대한약학회 2001년도 Proceedings of the Pharmaceutical Society of Korea
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pp.90-94
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2001
Wondonins A and B, aromatic alkaloids of an unprecedented skeletal class have been isolated form and association of the sponges Poecillastra wondoensis and Jaspis sp. In addition, four novel bromotyrosine-derived metabolites, psammaplins $A_1$ and $A_2$, aplysinellins A and B, have been isolated from the tropical sponge Aplysinella rhax. The structures of these compounds have been determined on the basis of combined chemical and spectral analyses. The new compounds exhibited significant cytotoxicity and antiangiogenic activity as well as inhibitory activities against farnesyl protein transferase and leucine aminopeptidase. In addition to these compounds, several bioactive metabolites have been isolated from sponges of Korean and tropical waters.
Bioactive glass powders were synthesized by hydrothermal chemical route by the use of ultrasonic energy irradiation. We used sodalime, calcium nitrate tetra hydrate and di ammonium hydrogen phosphate as the precursor material to synthesize $SiO_2$ rich bio-active glass materials. The $SiO_2$ content was varied in the precursor mixture to 60, 52 and 45 mole%. Dense compacts were obtained by microwave sintering at $1,100^{\circ}C$. Mechanical properties were characterized for the fabricated dense bioactive glasses and were found to be comparable with conventional CaO-$SiO_2$-$Na_2O$-$P_2O_5$ bioactive glass. Detailed biocompatibility evaluation of the glass composition was investigated by in-vitro culture of MG-63 cell and mesenchyme stem cell. Cell adhesion behavior was investigated for both of the cell by one cell morphology for 30, 60 and 90 minutes. Cell proliferation behavior was investigated by culturing both of the cells for 1, 3 and 7 days and was found to be excellent. Both SEM and confocal laser scanning microscopy were used for the investigation. Western blot analysis was performed to evaluate the bimolecular level interaction and extent and rate of specific protein expression. The ability to form biological apatite in physiological condition was observed with simulated body fluid (SBF). In-vivo bone formation behavior was investigated after implanting the materials inside rabbit femur for 1 and 3 month. The bone formation behavior was excellent in all the bioglass compositions, specially the composition with 60% $SiO_2$ content showed most promising trend.
So, Kum-Kang;Ko, Yo-Han;Chun, Jeesun;Kim, Jung-Mi;Kim, Dae-Hyuk
한국균학회소식:학술대회논문집
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한국균학회 2018년도 춘계학술대회 및 임시총회
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pp.11-11
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2018
Cryphonectria parasitica, chestnut blight fungus, has a characteristic of decreasing pathogenicity when infected with Cryphonectria hypovirus 1. C. parasitica is known to be one of the most representative model systems used to observe the interaction between viruses, plants and fungi. The mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway, which is well conserved in various organisms ranging from yeast to humans, functions in relaying phosphorylation-dependent signals within MAPK cascades to diverse cellular functions involved in the regulation of pheromone, cell wall integrity, and osmotolerance in filamentous fungi. Several genes in the MAPK pathway were revealed to be regulated by hypovirus, or to be involved in pathogenicity in C. parasitica. Among these pathways, the CWI pathway has aroused interest because CpBck1, an ortholog of yeast Bck1 (a CWI MAPKKK), was previously reported to be involved in cell wall integrity and sectorization. Interestingly, sporadic sectorization was observed in the CpBck1 mutant and sectored phenotypes were stably inherited in the progeny that were successively transferred from sectored mycelia. In this study, we analyzed the biological function of CpSlt2, downstream gene of CpBck1, to confirm whether the sectorization phenomenon occurred in the specific single gene or cell wall integrity (CWI) pathway. As results, the CpSlt2-null mutant exhibited marked changes in colonial growth, near absence of conidiation and aerial hyphae, abnormal pigmentation, CWI-related phenotypic defects, and dramatically impaired virulence. As cultivation of the mutant strains progressed, the majority of the colonies showed sporadic sectorization and mycelia from the sectored area stably maintained the sectored phenotype. These results suggest that the unique sectorization is CWI pathway-specific, though the components in the same CWI pathway have common and specific functions.
실크 세리신 단백질을 추출정제하여 새로운 기능성 소재로 활용하기 위하여 세리신 추출법에 따른 세리신의 특성을 분석하고 약리효능과 피부친화성 소재로의 응용 가능성을 관능평가를 통하여 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 실크 세리신 단백질을 효과적으로 추출하는 방법은 NaOH(0.02wt.%)로 처리하는 방법과 질소공기 하에서 식용효소인 Flavourzyme 3%로 처리하는 방법이 연감을 25wt.% 내외로 거의 100% 세리신을 회수하였다. 2. 추출된 세리신의 분자량 분포는 10,000-30,000 범위였으며 용해도는 90 wt.% 이상이었다. 또한 Actinase 등 단백질 분해 효소로 처리하여 분자량 2,700-4,200 의 저분자화 세리신을 얻을 수 있었으나 아미노산 조성은 고온고압 추출 세리신과 큰 차이가 없었다. 3.세리신의 항산화, 혈당강하 및 알콜대사에 미치는 영향을 살펴본 결과 유의성 있는 항산화 효과를 나타내지는 않았으나 세리신 투여시 sucrose와 maltose에 의하여 유발되는 혈당을 각각 62.6%, 41.5% 낮추는 효과를 나타내었다. 4. 피부친화성 소재로서 세리신의 활용가능성을 검토하기 위하여 중금속 함량을 측정한 결과 활성탄이나 wool filter를 이용함으로서 효과적으로 중금속을 제거할 수 있었으며, 세리신을 포함한 비누와 입욕제에 대한 관능평가 결과 세정력, 기포성, 세면후 피부보습성 등이 우수한 것으로 판정되어 실크 세리신 단백질은 피부친화성 미용 소재로 적용이 가능할 것으로 확인되었다.
Activator protein-1 can induce either cell survival or death, which is controlled by opposing effects of different Jun members. It is generally accepted that c-Jun is pro-apoptotic, but that JunD is anti-apoptotic in stress-exposed cells. Additionally, although there are reports suggesting that JunB plays a protective role, its role in stress-induced apoptosis remains unclear. Here, we investigated the role of JunB in $H_2O_2$-induced cell death using cells that over-expressed the protein or were transfected with si-JunB. Inhibition of JunB expression accelerated $H_2O_2$-mediated loss of mitochondrial membrane potential (MMP) and cytotoxicity. Conversely, over-expression of JunB protein led to significant inhibition of the MMP loss and cell death. The increase in JunB expression also attenuated nuclear relocation of apoptosis-inducing factor and mitochondrial Bcl-2 reduction that occurred following $H_2O_2$ exposure. These results suggest that JunB can signal survival against oxidant-mediated cell death by suppressing mitochondrial stress.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제31권5호
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pp.440-453
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2005
Objectives : To develop a bioactive membrane for guided bone regeneration (GBR), the biocompatibility and bone regenerating capacity of the cellulose membrane obtained from the Ascidians squirt skin were evaluated. Materials and methods : After processing the pure cellulose membrane from the squirt skin, the morphological study, amino acid analysis and the immunoreactivity of the cellulose membrane were tested. Total eighteen male Spraque-Dawley rats (12 weeks, weighing 250 to 300g) were divided into two control (n=8) and another two experimental groups (n=10). In the first experimental group (n=5), the cellulose membrane was applicated to the 8.0 mm sized calvarial bone defect and the same sized defect was left without cellulose membrane in the first control group (n=4). In the another experimental group (n=5), the cellulose membrane was applicated to the same sized calvarial bone defect after femoral bone graft and the same sized defect with bone graft was left without cellulose membrane in the another control group (n=4). Each group was sacrificed after 6 weeks, the histological study with H&E and Masson trichrome stain was done, and immunohistochemical stainings of angiogenin and VEGF were also carried out. Results : The squirt skin cellulose showed the bio-inductive effect on the bone and mesenchymal tissues in the periosteum of rat calvarial bone. This phenomenon was found only in the inner surface of the cellulose membrane after 6 weeks contrast to the outer surface. Bone defect covered with the bioactive cellulose membrane showed significantly greater bone formation compared with control groups. Mesenchymal cells beneath the inner surface of the bioactive cellulose membrane were positive to the angiogenin and VEGF antibodies. Conclusion : We suppose that there still remains extremely little amount of peptide fragment derived from the basement membrane matrix proteins of squirt skin, which is a kind of anchoring protein composed of glycocalyx. This composition could prevent the adverse immunological hypersensitivity and also induce bioactive properties of cellulose membrane. These properties induced the effective angiogenesis with rapid osteogenesis beneath the inner surface of cellulose membrane, and so the possibilities of clinical application in dental field as a GBR material will be able to be suggested.
The insect baculovirus expression vector system (BEVS) is useful for producing biologically active recombinant proteins. However, the overexpressions of foreign proteins using this system often results in misfolded proteins and the formation of protein aggregates. To overcome this limitation, we developed a versatile baculovirus expression and secretion system using Bombyx mori protein disulfide isomerase (bPDI) as a fusion partner. bPDI gene fusion was found to improve the secretions and antibacterial activities of recombinant nuecin proteins. Thus, we conclude that bPDI gene fusion is a useful addition to BEVS for the large-scale production of bioactive recombinant proteins.
Wnt3a is a glycosylated ligand that activates the β-catenin-dependent signaling pathway. Wnt signaling is also important in the prostate tumor microenvironment, and Wnt proteins secreted by the tumor stroma promote resistance to therapy. Bioactive Wnt3a production requires a number of dedicated factors in the secretory cell, but their coordinated functions are not fully understood. We previously reported transmembrane protein 64 (Tmem64) as a novel regulator of the Wnt/β-catenin signaling pathway, which is correlated with β-catenin regulation. In the present study, the role of Tmem64 in prostate cancer cells was investigated by modulating Wnt3a secretion. Overexpression of Tmem64 inhibited Wnt3a secretion and Lef/Tcf-sensitive transcription. By contrast, a Tmem64 mutation deleting the protein's transmembrane region restored Wnt3a secretion. Notably, Tmem64 protein and mRNA in PC3 cells were significantly overexpressed compared with that observed in LNCaP and DU145 cells. In a mouse metastasis model intracardially injected with PC3 cells, Tmem64 expression was downregulated in the metastatic spine and mandible lesions compared with in the primary injection regions. However, Wnt3a was strongly expressed in the metastatic spine and mandible lesions. Collectively, these findings suggest that Tmem64 is involved in the metastatic progression of prostate cancer cells by regulating Wnt3a secretion.
Fertilized hen eggs are rich in a variety of bioactive ingredients. In this study, we aimed to obtain an antioxidant protein from fertilized eggs and the radical scavenging abilities on 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical (${\bullet}OH$), superoxide anion ($O^{2-}{\bullet}$) were used to evaluate the antioxidant activity of the purified protein. During 20 d of incubation, the radical scavenging ability of protein extracted from fertilized eggs exhibited significantly differences and the protein on day 16 showed higher antioxidant capacity. Based on this, the antioxidant protein of the samples on day 16 were isolated for the follow-up study. With a molecular weight 43.22 kDa, the antioxidant protein was purified by Diethylaminoethyl cellulose -52 (DEAE-52) column and Sephadex G-100. The LC-MS analysis showed that the purified protein molecular weight was 43.22 kDa, named D2-S. The sequence of amino acids was highly similar to ovalbumin and the coverage reached to 84%. The purified protein showed a radical scavenging rate of $52.34{\pm}3.27%$ on DPPH and $63.49{\pm}0.25%$ on ${\bullet}OH$, respectively. Furthermore, the C-terminal amino acid sequence was NAVLFFGRCVSP, which was consistent with the sequence of ovabumin. These results here indicated that purified protein may be a potential resource as a natural antioxidant.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제26권2호
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pp.119-123
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2013
The insect baculovirus expression vector system (BEVS) is useful for producing biologically active recombinant proteins. However, the overexpression of heterologous proteins using this system often results in misfolded proteins and the formation of protein aggregates. To overcome this limitation, we developed a versatile baculovirus expression and secretion system using Bombyx mori protein disulfide isomerase (bPDI) as a fusion partner. bPDI gene fusion was found to improve the secretions and antibacterial activities of recombinant nuecin and enbocin proteins. Thus, we conclude that bPDI gene fusion is a useful addition to BEVS for the large-scale production of bioactive recombinant proteins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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