임플란트 식립 시 가장 빈번하게 맞게 되는 문제점으로 임플란트 식립 부위에서의 불충분한 골량과 해부학적 구조에 의한 접근성의 문제를 들 수 있다. 일반적으로 성장 인자들은 치유 과정이나 조직 형성에 있어서 가장 기본적인 필수 요소로 인정되고 있다. 이러한 이유로 골 이식 재료의 효과를 증진시키기 위한 성장 인자들이 최근에 주목을 받고 있다. 혈소판 내 granules에는 높은 농도의 다양한 성장 인자들이 포함되어 있다. 특히, platelet-rich fibrin (PRF)는 2세대 혈소판 농축 인자로 항응고제가 들어있지 않은 상태로 얻을 수가 있고, 혈소판과 많은 성장 인자들이 풍부한 섬유소 막을 포함하고 있다. 이번 연구의 목적은 in vitro 상에서 골아 세포에 대한 PRF의 영향을 알아보고자 하였다. 특히 치유와 재생에 연관된 주요 기능으로써 증식과 분화에 대한 영향을 조사하고자 하였다. 이를 위해서, PRF 내에서 방출되는 성장 인자(platelet-derived growth factor subunit B와 transforming growth factor-${\beta}1$)의 농도, 세포의 생존능력, alkaline phosphatase (ALP) activity, type 1 collagen 합성, 골아 세포의 분화 지표로써 ALP와 Runx2의 발현 정도와 골 기질 단백질로써 type 1 collagen의 발현 정도에 대해서 조사하였다. 이 실험을 통하여 PRF는 치유 시 필요한 타당한 기간 동안에 충분히 자가 성장 인자의 방출을 유지하고 있음을 알 수 있었고, 골아 세포의 증식과 분화에 대해서 긍정적인 효과가 있음을 보여 주였다. 제한적인 실험이지만, 골재생을 위한 PRF의 사용은 골 치유와 골 개조에 있어서 증진 효과를 가져다줄 수 있는 촉망되는 방법 중 하나가 될 수 있을 것이다.
Proplast and Porous Polyethylene which have porous structures as low-modulus polymers have been recently used in maxillofacial plastic and reconstructive surgery. The purpose of this study was to compare the response of adajacent tissue, new bone formation and stability after augmentation by differen methods of subperiosteal graft using proplast and purous polythylene in rabbit mandible. The augmentation procedure was carried out by dividing into two groups, A and B. A group consisted of subperiosteal graft on the cortex, and the other B group was made up only graft following artificial decortication in the mandibular body of rabbit. The experimental animals were sacrificed on the 1st, 2nd, 4th and 8th week after grafting for macroscopic and light microscopic examination. The samples extracted at the 6th postgrafting week were also used for biometric testing and scanning electron microscopic examination. The results obtained from this study were as follows : 1. Macroscopically, infection of graft site, deformation and migration of graft material were not observed in all experimental groups. 2. B group showed more rapid and increased bone formation and the greater stability than A group, and tissue response was similar to each other. 3. In the tissue response, macrophages and cellular infiltrations were observed in Proplast group, but few in PHDPE group. 4. In bone formation of A group, Proplast group showed no bone formation until the 8th week, but PHDPE group showed small quantity of osteoid tissue from the 2nd week and appositional bone growth with new bone formation at the 8th week. 5. In bone formation of B group, both Proplast and PHDPE group showed bone formation, but PHDPE group showed more rapid and larger bone formation. 6. In pattern of bone formation, Proplast group mainly showed appositional bone growth pattern connected with graft site. On the other hand, PHDPE group showed mixed pattern of new bone formation in the pore connective tissue with appositional bone growth from graff site. 7. The maximum mean values of shear stress were serially $111.3gf/mm^{2}$ in PHDPE of B group, $84.8gf/mm^{2}$ in PHDPE of A group, $32.9gf/mm^{2}$ in Proplast B group, and $15.7gf/mm^{2}$ in Proplast of A group. From above results, It was suggested that the capacity of bone formation and stability between bone and graft material were dependent on the pore size and structure of graft material itself, the state of graft site and tissue response.
클로로필의 광산화에 미치는 $\beta$-카로텐과 비타민 C의 역할을 linoleic acid emulsion 모델 시스템과 피부조직 균질액을 이용하여 조사하고 이와 더불어 각각의 성분들의 조합시 일어나는 변화를 살펴보았다. Linoleic acid emulsion 모델 시스템에서 클로로필과 $\beta$-카로텐은 고농도에서 자외선 H에 의한 광산화를 촉진시키는 것으로 나타났으며 고농도의 비타민 C는 이를 억제시켰다. 갓김치에 함유되어 있는 클로로필, $\beta$-카로텐, 비타민 C 농도를 참고하여 이들을 조합하였을 때 자외선 B에 의한 광산화를 억제시켰으며 $\beta$-카로텐의 경우 단독으로 사용되었을 때에는 산화를 촉진하였으나 다른 항산화성분들과 함께 사용될 경우 항산화활성을 나타내었다. ICR mouse의 피부조직 균질액에 클로로필, $\beta$-카로텐, 비타민 C를 단독 또는 혼합하여 첨가하였을 때 클로로필 a, b 및 $\beta$-카로텐의 첨 가는 광산화를 가속화시켰다. 비타민 C의 경우 50 ppm을 첨가하였을 때에는 아무런 효과를 나타내지 않았으나 500 ppm을 첨가하였을 때에는 자외선 B에 의한 광산화를 효과적으로 억제시켰다. 500 ppm의 비타민 C에 클로로필과 $\beta$-카로텐을 혼합하였을 때에도 광산화가 억제되었으며 비타민 C의 농도가 중요하게 작용하였다.
The modulation of leukocyte cell surface adhesion molecules may influence the development of cellular events that determine the course of the inflammatory process. Direct interaction between activated T cells and monocytes resulted in a large production of $IL-1{\beta}$ by monocytes. In this reactions, adhesion molecules play an important part, yet the role of them in Tmonocytes interaction remain unclear. This study was undertaken in an effort to elucidate, 1) the influence of 1.25(OH)$_2D_3-induced$ differentiation on the monocyte responsiveness to direct contact with T lymphocytes, and 2) the role of adhesion molecules on the T-monocyte direct interaction. Initially, I observed that direct contact of monocyte cell line THP-1 with stimulated fixed T cell line HuT78 markedly induces IL-1${\beta}$ production by THP-1. $IL-1{\beta}$ production was higher when THP-1 had been previously exposed to 1.25(OH)$_2D_3$ as compared to control, with ${\alpha}$- 1.25(OH)$_2D_3$ dose-dependent and exposure time-dependent manner. It was shown that 1.25(OH)$_2D_3$ also increased the expression of ${\beta}_2$ integrin adhesion receptor Mac-1(CD11b/CD18) dose- and timedependently, but did not increase the expression of human leukocyte antigen- D(HLA-D) and intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1). The $IL-1{\beta}$ producing activity of THP-1 cells correlated well with the ability to induce the Mac-1 expression on THP-1 surface. Monoclonal antibody raised against relevant cell surface glycoproteins on THP-1 were tested for their ability to block the response of THP-1 to T cells. Antibody to Mac-1 only partially blocked $IL-1{\beta}$ production by THP-1, whereas antibodies to ICAM-1 and HLA-D did not. These data indicate that regulation of Mac-1 expression on THP-1 cells can alter the responsiveness of these cells to contact by activated T cells, however other unknown structures on the THP-1 cells may be involved in this process also.
선천성 면역은 숙주의 물리적 방어벽을 뚫고 침입하는 감염성 질병 원인균에 대항하는 첫 번째 방어로서 아주 중요한 역할을 한다. Mannose-binding lectin (MBL 또는 mannan-binding protein, MBP)은 혈청 내에 존재하는 면역성 단백질로서 감염 후 즉시 유발되는 acute phase response의 특정 단백질이다. MBL 단백질은 세균, 바이러스, 곰팡이, 기생충 등의 탄수화합물 구조에 결합하여 식균 작용을 돕거나 보체경로를 활성화 시킨다. MBL 단백질은 C-말단이 탄수화물을 인식하는 도메인이며, 연결 목 부위와 콜라겐 부위로 구성되어 있다. 혈청 내의 MBL 농도가 낮으면 높은 빈도로 면역결핍현상이 관찰된다고 알려져 있다. MBL 단백질의 기능과 유전에 대해 많은 연구가 되어져 왔으나 아직 MBL 단백질 복합체 등에 대한 연구는 많이 이루어져 있지 않다. 따라서 MBL 연구에 필수적인 MBL cDNA 제조와 재조합 단백질의 합성, 그리고 재조합 단백질을 항원으로 사용하여 polyclonal antibody를 생산한 연구 결과를 보고하는 바이다. 본 연구결과로 획득한 MBL cDNA, 재조합 단백질과 anti-MBL 항체는 앞으로의 MBL 연구에 절대적으로 필요한 도구가 될 것으로 생각된다.
We are generally interested in the analysis, detection and prediction of structural motifs in proteins, in order to infer compatibility of amino acid sequence to structure in proteins of known three-dimensional structure available in the Protein Data Bank. In this context, we are analyzing some of the well-characterized structural motifs in proteins. We have analyzed simple structural motifs, such as, ${\beta}$-turns and ${\gamma}$-turns by evaluating the statistically significant type-dependent amino acid positional preferences in enlarged representative protein datasets and revised the amino acid preferences. In doing so, we identified a number of ‘unexpected’ isolated ${\beta}$-turns with a proline amino acid residue at the (i+2) position. We extended our study to the identification of multiple turns, continuous turns and to peptides that correspond to the combinations of individual ${\beta}$ and ${\gamma}$-turns in proteins and examined the hydrogen-bond interactions likely to stabilize these peptides. This led us to develop a database of structural motifs in proteins (DSMP) that would primarily allow us to make queries based on the various fields in the database for some well-characterized structural motifs, such as, helices, ${\beta}$-strands, turns, ${\beta}$-hairpins, ${\beta}$-${\alpha}$-${\beta}$, ${\psi}$-loops, ${\beta}$-sheets, disulphide bridges. We have recently implemented this information for all entries in the current PDB in a relational database called ODSMP using Oracle9i that is easy to update and maintain and added few additional structural motifs. We have also developed another relational database corresponding to amino acid sequences and their associated secondary structure for representative proteins in the PDB called PSSARD. This database allows flexible queries to be made on the compatibility of amino acid sequences in the PDB to ‘user-defined’ super-secondary structure conformation and vice-versa. Currently, we have extended this database to include nearly 23,000 protein crystal structures available in the PDB. Further, we have analyzed the ‘structural plasticity’ associated with the ${\beta}$-propeller structural motif We have developed a method to automatically detect ${\beta}$-propellers from the PDB codes. We evaluated the accuracy and consistency of predicting ${\beta}$ and ${\gamma}$-turns in proteins using the residue-coupled model. I will discuss results of our work and describe databases and software applications that have been developed.
Nebulin is a giant ($600{\sim}900$ kDa), modular sarcomeric protein proposed to regulate the assembly, and to specify the precise lengths of actin filamints in vertebrate skeletal muscles. Recently, There is an evidence that the nebulin also expressed in non muscle tissue, brain and liver. We identified a new isoform of nebulin from adult brain library by PCR screening. It contains two simple-repeats exon 165, 166 and linker-repeats exon $154{\sim}161$ except exon 159. The nebulin modules M160 to M170 (exon 150 to exon 161) has been shown to bind desmin. In mature striated muscle, desmin intermediate filaments surround Z-discs and link individual myofibrils laterally at their Z-discs and to other intracellular structures, including the costameres and the intercalated discs of the sarcolemma, sarcoplasmic reticulum, mitochondria, T-tubules, and nuclei. Therefore, it is an interesting possibility that the differential splice pathways within the linker region of nebulin modify the affinity of nebulin's interaction with desmin. The specific interactions of nebulin and desmin were confirmed in vivo by yeast two hybrid experiments. To verify in the cellular level the interaction between nebulin isoform and desmin, we transfected COS-7 cell with EGFP-tagged nebulin and DsRed-tagged desmin. Based on evidence showing that despite exon 159 was deleted, the new isoform of nebulin was interact with desmin. This suggest that nebulin in brain may interact with another intermediate filament. The conservation of these ligand-binding capacity in brain and skeletal nebulins suggest that nebulins may have conserved roles in brain and skeletal muscle.
cis-Dichlorodiammineplatinum (II) (cis-Platin), a metallic compound, has widely been used as an effective anticancer chemotherapeutic agent. The precise mechanism of action of this agent is still unknown, but it is postulated that cis-Platin may act on the cancer cell like bifunctional alkylating agents. Although this agent is very beneficial to the patients with cervical cancer, germinoma of testis, neuroblastoma and others, it may also damage to the normal cell so that many side effects; severe hemorrhagic enterocolitis, bone marrow depression, renal damage and liver damage will develope. This experiment has been undertaken to pursue the cytotoxic effects of the cis-Platin on the ultrastructures of the interalveolar septum in the mouse lung. A total of 55 healthy male mice of ICR strain were used as experimental animals and divided into 5 mice of normal control group and 50 mice of cis-Platin treated group. The mice of cis-Platin treated group were sacrificed by carotid exsanguination at 6, 12, 24 hours, 3 days and 7 days after intraperitoneal injection of 6.0 mg of cis-Platin ($Abiplatin^R$ Abic Co. Ltd.) per kg of mouse body weight. The specimen obtained from the lower lobe of left lung were sliced into $1mm^3$ and prefixed with 2% glutaraldehyde -2.5% paraformaldehyde solution prepared with Millonig's phosphatae buffer solution (pH 7.4) at $4^{\circ}C$ for 3-4 hours. After postfixation with 1% osmium tetroxide solution all specimens were embedded in Epon 812. Ultrathin sections about $600-800{\AA}$ in thickness were stained with uranyl acetate and lead citrate and observed with Hitachi-600 electron microscope. The results obtained were as follows: 1. Local swellings with increase of electron density and number of pinocytic vesicles in the cytoplasms of the type I pneumocyte and endothelial cell of the blood air barrier in interalveolar septum of cis-platin treated mice were observed. 2. Cisternae of rough endoplasmic reticulum were dilated and sacculated in association with detachment of membrane bound ribosomes of the type II pneumocyte in interalveolar septum of cis-Platin treated mice. 3. Swollon mitochondria with uneven electron density of their matrix were observed in the type II pneumocyte of interalveolar septum in the cis-Platin treated mice. 4. The lamellae of lammelar bodies in type II pneumocyte of interalveolar septum in cis-Platin treated mice were devoided or transformed into homogeneous electron dense material. It is consequently suggested that cis-Platin would induce the cellular edema of type I pneumocyte and endothelial cell, and degenerative changes of cytoplasmic organelles of the type II pneumocyte in the interalveolar septum of the mouse lung.
대수증식(代數增殖) 중기(中期)의 S. cerevisiae에 $2{\times}10^{-3}M$의 paraquat를 처리(處理)하여 균체(菌體) 증식(增殖), 균체(菌體)의 일반적(一般的)형태 및 미세구조(微細構造)에 미치는 영향을 검토하였다. 균체(菌體)의 증식(增殖)은 Paraquat 처리(處理) 후(後) 조해(阻害)되기 시작하여 처리(處理) 6시간(時間) 이후(以後) 완전(完全)히 조해(阻害)되었다. 이 기간동안 탁도(濁度)는 0. 1에서 3.6으로, 건물(乾物) 중량(中量) 1ml당 2.75mg으로부터 3.35mg으로, 총균수(總菌數)는 ml당2 $1.14{\times}10^8cell$로부터 $2.15{\times}10^8cell$로 증가(增加)되었으나 6시간(時間) 이상(以上) 처리시간(處理時間)이 길어짐에 따라 역(逆)으로 감소되었고 사균율(死菌率)은 초기의 0.28%로부터 6시간(時間)째에는 5%, 12시간(時間)째에는 72%로 계속 증가(增加)되었다. Paraquat 처리(處理)에 의하여 균체(菌體)의 크기가 균일(均一)치 못하게 되었으며 세포벽(細胞壁)의 두께가 $0.15{\mu}m$(대조구(對照區) $0.20{\mu}m$)로 얇아지는 반면에 외측(外側)의 전자(電子)밀도가 높아졌으며 12시간(時間) 이상(以上)의 처리(處理)에 의하여 원형질막(原形質膜) 및 mitochondria와 같은 내막구조(內膜構造)가 와해되었다.
본 연구에서는 수박 덩굴(잎 및 줄기) 추출물 및 용매 분획물의 미백 및 항염 활성을 검색하고 유효성분을 분리하여 화학구조를 규명하였다. 수박 덩굴 에탄올 추출물 및 용매 분획물의 멜라닌 생성 억제활성을 측정한 결과, 헥산 및 에틸아세테이트 분획물에서 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 확인하였다. 또한 항염 활성측정 결과, 헥산 및 에틸아세테이트 분획물에서 활성이 나타남을 확인하였다. 헥산 및 에틸아세테이트 분획물에서 유효성분을 찾고자 칼럼 크로마토그라피를 실시하여 3개의 화합물을 분리하였으며 $^1H$ 및 $^{13}C$ NMR 데이터 분석 및 문헌치 비교를 통하여 화학구조를 동정하였다; ${\alpha}-linolenic$ acid (1), sigmast-7-en-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (2), 1-feruloyl-${\beta}$-D-glucopyranoside (3). 분리된 화합물에 대한 미백 활성 실험 결과, 화합물 1과 3에서 멜라닌 생성 및 세포 내 티로시나제 효소의 활성을 감소시키고 있음을 확인하였다. 또한 항염 활성 실험 결과 화합물 1과 3이 nitric oxide (NO) 및 전염증성 사이토카인($TNF-{\alpha}$, IL-6)의 생성을 억제시킴을 확인하였다. 이상의 연구 결과를 바탕으로 수박 덩굴 추출물을 이용한 천연 미백 및 항염 소재로의 개발이 가능할 것이라 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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