A biosurfactant-producing microorganism, .Pseudomouos sp. EL-G527 was isolated from activated sludge by enrichment culture when grown on mineral salt medium containing n-hexadecane as a carbon source. The biosurfactant from .Pseudomonar sp. EL-G527 exhibited lesser toxicity to bacterial population than synthetic surfactants and in the biodegradation test, biosurfactant was rapidly degraded and lost its activity as surface active material after 1 day incubation. In this study, the biosurfactant from Pseudomonas sp. EL-G527 was effective surface-active compound, more biodegradable and less toxic to microbial ecosystem than various synthetic surfactants.
해양 원유 오염원의 제거 및 항진균 활성을 가진 균주를 분리하기 위해 1% crude oil을 탄소원으로 이용하여 생육하는 수십 종의 균주를 분리하였다. 분리된 균주 중 biosurfactant를 생성하는 균주를 1% tributyrin에서 투명환 생성 유무를 통해 선별되었으며, 이를 Bacillus sp. DYL130으로 명명하였다. Bacillus sp. DYL130의 표면장력은 최저 28 mN/m까지 감소되었다. 이 균주로부터 biosurfactant를 정제하기 위해 배양 상등액을 친화성 크로마토그래피와 TLC를 이용하여 정제된 biosurfactant를 얻었다. TLC 결과 0.78정도의 Rf값을 확인하였다. 정제된 biosurfactant의 CMC 값은 35 mg/l인 것으로 나타났으며, 유화활성과 안정성은 soybean oil을 기질로 사용하였을 경우 최대인 것으로 나타났다. Botrytis cineria에 대한 길항작용도 우수한 것으로 보인다.
원유 분해능이 강력한 해양균주를 얻고자 유류오염 지역으로부터 crude oil을 탄소원으로 이용하는 수십 종을 분리하였다. 분리된 균주중 원유분해능 및 biosurfactant 생성능이 우수한 균주를 선별하여, 형태학적, 생화학적 및 생리학적 특성을 조사한 후 Bacizzus sp. LSC11로 동정하였다. Bacillus sp. LSC11 균주 배양액의 표면장력은 최저 32mN/m까지 감소되었다. Biosurfactant의 CMC값은 0.0035% (w/v) 인 것으로 나타났다. Bacillus sp. LSC11가 생산하는 biosurfactant의 유화활성은 대두유에서 최대였으며, 원유에서도 높은 편이였다. 유화안정성은 합성계면활성제와 비슷하거나 우수하였다.
The principal objective of this study was to determine the optimal conditions for the production of biosurfactant by the indigenous bacterium, Pseudoalteromonas sp. HK-3, originating from oil-spilled areas. The relationship between total biosurfactant production and the factors affecting biosurfactant production were evaluated by statistical analysis using SPSS software. The effects of various supplemental carbon sources (e.g., glucose, dextrose, mannitol, citrate, acetate) on the maximal production of biosurfactant by the test culture of Pseudoalteromonas sp. HK-3 was then evaluated. As a result, mannitol was found in this study to be the best supplemental carbon source for the production of biosurfactant. A spot inoculation of crude cultural liquid containing the HK-3 cells generated the largest clear zone, whereas only small clear zones appeared around the spots inoculated with either supernatant only or cell pellets following centrifugation. Our results demonstrated that the HK-3 test culture supplemented with 2% mannitol at an initial pH of 6 generated the maximal amount of biosurfactant within 72 h of incubation.
생물계면활성제 생성균주, Pseudomonas aeruginosa F722를 이용하여 다양한 배양조건과 배지조성에서 생물계면활성제 생산성을 검토하였다. 질소원과 탄소원을 검토하기 전에는 P. aeruginosa F722의 생물계면활성제 생산량은 0.78 g/l이었다. 하지만, 질소원과 탄소원을 검토한 후에는 생물계면활성제 생산량이 2배 증가한 1.66g/l이었다. 무기질소원으로 $_NH4$Cl 또는 $NaNO_2$를 첨가하였을 때 생물계면활성제 활성에 효과적이었으며 유기질소원으로는 yeast extract 또는 tryptone을 첨가하였을 때 생물계면활성제 활성이 높았다. 이중 무기 질소원으로 0.05% $NH_4$Cl , 유기 질소원으로 0.1% yeast extract를 질소원으로 첨가하였을 때 가장 최적이었다. 탄소원으로 소수성 기질(n-alkane) 또는 친수성 기질(glucose, glycol)을 첨가하여 생물계면활성제 생산량을 조사하였는데 소수성 기질보다는 친수성 기질인 3.0% glucose를 첨가하였을 때 생물계면활성제 생산량이 높았다. 이때의 탄소원/질소원 비율은 17~20이었다. P. aeruginosa F722는 배양조건 3.0% glucose, 0.05% $NH_4$Cl, 0.1% yeast extract, $35^{\circ}C$, pH 7.0, C/N ratio 20, 5 days에서 생물계면활성제 생산량은 1.66g/l이였다. 질소원이 결핍 후 탄소원을 첨가하여 배양하였을 때가 질소원과 탄소원을 함께 첨가하여 배양했을 때보다 생물계면활성제 생산속도 및 균체 생장속도가 높았다. 최적 배양조건하에서 얻어진 배양액의 표면장력은 30mN/m이었다.
This study aimed to optimize the culture conditions to improve the crude biosurfactant activity of Bacillus pumilus IJ-1, using a 33 full-factorial design of response surface methodology (RSM). It was found that submerged fermentation of B. pumilus improved the activity of the crude biosurfactant. The factors selected for optimization were NaCl concentration, temperature, and tryptone concentration. Response surface analysis revealed that the fitted quadratic model was statistically significant and produced an adequate R2 value (0.9898) and a low probability value (<0.0001). The optimum level for each factor was found to be 0.567% (w/v) NaCl, 21.851℃ and 0.765% (w/v) tryptone, respectively. Crude biosurfactant activity was found to be most affected by tryptone concentration; then temperature, and finally NaCl concentration. Our results may potentially facilitate large-scale biosurfactant production from B. pumilus IJ-1.
유류오염토양에서 분리한 유류분해균주 중 계면장력 저하능이 우수한 균주를 분리하여 동정한 결과 Pseudomonas aeruginosa D2D2로 판명되었다. 탄소원으로 glucose와 olive oil을 각 1.5%씩 첨가하였을 때 표면장력이 27.9 dyne/cm로 표면장력 저하능력이 가장 우수한 것으로 나타냈다. 생산된 biosurfactant로 ethly acetate 추출하여 crude biosurfactant를 얻었으며, TLC 분석한 결과 glycolipid계열의 biosurfactant임을 확인하였다.
Anu Appaiah, K.A.;Parvathy, A.;Mathew, Mariam;Karanth, N.G.K.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권8호
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pp.858-860
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2011
Production of biosurfactant can be substantially increased by the addition of precursors like vegetable oils, petroleum products, and other water-insoluble substances. Pseudomonas Ptm+ strain produces biosurfactant in the presence of hexachlorocyclohexane (HCH), which specifically emulsifies HCH, a recalcitrant organochlorine pesticide. Addition of previously produced crude biosurfactant by the same organism as a precursor instead of HCH increased production of biosurfactants with a decrease in the total fermentation time from 32 to 24 h. The main objective of this paper was to find alternatives for HCH as an inducer.
Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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제4권4호
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pp.221-225
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2000
Pseudomonas sp. EL-G527 was grown to produce a biosurfactant on 2% n-hexadecane as the energy and carbon source. This biosurfactant significantly reduced the surface tension of water from 72 to 28 dyne/cm at a critical micelle concentration(CMC) of 140 mg/l at pH 2.0. As the pH value decreased, the reduction in the surface tension due to the biosurfactant increased. The surface activity of the biosurfactant was unaffected when the NaCl concentration was increased to 5% and the calcium ion concentration increased to 100 mM, plus it remained stable at 10$0^{\circ}C$ for 180 min.
Bacillus subtilis ATCC 6633 was grown in BHIB medium supplemented with $Mn^{2+}$ for 96 h at $37^{\circ}C$ in a shaker incubator. After removing the microbial biomass, a lipopeptide biosurfactant was extracted from the supernatant. Its structure was established by chemical and spectroscopy methods. The structure was confirmed by physical properties, such as Hydrophile-Lipophile Balance (HLB), surface activity and erythrocyte hemolytic capacity. The critical micelle concentration (cmc) and erythrocyte hemolytic capacity of the biosurfactant were compared to those of surfactants such as SDS, BC (benzalkonium chloride), TTAB (tetradecyltrimethylammonium bromide) and HTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide). The maximum hemolytic effect for all surfactants mentioned was observed at concentrations above cmc. The maximum hemolytic effect of synthetic surfactants was more than that of the biosurfactant produced by B. subtilis ATCC 6633. Therefore, biosurfactant would be considered a suitable surface-active agent due to low toxicity to the membrane.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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