Phosphoinositide-specific phospholipase C is an effector molecule in the signal transduction process. It generates two second messengers, inositol-1,4,5-trisphosphate and diacylglycerol from phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate. Currently, thirteen mammal PLC isozymes have been identified, and they are divided into six groups: PLC-$\beta$, -$\gamma$, -$\delta$, -$\varepsilon$, -$\zeta$ and -$\eta$. Sequence analysis studies demonstrated that each isozyme has more than one alternative splicing variant. PLC isozymes contain the X and Y domains that are responsible for catalytic activity. Several other domains including the PH domain, the C2 domain and EF hand motifs are involved in various biological functions of PLC isozymes as signaling proteins. The distribution of PLC isozymes is tissue and organ specific. Recent studies on isolated cells and knockout mice depleted of PLC isozymes have revealed their distinct phenotypes. Given the specificity in distribution and cellular localization, it is clear that each PLC isozyme bears a unique function in the modulation of physiological responses. In this review, we discuss the structural organization, enzymatic properties and molecular diversity of PLC splicing variants and study functional and physiological roles of each isozyme.
Background: The International Commission on Radiological Protection (ICRP) has recently published report series on the occupational intakes of radionuclides (OIR) for internal dosimetry of radiation workers. In this study, the optimized monitoring program including the monitoring interval and the minimum detectable activity (MDA) of major radionuclides was suggested to perform the routine individual monitoring of internal exposure based on the ICRP OIR. Materials and Methods: The derived recording levels and the critical monitoring quantities were reviewed from international standards or guidelines by the International Atomic Energy Agency (IAEA), the International Organization for Standardization (ISO), and the European Radiation Dosimetry Group (EURADOS). The OIR data viewer provided by ICRP was used to evaluate the monitoring intervals and the MDA, which are derived from the reference bioassay functions and the dose coefficients. Results and Discussion: The optimal monitoring intervals were determined taking account of two requirement conditions on the potential intake underestimation and the MDA values. The MDA requirement values of the selected radionuclides were calculated based on the committed effective dose from 0.1 mSv to 5 mSv. The optimized routine individual monitoring program was suggested including the optimal monitoring intervals and the MDA requirements. The optimal MDA values were evaluated based on the committed effective dose of 0.1 mSv. However, the MDA can be adjusted considering the practical operation of the routine individual monitoring program in the nuclear facilities. Conclusion: The monitoring intervals and the MDA as crucial factors for the routine monitoring were described to suggest the optimized routine individual monitoring program of the occupational intakes. Further study on the alpha/beta-emitting radionuclides as well as short lived gamma-emitting nuclides will be necessary in the future.
Ginsan, a polysaccharide isolated from Panax ginseng, has been shown to be a potent immunomodulator, producing a variety of cytokines such as TNF-a, IL-1$\beta$, IL-2, IL-6, IL-12, IFN-${\gamma}$ and GM-CSF, and stimulating lymphoid cells to proliferate. In the present study, we analyzed some immune functions 1$^{st}$-5$^{th}$ days after ginsan i.p. injection, including the level of non-protein thiols (NPSH) as antioxidants, heme oxygenase (HO) activity as a marker of oxidative stress, zoxazolamine-induced paralysis time and level of hepatic cytochrome P-450 (CYP450) as indices of drug metabolism system, and activities of serum aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), total bilirubin, and albumin level as indicators of hepatotoxicity. Ginsan in the dose of 100 mg/kg caused marked elevation (1.7-2 fold) of HO activity, decrease of total CYP450 level (by 20-34%), and prolongation of zoxazolamine-induced paralysis time (by 65-70%), and showed some differences between male and female mice. Ginsan treatment did not seem to cause hepatic injury, since serum AST, ALT, and ALP activities and levels of total bilirubin and albumin were not changed.d.
Transporting agricultural products and the other material by the two-wheel-tractor (power-tiler)and trailer system may be one of its most widely used farming functions.The safety and hitching load for all the previaling performing conditions may be the general concern over the operation of the tiller-trailer system. In this study, a mathematical model to determine the static and dynamic forces excerting on the hitch point were developed . Based on the analysis of the model and the field measurements. the limiting hitching load and critical slope were analyzed. The results of the study are summarized as follows ; 1) The limit angle of slope land for the safety steering that two-wheel tractor-single axle trailer system was able to transport agricultural products was the direct angle (${\gamma}$) = 8 ; the cross angle$\beta$) 15 ; and it was decreased in accordance with the increase of carrying load ($W_4). 2) The critical velocity for safe operation in case of running on downward hill road was about 1.08m/sec. 3) The limiting carrying load for the safe steering was W$_4$=600kg. The degree of the safe steering for different braking methods was given in order as follows ; Simulataneous braking the tractor and trailer , braking the trailer only, and braking tractor only. 4) Among the three components of impact loads excerting on the hitch point, the component in the lateral direction ($P_{Vy}$) was near zero in spite of increase of hitching load ($W_4) , while the components in the other two mutually perpedicular directions ($P_{Vx}$ and ($P_{Vz}$) ) had larger values in horizontal plane than those in the slope lands. 5) Moment of forces on the lateral direction (M$y$) had the largest value among the three components of impact moment acting on the hitch point, however all the components were sharply increased in accordance with the increase of hitching loads ($W_4. Three components of the moment were the negative values.
Kim, Kook-Han;Jung, Eun-Jung;Im, Ha-Na;Lelie, Daniel Van Der;Kim, Eunice Eun-Kyeong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.1
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pp.43-47
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2008
The nickel and cobalt resistance of Cupriavidus metallidurans CH34 is mediated by the CnrCBA efflux pump encoded by the cnrYHXCBAT metal resistance determinant. The products of the three genes cnrYXH transcriptionally regulate expression of cnr. CnrY and CnrX are membrane-bound proteins, probably functioning as anti-sigma factors, whereas CnrH is a cnr-specific extracytoplasmic functions (ECF) sigma factor. The periplasmic domain of CnrX (residues 29-148) was cloned as a N-terminal His-tagged protein, expressed in Escherichia coli, and purified using affinity chromatography and gel filtration. The molecular mass was estimated to be about 13.6kDa by size exclusion chromatography, corresponding to a monomer. The tetragonal bipyramid crystals were obtained by mixing an equal volume of protein in 50mM Tris-HCl, pH 7.5, 1% glycerol, 100mM NaCl, 1mM DTT, and the reservoir solution of 15% w/v PEG 2000, 100mM lithium chloride at 277K in 2-4 days using hanging drop vapor diffusion. The protein concentration was 24mg/ml. The crystal that diffracted to $2.42{\AA}$ resolution belongs to space group $P4_1\;or\;P4_3$ with unit cell parameters of $a=b=32.14{\AA},\;c=195.31{\AA},\;{\alpha}={\beta}={\gamma}=90^{\circ}$, with one molecule of CnrX in the asymmetric unit.
Background: Toll-like receptors (TLRs) have been extensively studied in recent years. However, functions of these molecules in murine B cell biology are largely unknown. A TLR4 stimulant, LPS is well known as a powerful polyclonal activator for murine B cells. Methods: In this study, we explored the effect of a murine TLR9 stimulant, M6-395 (a synthetic CpG ODNs) on B cell proliferation and Ig production. Results: First, M6-395 was much more potent than LPS in augmenting B cell proliferation. As for Ig expression, M6-395 facilitated the expression of both TGF-${\beta}1$-induced germ line transcript ${\alpha}$ ($GLT{\alpha}$) and IL-4-induced $GLT{\gamma}1$ as levels as those by LPS and Pam3CSK4 (TLR1/2 agonist) : a certain Ig GLT expression is regarded as an indicative of the corresponding isotype switching recombination. However, IgA and IgG1 secretion patterns were quite different--these Ig isotype secretions by M6-395 were much less than those by LPS and Pam3CSK4. Moreover, the increase of IgA and IgG1 production by LPS and Pam3CSK4 was virtually abrogated by M6-395. The same was true for the secretion of IgG3. We found that this unexpected phenomena provoked by M6-395 is attributed, at least in part, to its excessive mitogenic nature. Conclusion: Taken together, these results suggest that M6-395 can act as a murine polyclonal activator but its strong mitogenic activity is unfavorable to Ig isotype switching.
Kim, Hee-Jung;Jo, Cheor-Un;Kim, Tae-Hoon;Kim, Dong-Sup;Park, Moon-Young;Byun, Myung-Woo
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.38
no.5
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pp.684-690
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2006
Eriobotrya japonica has been used as a folk medicine for treatment of skin diseases, inflammation, coughing, phlegm, and ulcers in Korea and other Asian countries. In a search for possible bioactive agents from natural sources, we found that the methanolic extracts from various parts of E. japonica showed moderate antioxidative and antimicrobial activities in several in vitro bioassay systems. Additionally, the respective parts of E. japonica were irradiated at 20 kGy to investigate the effects of irradiation. Gamma irradiation of E. japonica extracts removed the deep greenish color without affecting its natural biological activities such as its antioxidative and antimicrobial properties. Based on these findings, the methanolic extracts of this plant source may be not affected by gamma irradiation as its bioactive constituents may be insensitive to this irradiation. Moreover, the methanolic extract of E. japonica may serve as a good natural resource for beneficial functions in food and other related industries.
Kim, Kyoung-Ran;Byun, Hae-Jung;Cho, Hyun-Nam;Kim, Jung-Hyun;Yang, Seun-Ah;Jhee, Kwang-Hwan
Journal of Life Science
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v.21
no.1
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pp.119-126
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2011
There is a growing recognition of the significance of $H_2S$ as a biological signaling molecule involved in vascular and nervous system functions. In mammals, two enzymes in the transsulfuration pathway, cystathionine ${\beta}$-synthase (CBS) and cystathionine ${\gamma}$-lyase (CGL), are believed to be chiefly responsible for $H_2S$ biogenesis. Genetic inborn error of CGL leads to human genetic disease, cystathioninuria, by accumulating cystathionine in the body. This disease is secondarily associated with a wide range of diseases including diabetes insipidus and Down's syndrome. Although the human CGL (hCGL) overexpression is essential for the investigation of its function, structure, reaction specificity, substrate specificity, and protein-protein interactions, there is no clear report concerning optimum overexpression conditions. In this study, we report a detailed analysis of the overexpression conditions of the hCGL using a bacterial system. Maximum overexpression was obtained in conditions of low culture temperature after inducer addition, performing low aeration during overexpression, and using a low concentration inducer (0.1 mM, IPTG) for induction. Expressed hCGL was purified by His-tag affinity column chromatography and confirmed by Western blot using hCGL antibody and enzyme activity analysis. We also report that the His tag with TEV site attached protein exhibits 76% activity for ${\alpha}-{\gamma}$ elimination reaction with L-cystathionine and 88% for ${\alpha}-{\beta}$ elimination reaction with L-cysteine compared to those of wild type hCGL, respectively. His tag with TEV site attached protein also exhibits a 420 nm absorption maximum, which is attributed to the binding cofactor, pyridoxal 5'-phosphate (PLP).
MicroRNAs (miRNAs) have been reported to be involved in many neurodegenerative diseases. The present study focused on the role of hsa-miR-144-3p in one of the neuro-degenerative diseases, Parkinson's disease (PD). Our study showed a remarkable down-regulation of miR-144-3p expression in 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine (MPTP)-treated SH-SY5Y cells. MiR-144-3p was then overexpressed and silenced in human SH-SY5Y cells by miRNA-mimics and miRNA-inhibitor transfections, respectively. Furthermore, ${\beta}$-amyloid precursor protein (APP) was identified as a target gene of miR-144-3p via a luciferase reporter assay. We found that miR-144-3p overexpression significantly inhibited the protein expression of APP. Since mitochondrial dysfunction has been shown to be one of the major pathological events in PD, we also focused on the role of miR-144-3p and APP in regulating mitochondrial functions. Our study demonstrated that up-regulation of miR-144-3p increased expression of the key genes involved in maintaining mitochondrial function, including peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ coactivator-$1{\alpha}$(PGC-$1{\alpha}$), nuclear respiratory factor 1 (NRF-1) and mitochondrial transcription factor A (TFAM). Moreover, there was also a significant increase in cellular ATP, cell viability and the relative copy number of mtDNA in the presence of miR-144-3p overexpression. In contrast, miR-144-3p silencing showed opposite effects. We also found that APP overexpression significantly decreased ATP level, cell viability, the relative copy number of mtDNA and the expression of these three genes, which reversed the effects of miR-144-3p overexpression. Taken together, these results show that miR-144-3p plays an important role in maintaining mitochondrial function, and its target gene APP is also involved in this process.
Effective dose conversion coefficients from unit activity radionuclides contaminated on the ground surface were calculated by using MCNP4A rode and male/female anthropomorphic phantoms. The simulation calculations were made for 19 energy points in the range of 40 keV to 10 MeV. The effective doses E resulting from unit source intensity for different energy were compared to the effective dose equivalent $H_E$ of previous studies. Our E values are lower by 30% at low energy than the $H_E$ values given in the Federal Guidance Report of USEPA. The effective dose response functions derived by polynomial fitting of the energy-effective dose relationship are as follows: $f({\varepsilon})[fSv\;m^2]=\;0.0634\;+\;0.727{\varepsilon}-0.0520{\varepsilon}^2+0.00247{\varepsilon}^3,\;where\;{\varepsilon}$ is the gamma energy in MeV. Using the response function and the radionuclide decay data given in ICRP 38, the effective dose conversion coefficients for unit activity contamination on the ground surface were calculated with addition of the skin dose contribution of beta particles determined by use of the DOSEFACTOR code. The conversion coefficients for 90 important radionuclides were evaluated and tabulated. Comparison with the existing data showed that a significant underestimates could be resulted when the old conversion coefficients were used, especially for the nuclides emitting low energy photons or high energy beta particles.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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