQS)와 7-nitroso-8-hydroxyquinoline-5-sulfonic acid (NHQS)를 흡착시킨 킬레이트 수지를 사용하여 수용액에 용해되어 있는 Fe(Ⅲ), Cu(Ⅱ), Pb(Ⅱ) 및 Zn(Ⅱ)을 흡착시켜 다른 이온들로부터 분리시키는 연구를 시도한다. 킬레이트 수지의 안정성은 수용액에 공존하는 음이온의 종류, 그 농도 및 액성에 따라 영향을 받으므로 수지사용의 최적조건을 결정하였으며, 수지에 대한 두 킬레이트 시약의 흡착성도 정성적으로 해석하였다. 금속이온의 흡착은 킬레이트 수지에 있는 HWS 및 NHQS와 각 금속이온과의 킬레이트 형성에 의한 것으로 그 흡착력은 각 킬레이트의 안정도상수값과 비례한다. 액성이 PH3∼4 범위에서 HQS-수지의 금속이온의 흡착능은 Fe(Ⅲ):0.63, Cu(Ⅱ):0.82 및 Pb(Ⅱ):0.79 mmol/g이며, NHQS-수지의 경우는 Cu(Ⅱ):1.07 및 Pb(Ⅱ):0.96mmol/g이다. 몇가지 금속이온의 혼합액을 시료로 하여 분리를 시도했다.
The mechanisms of benzene toxicity is not fully elucidated, although the metabolism of benzene is very well understood. In order to study the mechanism of benzene toxicity, we investigated DNA damage induced by benzene metabolite, 1,2,4-benzenetriol (BT) in HL-60 cells by alkaline comet assay. To investigate the mechanism of cellular DNA damage induced by BT, the cells were treated with antioxidant such as vitamin C, SOD, catalase, and chelating agent such as deferoxamine (DFO), bathocuproinedisulfonic acid (BCDS). BT induced DNA damage in dose-dependent manner at concentration between 10$\mu\textrm{m}$ and 100$\mu\textrm{m}$. The antioxidant vitamin C itself induced DNA damage at higher concentration. The DNA damage induced by BT in HL-60 cells was protected at low concentraiton of vitamin C whereas no protective effect was found at high concentration. In hibitory effect of SOD on DNA damage by BT was observed and this suggested that BT produce superoxide anion (O2-) causing DNA damage. Catalase protected BT-induced DNA damage suggesting that BT produce H2O2 during autooxidation of BT. Both Fe(II)-specific cheiating agent, deferoxamine (DFO) and Cu(I)-specific chelating agent, bathocuproinedisulfonic acid (BCDS) inhibited BT0induced DNA damage. This suggested that DNA damage was caused by active species which was produced DAN damage. This suggested that DNA damage was caused by active species which was produced by the autooxidation of BT in the presence of Cu(II) and Fe(III). These findings suggest that reactive oxygen species play an important role in the mechanism of toxicity induced by benzene metabolites.
Bioactive peptides have great potentials as nutraceutical and pharmaceutical agents that can improve human health. The objectives of this research were to produce functional peptides from ovotransferrin, a major egg white protein, using single enzyme treatments, and to analyze the properties of the hydrolysates produced. Lyophilized ovotransferrin was dissolved in distilled water at 20 mg/mL, treated with protease, elastase, papain, trypsin, or α-chymotrypsin at 1% (w/v) level of substrate, and incubated for 0-24 h at the optimal temperature of each enzyme (protease 55℃, papain 37℃, elastase 25℃, trypsin 37℃, α-chymotrypsin 37℃). The hydrolysates were tested for antioxidant, metal-chelating, and antimicrobial activities. Protease, papain, trypsin, and α-chymotrypsin hydrolyzed ovotransferrin relatively well after 3 h of incubation, but it took 24 h with elastase to reach a similar degree of hydrolysis. The hydrolysates obtained after 3 h of incubation with protease, papain, trypsin, α-chymotrypsin, and after 24 h with elastase were selected as the best products to analyze their functional properties. None of the hydrolysates exhibited antioxidant properties in the oil emulsion nor antimicrobial property at 20 mg/mL concentration. However, ovotransferrin with α-chymotrypsin and with elastase had higher Fe3+-chelating activities (1.06±0.88%, 1.25±0.24%) than the native ovotransferrin (0.46±0.60%). Overall, the results indicated that the single-enzyme treatments of ovotransferrin were not effective to produce peptides with antioxidant, antimicrobial, or Fe3+-chelating activity. Further research on the effects of enzyme combinations may be needed.
Wistar rat에 $^{88}SrCl_2$를 꼬리 정맥에 주사하여 체내 기관과 혈액 내 분포, 잔존율을 조사하였고 착화제와 유기산을 투석하여 혈장 단백질에 결합하는 Sr 양의 변화를 측정하였다. 혈액내에서 Sr은 혈장에 60%, 세포에 40% 부착되어 이동하였다. 혈장에 존재하는 Sr 중 약 50%정도는 혈장 단백질과 결합한 상태였고, 세포에는 세포 표면에 가볍게 부착되어 있었다. Erythrocyte나 granulocyte보다 lymphocyte에 많은 양의 Sr이 부착되어 있었다. 투여후 초기 1시간 이내에 혈액 내에서 급격히 감소하여 뼈에 침착되었다. 이때 각 기관에서도 Sr의 잔존율은 24시간 이내에 크게 감소하였고, 뼈로 침착된 Sr은 24시간 이후에 서서히 감소하였다. 착화제 EDTA, EGTA 및 DTPA를 투여한 경우, 혈장 단백질에 결합하는 Sr의 양은 대조군의 57%에서 27-33%로 감소하였으며 citrate 및 oxalate의 투여시는 이 값이 19%와 40%로 각각 감소하였다.
담수 토양인 논토양과 습지 토양에 킬레이팅 에이전트 EDTA를 처리하고 실내시험을 실시한 결과, 두 토양 모두에서 메탄 생산량이 확연히 감소함을 알 수 있었다. EDTA 처리량을 증가시킴에 따라 토양수 내 니켈이 증가하였으며 메탄생성균의 활성은 저감되었다. 메탄생성균의 활성이 저감됨에 따라 메탄 생산량은 현저히 감소하였으며 메탄생성균의 활성과 메탄생성량은 상당히 유의한 상관관계를 지니고 있었다. 이러한 메탄 저감 효과는 EDTA처리에 따라 coenzyme F430의 Ni이 EDTA와 킬레이팅 화합물을 형성함에 따라 분자크기가 증대하게 됨으로서 methyl coenzyme M reductase (MCR)에 의한 메탄을 생성하는 반응을 억제 시키는 것이 원인으로 판단된다. 결론적으로 담수토양에서 EDTA처리에 의해 니켈은 메탄생성균 체내로의 흡수가 억제되었고 이러한 니켈의 흡수저해는 메탄생성균의 활성을 억제시켜 토양으로부터 메탄 생산성량을 저감시킨 것으로 확인되었다.
사람의 혈액으로부터 Elastase를 분리하는 새로운 방법을 개발하여 순도 높은 효소를 얻고 이 효소에 의하여 발생되어지는 질병의 예방과 치료에 응용하기 위하여 이 효소의 근본적인 성질규명을 시도하였다. 정제 방법으로는 Sephodex G-75를 이용한 1회의 액체 크로마토그라피와 HPLC을 이용한 2회의 코마토그라피를 거치는 2단계 방법을 사용하였다. 이때 얻어진 효소는 분자량이 $26,000{\sim}29,700$ 사이에 있는 3개의 다른 분자량을 가진 물질로 확인되었으며, 항체 반응에서 사람의 결구내 Elastase의 특성을 나타내었다. 함유하고 있는 미량의 금속이온을 분석한 결과 정제하는 단계에 따라 Zn 이온의 효소분자에 대한비는 증가하였으며 가장 순수한 분자내의 효소분자와 Zn 이온과의 비는 1 : 2였다. 이 효소는 chelating agent에 의하여 활성도를 잃게 되었으며, 반대로 chelating agents에 의하여 활성도를 잃고 있는 반응 medium에 그 chelaing agents의 농도를 초과하는 2가 이온 즉 Zn 이온, Ca 이온, 그리고 Mn 이온을 넣으면 그 활성도는 원상복귀되나 Mg이온에 의하여는 그 활성도가 원상회복 되지 않았다. 이 모든 성질을 종합하면 사람의 Neutrophil granule에 있는 Elastase는 지금까지 알려진 바와 같이 Serine pretense임과 동시에 metalloenzyme으로 제고되어야 한다고 제안한다. 나아가서chelating agents에 의하여 이 효소의 활성도를 조정할 수 있다는 것은 이 효소에 의하여 일어나는 질병의 치료에 응용할 수 있는 가능성도 보여준다.
실리콘계 태양전지 제조과정에서 발생하는 불량품에서 실리콘웨이퍼를 회수하는 연구를 수행하였다. 상온($25^{\circ}C$)에서 인산용액 농도, 산성불화암모늄 농도, 킬레이트제 종류 및 농도를 변화시키면서 폐태양전지의 반사방지막 및 N층의 제거 효율을 조사하였다. 10 wt% 인산, 2.0 wt% 산성불화암모늄, 1.5 wt% Hydantoin 사용 시 제거 효율이 가장 우수 하였다. 인산농도가 증가할수록 미세입자의 표면전위가 (+)로 변하여 정전기적 인력에 의해 실리콘웨이퍼 표면에 재흡착하여 표면처리 전보다 두께가 두꺼워졌으며, 표면의 오염도도 증가하였다. 인산-산성불화암모늄-킬레이트제 용액에 의한 표면처리방법은 모든 공정이 상온에서 수행되며, 공정이 단순하고, 폐수 발생량이 적고, 표면제거 효율이 우수한 방법으로 폐 태양전지의 재활용 및 기존 RCA 세정법의 대안으로 가능성이 매우 클 것으로 판단되었다.
XAD-16-Chromotropic acid (CTA)형 킬레이트 수지에 대한 몇 가지 금속이온의 흡착특성을 뱃치법과 용리법으로 조사하였다. pH 변화에 따른 금속 이온의 흡착율을 조사한 결과 pH 3.0 ~ 6.0에서 Hf(IV), Zr(IV), Th(IV) 이온이 다른 금속 이온들에 비해 높은 선택성을 보였으며, Zr(IV)의 최대흡착용량은 0.81 mmol/g이었다. 가리움제로서 CDTA, EDTA, NTA 및 $NH_4F$ 등을 사용하여 흡착에 미치는 영향을 조사한 결과 혼합 금속 용액으로부터 몇 가지 희토류 금속 이온들의 분리가 가능함을 알 수 있었다. 킬레이트 수지에 대한 몇 가지 금속 이온들의 흡착거동을 용리법으로 조사 검토한 결과 pH 4에서 돌파점 용량과 총괄 용량으로부터 얻은 금속 이온의 용리 순서는 Zr(IV)>Th(IV)>Hf(IV)>U(VI)>Cu(II)>In(III)>Pb(II) 이었다. 한편 HCl, $HNO_3$, $HClO_4$ 등의 탈착제에 의한 탈착 특성을 조사한 결과 2 M HCl에서 높은 탈착효율을 나타내었다. XAD-16-CTA 킬레이트 수지는 혼합 금속이온 중에 함유된 Th(IV) 이온의 선택적 분리 및 회수에 유용함을 알 수 있었다.
A thennostable chitosanase was purified from Bacillus sp. KFB-C108, by fractionation of 30 to 70% saturation with ammonium sulfate, DEAE-Toyopearl chromatography, Butyl-Toyopearl chromatography, and TSK-Gel HW-55F gel filtration. The purified enzyme showed a single band on sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, and the molecular weight was estimated to be 48 kDa. The enzyme degraded soluble chitosan and colloidal chitosan, but did not degrade glycol chitosan, chitin, and the other compounds investigated. There was no effect on the chitosanase activity by treatment with chelating agents, alkylating agents, and various metals investigated, and only cobalt ions inhibited the activity. Optimum temperature and pH were $55^{\circ}C$ and 6.5, respectively. The enzyme was stable after heat treatment at $80^{\circ}C$ for 10 min or $70^{\circ}C$ for 30 min and fairly stable in several organic solvents as well. Chitosan was hydrolyzed to $(GlcN)_4$as a major product by incubation with the enzyme.
This study was carried out to investigate the effect of Pine needle extract on lipid oxidation and free radical reaction in iron sources reacted with active oxygen species. The results were summarized as follow; The pine needle extracts didn`t show a distinct effect on reduction of lipid oxidation if the iron ion didn`t exist in oil emulsion. The pine needle extracts played role as a strong chelating agents to bind iron ion if Ferrous iron(Fe\ulcorner) exist in oil emulsion. Ferric iron(Fe) was lower effect than Ferrous iron(Fe) on free radical reaction in oil emulsion. And also, the Fe\ulcorner reacted with pine needle extract did not show distinct effect on free radical reaction, compared to Fe\ulcorner reacted with pine needle extract. And also, Pine needle extracts reacted with H\ulcornerO\ulcorner were tended to show a low oxygen scavenging ability in case of H\ulcornerO\ulcorner only was existed, compared to those of H\ulcornerO\ulcorner + Fe\ulcorner complex. Pine needle extracts were the most powerful Fe\ulcorner binding agents, compared to other strong synthetic antioxidants such as EDTA and DTPA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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