당근 검은잎마름병을 일으키는 Alternaria dauci의 병원성 검정을 위해서는 양과 질이 우수한 포자를 형성할 수 있는 조건의 표준화가 필요하다. 따라서 본 실험에서는 배지의 종류, 통기 처리, UV 처리 등이 A. dauci KACC42997의 포자 형성에 미치는 효과를 조사하였다. A. dauci KACC42997은 25℃, 암 상태의 PDA 배지에서 7일간 전배양하였다. 배지 상에 나타난 병원균의 공중 균사를 제거하고, 20℃에서 통기 처리와 12시간 주기의 UV 처리를 동시에 실시하며 5일간 배양하였을 때, 가장 많은 포자를 형성하였다. 확립 포자 형성 조건에서 평창, 구미, 제주 등 당근의 주요 재배지역에서 분리한 170개의 다양한 A. dauci 균주가 포자를 형성하는지의 여부를 확인한 결과, 20개 균주가 포자를 형성하지 못하였고, 88.2%의 균주는 포자를 형성하였다. 또한 지역 균주 집단 간의 포자 형성량에는 차이가 있었지만, 당근에 대한 병원성에는 차이가 없었다.
배지상에 여과지를 덮어놓는 간단한 물리적 처리가 체세포배의 발생 및 발아에 미치는 영향을 밝히기 위하여 본 실험관찰을 수행하였다. 배지상에 덮어놓은 세장의 여과지위에서 일주일 동안 당근 자엽절편을 배양한 후 MS 기본배지에 계대배양을 하면 여과지 덮개 없는 배지에서의 체세포배발생 보다 2배에서 39배의 배발생을 나타내었고, 체세포배의 성숙 및 발아도 증진되었다. 배지상의 여과지에 배양액을 첨가한 다음 배양을 하면 여과지에 배양액을 첨가하지 않은 경우보다 배발생이 감소되었다. 그러므로 여과지덮개는 자엽절편을 치상한 배양환경의 습기를 변화시켜 체세포배의 발생을 증진시킨 것으로 생각된다.
Agrobacterium rhizogenes의 Ri t-DNA로 형질전환된 당근의 모상근에 Glomus sp.를 감염시킨후 arbuscular 균근균 포자를 Modified Strullu & Romand 배지상에서 12주 동안 기내증식하였다. 기내증식을 위한 접종원으로는 포자보다는 균근감염 뿌리가 더 좋았다. 당근 모상근과 arbuscular 균근균의 대치배양으로 증식된 Glomus sp.의 포자는 직경 약 $50{\mu}m$정도의 원형 또는 타원형의 포자로서 균사의 중간부위에서 형성되었다. 12주 동안 기내에서 대치 배양한 결과 plate 당 약 1,200개 정도의 arbuscular 균근균 포자를 생산하였다.
International Journal of Clinical Preventive Dentistry
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제14권4호
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pp.216-221
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2018
Objective: In this study, we tried to investigate the antimicrobial activity of natural herbaceous plant-derived essential oils against oral disease-causing bacterial strains and establish the scientific evidences to apply them to the dentifrice, mouthwash, and other uses. Methods: We used the disk diffusion method with 23 types of 100% natural essential oils to verify the antimicrobial effect against Streptococcus mutans, Porphyromonas gingivalis, and Lactobacillus rhamnosus. After adhering to the surface of the plate culture medium, $20{\mu}l$ of the essential oil was prepared, and the diameter of the transparent ring was measured after incubation for 24 hours. All the experiments were repeated three times. Results: Among 23 types of oils, 13 were effective against all three strains: myrrh, ginger, basil, carrot seed, tea tree, patchouli, ylang ylang, cypress, lemongrass, cinnamon, peppermint, lavender, and eucalryptus. Seventeen oils were effective against S. mutans, and myrrh, basil, and carrot seed showed high antimicrobial activity. Eighteen oils were effective against P. gingivalis, and tea tree, carrot seed, and cinnamons showed high antimicrobial activity. Sixteen oils were effective against L. rhamnosus, and carrot seed and peppermint cinnamon showed high antimicrobial activity. Conclusion: Consequently, 13 essential oils showed the antimicrobial activity against three bacterial strains, which indicates these essential oils might be used as the effective materials to suppress the growth of oral-disease inducing microorganisms. Moreover, essential oils that have been analyzed activities in this study will be mixed up within the constant range and analyzed their antimicrobial effects to examine the synergistic activity among them.
발아를 위한 MS 액체배지에서 체세포배를 1주일간 배양하다가 고형배지로 옮겨 배양하면 92%가 발아하지만 액체배지 배양기간이 길어지면 발아율이 낮아져서 4주간 배양 후 고체 배지로 옮기면 26% 밖에 발아하지 않았다. 액체배지에서 발아처리된 체세포배는 배축과 유근의 생장은 충실하게 일어나데 일부에서는 배축에 2차배가 발생되거나 배축과 유근 기부에서 캘러스가 형성된 경우도 있었다. 주사전자현미경에 의한 관찰 결과 경정분열조직을 이루고 있는 세포는 엉성하게 배열되어 있고 제1엽원기가 발생된 경우 그 구조가 충실하지 못하여 생장이 중단되어 있으며 엽원기의 발생이 않된 경우도 있었다. 그러므로 액체배지에서 체세포배의 발아가 억제된 원인은 경정분열조직의 구조적 결함으로 경엽부 형성이 일어나지 못하기 때문으로 사료된다.
To produce an artificial fruiting body of Armillaria mellea on the oak sawdust medium, seven strains of A. mellea were used. The top surface of oak sawdust medium covered with ground raw carrot was inoculated with each of 7 strains and cultured for 30 days at $25^{\circ}C$ in the dark condition until the mycelia of A. mellea completely colonized the medium from top to bottom. Then, the mycelia which were fully covered on the top surface of the medium were scratched slightly with a spatula and filled with tap water for 3 hours. To induce the primordial formation, the 7 strains of A. mellea were transferred to the growth chamber under the illumination (350 lux) of 12 hours and relative humidity of $85{\pm}5%$ in a day and then cultured at $16{\pm}1^{\circ}C$. Only A. mellea IUM 949 could form primordia on the sawdust medium, but the other strains did not make primordia at the same condition. The primordia of A. mellea IUM 949 were formed 10 days after complete colonization of the medium and the fruiting bodies were produced 7 days after a primordial formation. The experimental results suggested that IUM 949 strain might be a good candidate for mass production of fruiting bodies of A. mellea.
당근 세균잎마름병을 일으키는 Xanthomonas hortorum pv. carotae는 당근 생산량에 큰 피해를 주는 병 중 하나로 국내에서 아직 방제에 대한 연구가 미흡한 실정이다. 본 연구에서는 당근 세균잎마름병균에 효과적인 농약을 선발하기 위하여 3종의 항생제 streptomycin, oxolinic acid, kasugamycin, 2종의 구리제 copper hydroxide, copper sulfate basic 그리고 길항근권세균 Burkholderia gladioli MRL408-3, Pseudomonas fluorescens TRH415-2, Bacillus cereus KRY505-3을 선정하여 인공배지를 이용하여 이들의 직접적인 항균효과를 조사하였다. 이 중 항생제 streptomycin, oxolinic acid와 길항미생물 MRL408-3을 처리한 배지에서 억제환이 형성되었다. 당근 잎에 농약과 항균효과를 보였던 길항미생물 MRL408-3을 전처리한 후 당근 세균잎마름병균을 접종하였더니 streptomycin과 oxolinic acid을 전처리한 당근 잎에 높은 방제효과를 보였다. 이들 당근 잎 표면의 장방출주사현미경 이미지에서 streptomycin과 oxolinic acid를 전처리한 잎에서는 세균 수가 무처리한 잎과 비교하여 급격히 감소하였다. 이들 결과를 통해 streptomycin과 oxolinic acid와 같은 항생제가 다른 약제에 비해 방제 효과가 뛰어나다는 것을 알 수 있었다. 본 연구는 당근 세균잎마름병에 대한 이상적인 방제 시스템을 구축하는 데 도움이 되는 자료로서 가치가 있을 것으로 생각된다.
Shin, Hye Young;Kim, Gi Hoon;Kang, Sang Jae;Han, Jeung-Sul;Choi, Cheol
Journal of Plant Biotechnology
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제44권4호
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pp.388-393
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2017
We report an Agrobacterium-mediated transformation procedure optimized for 'Kyoho' that is a major table grapevine cultivar in Korea, and its transgenic plants with antifreeze protein gene of carrot (DcAFP). The full length of DcAFP coding region in accordance with the previous report was isolated from young leaves of carrot and recombined into a plant transformation vector. Ethylene inhibitors such as silver nitrate and aminoethoxyvinylglycin (AVG) supplemented in a co-cultivation medium distinctly increased frequency of shoot regeneration when explants were sub-cultured in a selection medium: particularly ten-fold higher in treatment with 0.1 mg/L AVG than one without ethylene inhibitor. Among various antibiotics and their concentrations, the combination of 150 mg/L cefotaxime plus 150 mg/L $Clavamox^{TM}$ was selected for elimination of Agrobacterium cells in addition to minimization of adverse effect on shoot regeneration, while 50 mg/L kanamycin monosulfate effectively suppressed regeneration of non-transgenic shoots. Applying the elucidated culture condition, we finally obtained a total of 5 transgenic 'Kyoho' plantlets with DcAFP, of which integration with the grapevine genome and transcription was confirmed by nucleic acid analyses.
Effects of the special media on the mycelium growth in Agaricus campestris were studied. The results might be summarized as follows: 1. The mycelium growth fo Agaricus campestris were scarecely stimulated on the Peptone basal medium which was added 0.5gr. of Peptone and Dextrose basal medium which was added 1.5gr. of dextrose during the culture for 144 hours. 2. The mycelium of Agaricus campestris on the media which was added the several kinds of vegetable extracts showed a considerable growth for 144 hours. The order is as follows; Carrot-basal medium(4ml./100ml.)>Tomato-basal medium(2ml./100ml.)>Spinach-basal medium(3ml./100ml.). However, the spinach-basal medium among these three media were no significant difference.
These studies were carred out to obtain the transformant from tobacco cells by Agrobacterium spp. from crown gall and soil at the natural field in Korea, and identified their virulence. Kodo's and Clark's selective media were used for isolation of Agrobacterium spp. In these media, total of 99 strains were characterized based on the morphological characteristics of colonies. Among them 34 strains were able to induce on carrot discs. And hypervirulent strains C23-1 and K29-1 were identified as Agrobacterium tumefaciens biotype 1 and biotype 2, respectively. These strains formed fast growing, larger gall as compared to those induced by other strains on the carrot discs. Transformed tobacco callus was initiated on the phytohormone free MS medium with 250$\mu\textrm{g}$/ml carbenicillin after co-cultivation of tobacco stem explants and Agrobacteria. On the phytohormone free media, shoot was rarely formed from transformed callus. However, these shoot were teratoma shoots which were not grown as normal shoot, and teratoma shoot from transformant by C23-1 was smaller than that of K29-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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