Kim, Won-Il;Cho, Yong-Il;Kang, Seog-Jin;Hur, Tai-Young;Jung, Young-Hun;Kim, Nam-Soo
Journal of Veterinary Clinics
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v.29
no.5
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pp.377-383
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2012
Bovine diarrhea is a major economical burden to the bovine industry in Korea. Since multiple infectious agents can be involved in bovine diarrhea, differential diagnosis is essential for effective treatment. Therefore, a panel of two multiplex real-time PCR assays which can simultaneously detect six major bovine enteric pathogens [i.e., bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine coronavirus (BCoV), group A bovine rotavirus (BRV), Salmonella spp., Escherichia coli (E. coli) $K99^+$, and Cryptosporidium parvum] was developed and applied to test 97 fecal samples collected from cattle farms in Korea. In addition, microscopic examination was also preformed on the samples to detect Coccidium oocyst. The estimated sensitivity of the multiplex PCR was 0.1 $TCID_{50}$ for BVDV, BCoV and group A BRV, 5 and 0.5 CFU for E. coli $K99^+$ and Salmonella, respectively, and 50 oocysts for Cryptosporidium. The amplification efficiency of the multiplex PCR ranged between 0.97 and 0.99 for each pathogen. Among 97 samples, 36 samples were positive for at least one of the 6 major pathogens and 6 samples were simultaneously positive for 2 pathogens by the multiplex PCR assay. Coccidium oocysts were also detected in 48 samples, which were all collected from over 1 month old calves. In conclusion, the multiplex real-time PCR panel can be a useful tool for fast and accurate diagnosis of calf diarrhea associated with BVDV, BCoV, group A BRV, E. coli $K99^+$, Salmonella, and/or Cryptosporidium and Coccidium may be an important target which needs to be included in the multiplex PCR panel in the future.
Viral safety is an important prerequisite for clinical preparations of all biopharmaceuticals derived from plasma, cell lines, or tissues of human or animal origin. To ensure the safety, implementation of multiple viral clearance (inactivation and/or removal) steps has been highly recommended for manufacturing of biopharmaceuticals. Of the possible viral clearance strategies, Ultraviolet-C (UVC) irradiation has been known as an effective viral inactivating method. However it has been dismissed by biopharmaceutical industry as a result of the potential for protein damage and the difficulty in delivering uniform doses. Recently a continuous flow UVC reactor (UVivatec) was developed to provide highly efficient mixing and maximize virus exposure to the UV light. In order to investigate the effectiveness of UVivatec to inactivate viruses without causing significant protein damage, the feasibility of the UVC irradiation process was studied with a commercial therapeutic protein. Recovery yield in the optimized condition of $3,000\;J/m^2$ irradiation was more than 98%. The efficacy and robustness of the UVC reactor was evaluated with regard to the inactivation of human immunodeficiency virus (HIV), hepatitis A virus (HAV), bovine herpes virus (BHV), bovine viral diarrhea virus (BVDV), porcine parvovirus (PPV), bovine parvovirus (BPV), minute virus of mice (MVM), reovirus type 3 (REO), and bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV). Non enveloped viruses (HAV, PPV, BPV, MVM, and REO) were completely inactivated to undetectable levels by $3,000\;J/m^2$ irradiation. Enveloped viruses such as HIV, BVDV, and BPIV were completely inactivated to undetectable levels. However BHV was incompletely inactivated with slight residual infectivity remaining even after $3,000\;J/m^2$ irradiation. The log reduction factors achieved by UVC irradiation were ${\geq}3.89$ for HIV, ${\geq}5.27$ for HAV, 5.29 for BHV, ${\geq}5.96$ for BVDV, ${\geq}4.37$ for PPV, ${\geq}3.55$ for BPV, ${\geq}3.51$ for MVM, ${\geq}4.20$ for REO, and ${\geq}4.15$ for BPIV. These results indicate that UVC irradiation using UVivatec was very effective and robust in inactivating all the viruses tested.
The efficacy of bovine immune sera to correct the calves with failure of passive transfer(FPT) was evaluated. Immune sera were produced from 14 one-year-old Holstein cattle which were inoculated commercial combined viral vaccine, administered by the challenge of some main enteric or respiratory viruses, aseptically filtered and stored at $4^{\circ}C$ before used. After the treatment of bovine immune sera, Mean transfer factor($mg/d{\ell}$, of IgG administered/kg of body weight) was $5.46{\pm}2.74,\;11.17{\pm}1.27,\;1.40{\pm}0.21$ in K-IP, H-IP and K-IV group, respectively. The corrective effect of bovine immune sera to FPT calf without any clinical signs showed that intravenous route was more effective than intraperitoneal administration(P<0.01). FPT calves with severe signs were not effective response to the immunotherapy used and consequently died within 10 days after the treatment. Ten percentage of controls appeared the clinical signs including diarrhea. On the contrary, there were not any clinical signs in K-IP and H-IV group. There was significant increase of the neutralizing titer against bovine viral diarrhea virus and bovine coronavirus as well as of cell population including CD2, CD4, and monocyte in K-IP and H-IV group after the immunotherapy(P<0.05). Also, K-IP and H-IV group showed the successful correction to FPT within one week after the immunotherapy, but controls had kept the FPT two-four weeks even after the same treatment. Consequently, the results were suggesting that the bovine immune sera could be used the corrective tool to young calves with FPT.
The objective of this study was to compare occurrence of the shipping fever associated with vaccination and mass medication in Korean Native Cow. Lack of vaccination (Pasteurella haemolytica, infectious bovine rhinotracheitis, bovine viral diarrhea, parainfluenza 3, and bovine respiratory syncytial virus) and mass medication before and after transportation, 67% of gram-negative cocci were detected. However, with vaccination and mass medication, only 33% of Gram-negative cocci were detected. When antimicrobial susceptibility for the detected bacterium was tested, apramycin, ampicillin, amilacin, clindamycin, gentamycin, kanamycin, penicillin, and streptomycin were resistant, whereas tylocin, amoxicillin, linocospetin, nalidixic acid, norfloxacin, oxalinic acid, and cefotaxime were susceptible. Morbidity and average therapeutic effect were 33% and 1.0time with vaccination and mass medication and were 78% and 5.3 times without vaccination and mass medication, respectively. Therefore, the results suggest that shipping fever would be considerably decreased with vaccination including mass medication before and after transportation.
Monoclonal antibodies(MAbs) against field isolates of the bovine rotavirus A strain(G6), V strain(G10) and reference I-801 strain(G8) were produced and characterized. Six MAbs(4C2, 4D9, 5E1, 5E7, 5D5, 3E4) against A strain had neutralizing activity and reacted only with the G6 bovine rotaviruses determined by fluorescence focus neutralization (FFN) test. Otherwise, five neutralizing MAbs(1G2, 2G6, 5E2, 5E12, 5H7) against I-801 strain neutralized the G6 and G8 bovine rotaviruses. Five non-neutralizing MAbs(5F12, 7F12, 5E11, 2A11, 2B12) were VP6-specific and cross-reacted with all bovine and porcine rotaviruses examined by fluorescence antibody(FA) test. None of the MAbs reacted with bovie viral diarrhea virus(BVDV) and bovine coronavirus(BCV) determined by FA and FFN test.
본 필자가 농가를 방문하거나 농가교육을 할 때 농장주들에게 소바이러스성설사병(Bovine Viral Diarrhea, BVD)을 아십니까? 라고 물으면 거의 대부분의 농장주들은 모른다고 대답한다. 국내 대부분의 젖소 및 육우 농가는 환절기나 동절기에 많이 발생하는 송아지 설사병 정도만 대략적으로 알고 있을 뿐 BVD가 어떤 질병인지, 어떻게 대처해야 하는지에 대한 이해가 많이 부족한 것이 현실이다. 따라서 축산인의 인식을 높이고자 국내뿐만 아니라 세계적으로 소 사육농가에 많은 피해를 주고 있는 대표적인 소모성질병인 BVD의 특성과 근절 및 예방 대책을 소개하고자 한다.
Mi Young Lee;Yeon Seong Kim;Jae Myung Park;Jae Chan Song
Journal of Life Science
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v.34
no.6
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pp.408-417
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2024
It was confirmed whether PB-81, a 50% ethanol extract of Daphne genkwa (Siebold & Zucc), had an inhibitory effect on virus proliferation in bovine rotavirus and a therapeutic effect on bovine diarrhea disease. The results showed that PB-81 induced the interferon beta in A549 cells, an epithelial cell line and interferon gamma in NK92 cells, a blood cell line. Furthermore, to confirm the viral proliferation inhibitory effect of PB-81, PB-81 was administered to MBDK cell line before, during, and after infection. Result shows that the virus was suppressed in all cases where PB-81 was administered, and the best virus suppression effect was achieved when PB-81 was administered before virus infection. In the toxicity test in mice, no side effects due to toxicity were observed, even at a maximum dose of 20 mg/mL. To verify the therapeutic effect on 16 cattle with bovine rotavirus diarrhea and 4 cattle in the control group, PB-81 was administered at a dose of 20 mg/5 mL, and No fatality was observed during the treatment. The average recovery duration from the initial administration of PB-81 was 2.25 days in the PB-81 administration group and 6.5 days in the control group without PB-81 administration. No side effects were observed from the tested cattle with rotavirus diarrhea.
Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine viral diarrhea virus (BVDV) are the main viral contributors to bovine respiratory disease (BRD) with high mortality and morbidity. BRD control measures include vaccination that modulates immunological profiles reflected in blood cells, serum, and body secretions, such as milk. This study evaluated the immune responses to an inactivated BRD vaccine in lactating cows reared in a natural environment on a dairy farm. The cows were intramuscularly inoculated with the vaccine, and serum, blood, and milk were collected pre-and post-vaccination. Our study revealed a prominent increase in BRSV-specific antibodies both in serum and milk, while the change in BVDV-specific antibodies was insignificant. Serum interleukin (IL)-1β and IL-6 levels significantly decreased, but this change was not reflected in milk. Evaluation of pattern recognition receptors (PRRs) via RT-qPCR revealed downregulation of nucleotide-binding oligomerization domain 2 (NOD2). The concentrations of BRSV antibodies, BVDV antibodies, IL-2, and IL-17A in serum and milk were strongly correlated, implying a concurrent influence on both body fluids. Thus, immunological factors modulated as a result of vaccination generally measured in serum were reflected in milk, demonstrating the suitability of milk evaluation as an alternative approach for immunological observations. Furthermore, the correlation between BRSV antibodies and NOD2 and that between BVDV antibodies and toll-like receptor (TLR) 2, TLR3, TLR4, and TLR5 imply the possible role of PRRs for the assessment of the immune response developed in immunized cows reared on the farm.
For estimating the prevalence of bovine infectious disease agents, the pathogens were classified as follows: the digestive disease agents, respiratory disease agents, reproductive disease agents, and tick-borne disease agents. This study covered 81 published papers regarding bovine infectious diseases in Korea that determined the presence of diverse pathogens or the antibodies elicited by the infectious agents in cattle from 2010 to 2019. In total, 59,504 cows were involved in the papers reporting the causative agents in their cases. The disease prevalence for the digestive, respiratory, reproductive, and tick-borne cases was 9.0%, 13.4%, 10.4%, and 7.8%, respectively. Bovine viral diarrhea virus, Escherichia coli, Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, and Eimeria spp were more significantly prevalent in the cows under one-year age than over one-year age. Bovine viral diarrhea virus, Escherichia coli, Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, and Anaplasma spp. were more significantly prevalent in Hanwoo than dairy cattle. Coxiella burnetii, Neospora caninum, and Theilieria spp. were more significantly prevalent in dairy cattle than Hanwoo. Tick-borne disease agents were more prevalent in cows grazing than the case in housing. Our analytic data obtained from this study emphasize the need for more studies on the occurrence of these pathogens according to the breed, age, and the region, to come up with bovine infectious disease control measures in Korea.
The nonstructural protein NSP4, encoded by gene 10 of rotavirus, has been shown to playa role in viral assembly and known to be an enterotoxin, causing diarrhea in mouse pups. NSP4 gene was cloned from CBNU-2 (virulent bovine rotavirus/diarrheic fecal sample) and CBNU-1 (cell-culture adapted bovine rotavirus/isolated from CBNU-2 and 75 times passaged on MA104 cells), respectively, by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and sequenced and compared. The sequence data indicated that the NSP4 genes of bovine rotavirus (BRV) were 751 bases in length and encoded one open reading frame of 175 amino acids beginning at base 42 and terminating at base 569. Differences in nucleotide sequence between CBNU-2 and CBNU-1 were observed at 6 positions (base 274, 296, 391, 394, 396 and 579). NSP4 gene of BRV exhibited a high degree of nucleotide (90% and 94%) and amino acid sequence (91% and 97%) homology with those of SA11 and UK but a low degree of nucleotide (77% and 79%) and amino acids sequence (81% and 85%) homology with those of Wa and OSU.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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