Seaweed has high growth rate, low land usage, high CO2 absorption and no competition for food resources. Therefore, the use of lignin-free seaweed as a raw material is arising as a third generation biomass for bioethanol production. Various pretreatment techniques have been introduced to enhance the overall hydrolysis yield, and can be categorized into physical, chemical, biological, enzymatic or a combination. Thermal acid hydrolysis pretreatment is one of the most popular methods to attain high sugar yields from seaweed biomass for economic reasons. At thermal acid hydrolysis conditions, the 3,6-anhydro-galactose (AHG) from biomass could be converted to 5-hydroxymethylfurfural (HMF), which might inhibit the cell growth and decrease ethanol production. AHG is prone to decomposition into HMF, due to its acid-labile character, and subsequently into weak acids such as levulinic acid and formic acid. These inhibitors can retard yeast growth and reduce ethanol productivity during fermentation. Thus, the carbohydrates in seaweed require effective treatment methods to obtain a high concentration of monosaccharides and a low concentration of inhibitor HMF for ethanol fermentation. The efficiency of bioethanol production from the seaweed biomass hydrolysate is assessed by separate hydrolysis and fermentation (SHF). To improve the efficiency of the ethanol fermentation of mixed monosaccharides, the adaptation of yeast to high concentration of sugar could make simultaneous utilization of mixed monosaccharides for the production of ethanol from seaweed.
An endo-${\beta}$-1,4-glucanase gene, cel9K, was cloned using the shot-gun method from Paenibacillus sp. X4, which was isolated from alpine soil. The gene was 2,994 bp in length, encoding a protein of 997 amino acid residues with a predicted signal peptide composed of 32 amino acid residues. Cel9K was a multimodular enzyme, and the molecular mass and theoretical pI of the mature Cel9K were 103.5 kDa and 4.81, respectively. Cel9K contains the GGxxDAGD, PHHR, GAxxGG, YxDDI, and EVxxDYN motifs found in most glycoside hydrolase family 9 (GH9) members. The protein sequence showed the highest similarity (88%) with the cellulase of Bacillus sp. BP23 in comparison with the enzymes with reported properties. The enzyme was purified by chromatography using HiTrap Q, CHT-II, and HiTrap Butyl HP. Using SDS-PAGE/activity staining, the molecular mass of Cel9K was estimated to be 93 kDa, which is a truncated form produced by the proteolytic cleavage of its C-terminus. Cel9K was optimally active at pH 5.5 and $50^{\circ}C$ and showed a half-life of 59.2 min at $50^{\circ}C$. The CMCase activity was increased to more than 150% in the presence of 2 mM $Na^+$, $K^+$, and $Ba^{2+}$, but decreased significantly to less than 50% by $Mn^{2+}$ and $Co^{2+}$. The addition of Cel9K to a commercial enzyme set (Celluclast 1.5L + Novozym 188) increased the saccharification of the pretreated reed and rice straw powders by 30.4% and 15.9%, respectively. The results suggest that Cel9K can be used to enhance the enzymatic conversion of lignocellulosic biomass to reducing sugars as an additive.
Proceedings of the Korea Technical Association of the Pulp and Paper Industry Conference
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2011.04a
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pp.101-110
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2011
The experiment was conducted to evaluate the different NaOH pretreatment concentrations (0.25%, 0.50%, 0.75%, and 1.00%) on enzymatic saccharification (with cellulase, and ${\beta}$-glucosidase) and fermentation (by Saccharomyces cerevisiaeKCCM 11304) for bioethanol production from rice straw and rice husk. Pretreatment of rice straw and rice husk were conducted under both natural and powder state to observe the potentiality of the biomass condition (natural and powder state). In this study, glucose and ethanol production were increased with the increase of NaOH percentage for both rice straw and rice husk (natural and powder state). For rice straw, the highest amount of glucose was obtained in 1.00% NaOH pretreatment (0.81 g $g^{-1}$ in a natural, and 0.63 g $g^{-1}$ in a powder state pretreatment). Similarly, for rice husk, the highest amount of glucose was obtained in 1.00% NaOH pretreatment (0.47 g $g^{-1}$ in a natural, and 0.46 g $g^{-1}$ in a powder state pretreatment). However, 0.75% NaOH pretreatment resulted in glucose yield near about 1.00% NaOH pretreatment for both rice straw and rice husk (natural and powder state). On the other hand, for rice straw, the highest amount of ethanol was obtained in 1.00% NaOH pretreatment (0.36 g $g^{-1}$ in a natural, and 0.31 g $g^{-1}$ in a powder state pretreatment). In addition, for rice husk, the highest amount of ethanol was also obtained in 1.00% NaOH pretreatment (0.24 g $g^{-1}$ in a natural, and 0.23 g $g^{-1}$ in a powder state pretreatment). Moreover, 0.75% NaOH pretreatment resulted in ethanol yield near about 1.00% NaOH pretreatment for both rice straw and rice husk (natural and powder state). It was confirmed that higher amount of NaOH use is cost effective. Moreover, higher amount of glucose and ethanol was observed when powder was prepared after pretreatment. So 0.75% NaOH pretreatment in a natural state is supposed to be suitable for enzymatic saccharification and fermentation for bioethanol production.
The bioethanol for use as a liquid fuel by fermentation of renewable biomass as an alternative to petroleum is important from the viewpoint of global environmental protection. Recently, many scientists have attempted to increase the productivity of bioethanol process by developing specific microorganism as well as optimizing the process conditions. In the present study, which is based on our previous investigation on the pretreatment process, theproductivity of bioethanol obtained from simultaneous saccharification and fermentation (SSF) process was compared between various domestic materials including barley, brown rice, corn and sweet potato. Additionally, Solid glucoamylase (SGA; developed in Changhae Co.), from modified strain with UV, was used. The result was compared to commercial glucoamylase (GA). It was observed that the fermentation rate was increased together with the yield which can be derived from the final ethanol concentration. Especially, in the case of brown rice, compared to the experimental results using GA, the final ethanol concentration was 1.25 times higher and 18.4 g/L of the yield was increased. Also, the time required for reaching 95% of the maximum ethanol concentration is significantly reduced, which is approximately 36 hours, compared to 88 hours using GA. It means that SGA has excellent saccharogenic power.
To develop high dfficiency-low energy consumption attrition coupled bioreactor for enhanced enzymatic hyerolysis of insoluble biomass, a tumbling drum type bioreactor was installed, and its efficiency was evaluated. The effects of drum structure and poerational conditions were investigated. The optimal saccharification at 3L drum was obtained at 8 baffled drum, drum diameter to baffle height ratio of 1:0.05, 100rpm, and addition of 600g of 3mm glass bead per liter. The consumed power for rolling of drum and energy consumption for half digestion of cellulose were measured, and compared with enhanced rate and yield to predict the economic prospect of the process. The tumbling drum type bioreactor seems to have appropriated structure for industrial scale operation, and further investigation for scale-up need to be conducted.
Yoo, Hah-Young;Kim, Sung Bong;Lee, Sang Jun;Lee, Ja Hyun;Suh, Young Joon;Kim, Seung Wook
한국신재생에너지학회:학술대회논문집
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2011.11a
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pp.114.1-114.1
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2011
Bioenergy production from lignocellulosic biomass and agriculture wastes have been attracted because of its sustainable and non-edible source. Especially, canola is considered as one of the best feedstock for renewable fuel production. Oil extracted canola and its agriculture residues are reuseable for bioethanol production. However, a pretreatment step is required before enzymatic hydrolysis to disrupt recalcitrant lignocellulosic matrix. To increase the sugar conversion, more efficient pretreatment process was necessary for removal of saccharification barriers such as lignin. Alkaline pretreatment makes the lignocellulose swollen through solvation and induces more porous structure for enzyme access. In our previous work, aqueous ammonia (1~20%) was utilized for alkaline reagent to increase the crystallinity of canola residues pretreatment. In this study, significant factors for efficient soaking in aqueous ammonia pretreatment on canola residues was optimized by using the response surface method (RSM). Based on the fundamental experiments, the real values of factors at the center (0) were determined as follows; $70^{\circ}C$ of temperature, 17.5% of ammonia concentration and 18 h of reaction time in the experiment design using central composition design (CCD). A statistical model predicted that the highest removal yield of lignin was 54% at the following optimized reaction conditions: $72.68^{\circ}C$ of temperature, 18.30% of ammonia concentration and 18.30 h of reaction time. Finally, maximum theoretical yields of soaking in aqueous ammonia pretreatment were 42.23% of glucose and 22.68% of xylose.
Kim, Hee-Young;Lee, Eui-Soo;Kim, Won-Seok;Suh, Dong-Jin;Ahn, Byoung-Sung
Clean Technology
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v.17
no.2
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pp.156-165
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2011
The process for bioethanol production from lignocellulosic biomass was studied through process simulation using PRO/II. Process integration was conducted with concentrated acid pretreatment, hydrolysis process, SMB (simulated moving bed chromatography) process and pervaporation process. Energy consumption could be minimized by the heat recovery process. In addition, material and energy balance were calculated based on the results from the simulation and literature data. A net production yield of 4.07 kg-biomass and energy consumption value of 3,572 kcal per 1 kg ethanol were calculated, which is indicating that 26% yield increase and 30% energy saving compared to the bioethanol production process with dilute-acid hydrolysis (SRI report). In order to make it possible, sugar conversion yield of cellulose and hemi-cellulose is to be reached up to 90% and fermentation of xylose needs to be developed. In order to reduce the energy consumption up to 30%, the concentration of acid solution after being separated by 5MB should exceed 20%. If acid/sugar separation by SMB process is to be practical, the bioethanol process designed in this study can be commercially feasible.
This study was performed to obtain the optimal condition that hydrolyzed exploded pine(Pinus densiflora), oak(Quercus serrata) and birch wood(Betula platyphylla var. japonica) by using sulfuric acid. The results obtained were summarized as follows: In hydrolysis of wood meal with sulfuric acid. maximum yield of sugar appeared that pine was 12 hours. oak and birch were 24 hours with 65% sulfuric acid. Futhermore, when wood meal and exploded woods were hydrolyzed with 65% sulfuric acid at $23^{\circ}C$ for 6 hours(primary hydrolysis), diluted to 3% and hydrolyzed again at $100^{\circ}C$ for 2 hours(secondary hydrolysis), the maximum sugar yield of wood meals were 6 hours. those of higher steam exploded pine wood was 3 hours. of lower steam exploded oak and birch woods were 6 hours. The sugar analyses of exploded wood showed that the amount of arabinose and xylose residue rapidly decreased. content of nemicelluose decreased with increase of steaming time and pressure.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.47
no.3
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pp.11-17
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2015
In acid hydrolysis process of biomass saccharification. neutralization of acid hydrolyzate is essential step, which resulted in dissolved cations in glucose solution. Impact of cations to Kluyveromyces marxianus in glucose solution was investigated focused on ethanol fermentation. Either potassium or sodium cations decreased the ethanol fermentation and glucose to ethanol conversion. Glucose consumption by K. marxianus was delayed by increasing potassium cation concentration as completely consumed within 12 h in potassium cation 0.46 mol and 0.92 mol but within 24 h in potassium cation 1.38 mol. Also, ethanol fermentation process was slowed down with increasing concentration of the potassium sulfate. Fermentation of glucose solution to ethanol was more inhibited by sodium cation than potassium cation in glucose solution. Glucose was completely consumed within 24 h in sodium cation 0.95 mol. but at 1.90 mol or 2.84 mol in sodium cation could not finish the fermentation within 48 hour. Ethanol concentration was 22.26 g/L at low sodium cation in glucose solution with complete fermentation within 24 h. With increasing sodium cation in glucose solution, final ethanol concentration was reached at 14.10 g/L (sodium cation con) and 0.21 g/L (sodium cation con), which meant delaying of fermentation by sodium cations.
Global warming crisis due primarily to continued green house gas emission requires impending change to renewable alternative energy than continuously depending on exhausting fossil fuels. Bioenergy including biodiesel and bioethanol are considered good alternatives because of their renewable and sustainable nature. Bioethanol is currently being produced by using sucrose from sugar beet, grain starches or lignocellulosic biomass as sources of ethanol fermentation. However, grain production requires significant amount of fossil fuel inputs during agricultural practices, which means less competitive in reducing the level of green house gas emission. By contrast, cellulosic bioethanol can use naturally-growing, not-for-food biomass as a source of ethanol fermentation. In this respect, cellulosic ethanol than grain starch ethanol is considered a more appropriate as a alternative renewable energy. However, commercialization of cellulosic ethanol depends heavily on technology development. Processes such as securing enough biomass optimized for economic processing, pretreatment technology for better access of polymer-hydrolyzing enzymes, saccharification of recalcitrant lignocellulosic materials, and simultaneous fermentation of different sugars including 6-carbon glucose as well as 5-carbon xylose or arabinose waits for greater improvement in technologies. Although it seems to be a long way to go until commercialization, it should broadly benefit farmers with novel source of income, environment with greener and reduced level of global warming, and national economy with increased energy security. Mission-oriented strategies for cellulosic ethanol development participated by government funding agency and different disciplines of sciences and technologies should certainly open up a new era of renewable energy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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