Chitosan has been known as a wound healing agent. The purpose of this study was to evaluate the biocompatibility and guided bone regenerative effect of chitosan and chitosan-cellulose membranes. The effects of chitosan and chitosan-cellulose membranes on the growth and survival of human periodontal ligament cells were examined by rapid colorimetric MTT(tetrazolium) assay, and the tissue response and resorption pattern were observed by implanting the membranes into the subcutaneous tissue of the back of rats for 6 weeks. To evaluate the guided bone regenerative potential of membranes, the amount of newly formed bone in the rat calvarial defects(8mm in diameter) was measured by histomorphometry and radiomorphometry 1,2 and 4 weeks after implantation of membranes. Chitosan and chitosan-cellulose membranes showed no adverse effect on the growth and survival of human periodontal ligament cells. When membranes were subcutaneously implanted, inflammatory reaction was observed at 1 week and which gradually subsided 2weeks after implantation. Membranes remained intact throughout the experimental period of 6 weeks. Radiomorphometric analysis of the craniotomy sites revealed that chitosan and chitosan-cellulose membrane implanted sites showed increased radiopacity over control. Statistically significant differences with control were found in chitosan-cellulose membrane implanted group at 2 and 4 weeks, and chitosan membrane implanted group at 4 weeks(P<0.05). Histomorphometric data indicated a pattern of osseous healing similar to radiomorphometric analysis. There was a statistically significant difference between control and chitosan-cellulose membrane implanted group at 4 weeks(P<0.05). These results implicate that chitosan and chitosan-cellulose membrane might be useful for guided bone regeneration.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.36
no.4
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pp.250-254
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2010
Introduction: This study evaluated the bone regenerative effect of silk fibroin mixed with platelet-rich fibrin (PRF) of a bone defect in rabbits. Materials and Methods: Ten New Zealand white rabbits were used for this study and bilateral round shaped defects were formed in the parietal bone (diameter: 8.0 mm). The silk fibroin mixed with PRF was grafted into the right parietal bone (experimental group). The left side (control group) was grafted only PRF. The animals were sacrificed at 4 weeks and 8 weeks. A micro-computerized tomography (${\mu}$CT) of each specimen was taken. Subsequently, the specimens were decalcified and stained for histological analysis. Results: The average value of plane film analysis was higher in the experimental group than in the control group at 4 weeks and 8weeks after surgery. However, the difference was not statistically significant.(P>0.05) The tissue mineral density (TMD) in the experimental group at 4 weeks after surgery was significantly higher than the control group.(P<0.05) Conclusion: Silk fibroin can be used as a scaffold of PRF for rabbit calvarial defect repair.
Yoon, Seok Ho;Burm, Jin Sik;Yang, Won Yong;Kang, Sang Yoon
Archives of Plastic Surgery
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v.40
no.4
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pp.341-347
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2013
Background Intractable chronic scalp ulcers with cranial bone exposure can occur along the incision after cranioplasty, posing challenges for clinicians. They occur as a result of severe scarring, poor blood circulation of the scalp, and focal osteomyelitis. We successfully repaired these scalp ulcers using a vascularized bipedicled pericranial flap after complete debridement. Methods Six patients who underwent cranioplasty had chronic ulcers where the cranial bone, with or without the metal plate, was exposed along the incision line. After completely excising the ulcer and the adjacent scar tissue, subgaleal dissection was performed. We removed the osteomyelitic calvarial bone, the exposed metal plate, and granulation tissue. A bipedicled pericranial flap was elevated to cover the defect between the bone graft or prosthesis and the normal cranial bone. It was transposed to the defect site and fixed using an absorbable suture. Scalp flaps were bilaterally advanced after relaxation incisions on the galea, and were closed without tension. Results All the surgical wounds were completely healed with an improved aesthetic outcome, and there were no notable complications during a mean follow-up period of seven months. Conclusions A bipedicled pericranial flap is vascularized, prompting wound healing without donor site morbidity. This may be an effective modality for treating chronic scalp ulcer accompanied by the exposure of the cranial bone after cranioplasty.
골형성 유도 단백질(bone morphogenetic protein, BMP)은 성장이나, 골형성과정에서 중용한 역할을 한다고 입증되었고 그것의 운반체에 대한 연구가 이뤄져 왔다. 하지만 수직압이 존재하는 곳에서 골증대술에 적용할 수 있을 만큼 강한 공간유지능력이 있는 운반체에 대한 연구는 그리 많지 않았다. Macroporous biphasic calcium phosphate block (MBCP block)은 공간유지능력이 뛰어나며 강한 수직압을 견딜수 있는 골대체물질이다. 이 연구의 목적은 MBCP block을 골형성유도 단백질(rhBMP-2)의 운반체로 사용하여 백서 두개골 결손부에 적용하였을 때, 골 형성 효과를 평가하는 것이다. 36마리의 웅성백서에서 8mm 지름을 갖는 임계크기의 두 개부 결손을 형성하였다. 20마리씩 2개의 군으로 나누어 MBCP block만 이식한 군, MBCP block을 운반체로 사용하여 농도 0.025mg/ml rhBMP-2를 이식한 군으로 나누어 술 후 2주와 8주에 치유결과를 조직학적, 조직계측학적으로 비교 관찰 하였다. 조직계측학적 관찰 결과, rhBMP-2/MBCP block 군에서 MBCP block군에서 보다 2, 8주 모두 골밀도(bone density)가 유의성있게 증가하였다 (P<0.01). 각 군에서도 8주째가 2주째보다 골밀도가 유의성있게 증가하였다(P<0.01). 총조직 형성량 (augmented area)에서는 변화가 없었다. 이 연구 결과, 백서 두개골 결손부에서 MBCP block은 rhBMP의 운반체로 사용하였을 때 신생골 형성에 유의한 효과가 있을뿐 아니라 공간유지능력이 우수해서 수직압이 존재하는 골증대술(bone augmentation)시 rhBMP의 운반체로 가능성이 있다고 사료된다.
Purpose: The purpose of this study was to histomorphometrically evaluate the osteoconductivity of a new biphasic calcium phosphate ceramics with fully interconnected microporous structure. Material and Methods: Osseous defects created in the rabbit calvaria were filled with four different bone graft substitutes. Experimental sites were filled with a new fully interconnected microporous biphasic calcium phosphate with(BCP-2) or without(BCP-1) internal macropore of $4400\;{\mu}m$ in diameter. MBCP(Biomatlante, France) and Bio-Oss(Geistlich Pharma, Switzerland) were used as controls in this study. Histomorphometric evaluation was performed at 4 and 8 weeks after surgery. Result: In histologic evaluation, new bone formation and direct bony contact with the graft particles were observed in all four groups. At 4 weeks, BCP-1(15.5%) and BCP-2(15.5%) groups showed greater amount of newly formed mineralized bone area(NB%) compared to BO(11.4%) and MBCP(10.3%) groups. The amounts of NB% at 8 weeks were greater than those of 4 weeks in all four groups, but there was no statistically significant differences in NB% between the groups. Conclusion: These results indicate that new bone substitutes, BCP with interconnected microporous structure and with or without internal macroporous structures, have the osteoconductivity comparable to those of commercially available bone substitutes, MBCP and Bio-Oss.
Periodontal therapy has dealt primarily with attempts at arresting progression of disease. however, more recent techniques have focused on regenerating the periodontal ligament having the capacity to regenerate the periodontium. Recombinant human bone morphogenetic protein-7(rhBMP-7) can differentiate the osteoprogenitor cells and induce bone formation. The purpose of this study was to evaluate the effect of BMP-7 on rat periodontal ligament cells differentiation, in vitro. In the control group, cells was cultured with DMEM media. In the experimental groups, cells were cultured with rhBMP-7 in concentration of 10, 25, 50 and 100 ng/ml. Each group was characterized by examining alkaline phosphatase activity at 3 and 5 days of culture and the ability to produce mineralized nodules of rat calvarial cells at 14 days of culture. Synthesis of type I collagen(COL-I), osteocalcin(OCN), and bone sialoprotein(BSP) was evaluated by RT-PCR at 7 days of culture. Activation of Smad proteins and p38 MAP kinase was determined by western blot analysis of the cell lysates. Alkaline phosphatase activity was significantly increased in the concentration of BMP-7 50 ng/ml and 100 ng/ml compared to the control(p<0.05). The mineralized bone nodule formation was greater with addition of 50 ng/ml and 100 ng/ml BMP-7 than the control(p<0.01). In 7 days' culture, the expressions of COL-I, BSP, and OCN was increased by BMP-7 in concentration of 10 $ng/ml{\sim}100$ ng/ml. In western blot analysis, BMP-7 treated culture cells expressed Smad 1,5,8 in dose-dependent manner, whereas BMP-7 did not activate phosphorylated form of p38 MAP kinase. These result suggested that BMP-7 stimulate rat periodontal ligament cells to differentiate toward osteoblast phenotype and increase bone matrix production by activation of BMP-Smad pathway.
The purpose of this study was to evaluate the efficacy of adding autogenous bone to the toothash-plaster mixture in the healing process of bone. Full-thickness round osseous defects with the diameter of 20mm were made at the calvarial bone of adult dogs (n=19) bilaterally, which were thought to be critical size defect. The right defects were repaired with the toothash-plaster mixture plus autogenous bone (compressed volume 0.3cc) and the left defects with only toothash-plaster mixture. At 2-, 4-, 8-, 12- and 20- week after implantation, dogs were sacrificed and evaluated the osseous healing of bony defects clinically, radiographically, and microscopically. The results were as follows; 1. At the clinical observation, the wound healed very well without any problem except severe swelling in the early period after operation. Slight depression was recognized at the both sides when the portions of cranial defect were palpated. 2. There were statistically significant differences between toothash-plaster mixture groups and autogenous bone added groups at the same period, and among the groups in the bone density of the digital radiograms (P<0.001). There was a tendency that bone density was increasing with time. 3. In light microscopic examination, new bone formation was more active in the autogenous bone added groups than toothash-plaster mixture groups at the early period after implantation but there is little difference at 20-week after implantation. 4. In fluorescent microscopic examination, the fluorescent band could be observed at the area of active bone formation and the band was more distinct in the autogenous bone added groups then toothash-plaster mixture groups. 5. In transmitted electron microscopic examination, organelles such as rER, Golgi complex and secretory granule and osteoblast were observed. In summary higher volume ratio of autogenous bone is needed to improve the bone healing in that there is little difference between toothash-plaster mixture group and autogenous bone added group at the 20-week after implantation in spite of new bone formation was more active in the autogenous bone added groups than toothash-plaster mixture groups at the early period after operation.
Park, Jeong Ik;Jeon, Seong Bae;Song, Young Il;Do, Hyung Sik;Lee, Jin Yong;Jang, Hyun Seok;Kwon, Jong Jin;Rim, Jae Suk;Lee, Eui Seok
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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v.34
no.6
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pp.391-397
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2012
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of the platelet-rich fibrin (PRF) used in combination with the porcine cancellous bone as a scaffold, in promoting bone regeneration in the bone defects ofthe rabbit calvaria. Methods: Ten rabbits were used in the study. Three round-shaped defects (diameter 8.0 mm) were created in the rabbit calvaria and were filled with nothing (control group), porcine cancellousbone (Experimental Group 1, porcine bone) and PRF-mixed porcine cancellous bone (Experimental Group 2). TS-GBB is a xenogenic bone-substitute product comprised of a high heat-treated mineralized porcine cancellous bone. Animals were sacrificed at 6 weeks and 12 weeks for the histological and radiographic evaluations. Results: In the micro computed tomography and histological results, the experimental groups 1 and 2 showed more bone formation, remodeling, and calcification than the control group. The new bone formation ratio showed theGroup 2 to be larger than Group 1 at6 and 12 weeks. However, there was no significant difference between the experimental groups 1 and 2 in the new bone formation area, at the 6 and 12 weeks (P>0.05). Conclusion: The PRF-mixed group showed more bone formation than the porcine cancellousbonegroup (TS-GBB), butthere was a no significant difference. The PRF may not lead to enhanced bone healing when grafted with the porcine cancellous bone.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.28
no.2
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pp.114-125
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2002
This study was designed to evaluate the influence of fibroblasts or connective tissue from mouse oral mucosa on differentiation of neonatal mouse calvaria-derived osteoblasts and mineralization of bone nodules. Primary cell cultures from mouse calvarial osteoblasts and 2-4 passaged fibroblasts from oral mucosa were co-cultured in monolayer cultures, devided into 6 experimental group according to cell density or cell confluency. Osteoblasts were also co-cultured with fibroblasts in $Transwell^{(R)}$ culture plate with different co-cultured period according to osteoblast differentiation. The alkaline phosphatase activity were measured in monolayer cultures and cultures using $Transwell^{(R)}$. The mineralized bone nodules were presented by Von Kossa staining and density of mineralized nodules was measured by image analysis. The connective tissues with or without osteoblast seeding were cultured and examined histologically by Von Kossa and Trichrome Goldner staining. The results were as follows; 1. Prolonged maturation of matrix and delayed mineralization of bone nodules were resulted in monolayer cultures. 2. Co-culture of fibroblast with osteoblast using $Transwell^{(R)}$ during osteoblast proliferation stage stimulated proliferation of osteoblasts and increased alkaline phosphatase activity and mineralization of bone nodules. 3. Co-culture of fibroblast with osteoblast using $Transwell^{(R)}$ during matrix mineralization stage decreased and delayed mineralization of bone nodules. 4. In vitro cultured connective tissue with osteoblast seeding resulted in proliferation of osteoblasts and matrix formation with mineralization.
Kim, Dong-Kyun;Ku, Young;Lee, Young-Moo;Chung, Chong-Pyoung
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.27
no.1
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pp.151-163
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1997
The purpose of this study was to evaluate on the biodegradability, biocompatibility and tissue regenerative capacity of synthetic biodegradable $mernbranes-Resolut^{(R)}$, $Guidor^{(R)}$ and $Biomesh^{(R)}$. To evaluate the cell attachment on the membranes, in vitro, the number of gingival fibroblasts attached to each membrane was counted by hemocytometer. Cytotoxicity test for the membranes was performed by MTT test with gingival fibroblast For evaluation of guided- bone regenerative potential, the amount of new bone formation in the rat calvarial defects(5mm in diameter) beneath the membranes was observed for two weeks and examined of the specimens by Massons trichrome staining. Biodegradability was observed for 2, 4, 8 and 12 weeks after implantation of each materials under the skin of rats and examined the specimens with H & E staining. The number of cell attachment were the greatest in $Biomesh^{(R)}$ and followed by $Resolut^{(R)}$. Cell viability of three membranes was almost similar levels. Biodegradability of $Resolut^{(R)}$ was the highest among three membrane and the potential of guided bone regeneration was the greatest in the $Biomesh^{(R)}$ and $Resolut^{(R)}$ was followed. These results suggested that commercially available biodegradable membranes were non-toxic and highly potential to guided bone regeneration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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