본 연구에서는 돼지 축사 근처 하수 오물에서 분리된 그람 음성균이자 항생제 내성을 쉽게 획득하여 병원성을 띄는 균주인 Citrobacter freundii를 host로 하는 박테리오파지의 유전체 분석을 수행하였다. 본 박테리오파지는 G + C 비율이 42.65%이며, 50,339 bp로 구성된 유전체 DNA를 지니고 있었다. 이러한 유전체 DNA에서 89개의 단백질 코딩 유전자가 확인 되었으며, 이 중 55개의 유전자는 BLASTP 분석으로부터 기능을 가지고 있다고 추정되었다. 또한 RNA는 확인되지 않았다.
Pseudomonas tolaasii 6264 is a representative strain that causes bacterial blotch disease on the cultivated oyster mushroom, Pleurotus ostreatus. Bacteriophages are able to sterilize the pathogenic P. tolaasii strains, and therefore, they can be applied in creating disease-free mushroom cultivation farms, through a method known as "phage therapy". For successful phage therapy, the characterization of phage-resistant strains is necessary, since they are frequently induced from the original pathogenic bacteria in the presence of phages. When 10 different phages were incubated with P. tolaasii 6264, their corresponding phage-resistant strains were obtained. In this study, changes in pathogenic, genetic, and biochemical characteristics as well as the acquired phage resistance of these strains were investigated. In the phylogenetic analyses, all phage-resistant strains were identical to the original parent strain based on the sequence comparison of 16S rRNA genes. When various phage-resistant strains were examined by three different methods, pitting test, white line test, and hemolytic activity, they were divided into three groups: strains showing all positive results in three tests, two positive in the first two tests, and all negative. Nevertheless, all phage-resistant strains showed that their pathogenic activities were reduced or completely lost.
The edible coating system, consisting of gelatin and bacteriophages, has been developed to enhance the microbial safety of wild vegetables. Newly isolated Escherichia coli phage EP and Staphylococcus aureus phage SP were loaded into the gelatin coating solutions. The phages remained significantly stable for up to 3 days, respectively, and exhibited rapid antibacterial capacity within 2 h of coating application (p < 0.05). The developed coating was applied to bracken and exhibited antibacterial efficacy against E. coli and S. aureus within 6 h (1.9-log CFU/mL and 1.5-log CFU/mL). Furthermore, the coated bracken significantly prevented weight loss and maintained firmness for 10 days (p < 0.05). Consequently, gelatin-based edible coatings containing phages have the potential as an antibacterial packaging strategy.
Consumers and industry experts frequently have negative perceptions of most chemical preservatives. Although most people concede that they cannot resolve global food waste issues without preservatives, they prefer products without chemical preservatives. Numerous emerging technologies is now surpassing conventional methods for mitigating microbial food deterioration in response to consumer demand and fundamental health and safety considerations, including biological antimicrobial systems such as using food-grade microorganisms and their metabolites primarily originating from microorganisms, plants, and animals. Microbial compounds, including bacteriocins, bacteriophages, and anti-fungal agents, plant extracts such as flavonoids and essential oils; and animal-originated compounds, such as lysozyme, chitosan, and lactoferrin, are considered some of the major bio-preservatives. These natural compounds can be used alone or with other preservatives to improve food safety. Hence, the use of microbes or their metabolic byproducts to extend the shelf life of foods while maintaining safety standards is known as bio-preservation. To manufacture and consume foods in a safe condition, this review primarily aims to broaden knowledge amongst industry professionals and consumers regarding bio-preservation techniques, bio-preservatives, their classifications, and distinctive mechanisms to enhance food safety.
Prokaryotes encode clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR) arrays and CRISPR-associated (Cas) genes as an adaptive immune machinery. CRISPR-Cas systems effectively protect hosts from the invasion of foreign enemies, such as bacteriophages and plasmids. During a process called 'adaptation', non-self-nucleic acid fragments are acquired as spacers between repeats in the host CRISPR array, to establish immunological memory. The highly conserved Cas1-Cas2 complexes function as molecular recorders to integrate spacers in a time course manner, which can subsequently be expressed as crRNAs complexed with Cas effector proteins for the RNA-guided interference pathways. In some of the RNA-targeting type III systems, Cas1 proteins are fused with reverse transcriptase (RT), indicating that RT-Cas1-Cas2 complexes can acquire RNA transcripts for spacer acquisition. In this review, we summarize current studies that focus on the molecular structure and function of the RT-fused Cas1-Cas2 integrase, and its potential applications as a directional RNA-recording tool in cells. Furthermore, we highlight outstanding questions for RT-Cas1-Cas2 studies and future directions for RNA-recording CRISPR technologies.
Youbin Choi;Woongji Lee;Joon-Gi Kwon;Anna Kang;Min-Jin Kwak;Ju-Young Eor;Younghoon Kim
Journal of Animal Science and Technology
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제66권1호
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pp.57-78
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2024
In a global context, bacterial diseases caused by pathogenic bacteria have inflicted sustained damage on both humans and animals. Although antibiotics initially appeared to offer an easy treatment for most bacterial infections, the recent rise of multidrug-resistant bacteria, stemming from antibiotic misuse, has prompted regulatory measures to control antibiotic usage. Consequently, various alternatives to antibiotics are being explored, with a particular focus on bacteriophage (phage) therapy for treating bacterial diseases in animals. Animals are broadly categorized into livestock, closely associated with human dietary habits, and companion animals, which have attracted increasing attention. This study highlights phage therapy cases targeting prominent bacterial strains in various animals. In recent years, research on bacteriophages has gained considerable attention, suggesting a promising avenue for developing alternative substances to antibiotics, particularly crucial for addressing challenging bacterial diseases in the future.
To gain insight into the structure and function of repressor proteins of bacteriophages of gram-positive bacteria, repressor of temperate Staphylococcus aureus phage ${\phi}11$ was undertaken as a model system here and purified as an N-terminal histidine-tagged variant (His-CI) by affinity chromatography. A ~19 kDa protein copurified with intact His-CI (~ 30 kDa) at low level was resulted most possibly due to partial cleavage at its Ala-Gly site. At ~10 nM and higher concentrations, His-CI forms significant amount of dimers in solution. There are two repressor binding sites in ${\phi}11$ cI-cro intergenic region and binding to two sites occurs possibly by a cooperative manner. Two sites dissected by HincII digestion were designated operators $O_L$ and $O_R$, respectively. Equilibrium binding studies indicate that His-CI binds to $O_R$ with a little more strongly than $O_L$ and binding species is probably dimeric in nature. Interestingly His-CI binding affinity reduces drastically at elevated temperatures ($32-42^{\circ}C$). Both $O_L$ and $O_R$ harbor a nearly identical inverted repeat and studies show that ${\phi}11$ repressor binds to each repeat efficiently. Additional analyses indicate that ${\phi}11$ repressor, like $\lambda$ repressor, harbors an N-terminal domain and a C-terminal domain which are separated by a hinge region. Secondary structure of ${\phi}11$ CI even nearly resembles to that of $\lambda$ phage repressor though they differ at sequence level. The putative N-terminal HTH (helix-turn-helix) motif of ${\phi}11$ repressor belongs to the HTH -XRE-family of proteins and shows significant identity to the HTH motifs of some proteins of evolutionary distant organisms but not to HTH motifs of most S. aureus phage repressors.
Objective: The ecosystem of an animal farm is composed of various elements, such as animals, farmers, plants, feed, soil, and microorganisms. A domesticated animal's health is largely connected with the reservoir of bacteria and viruses in animal farms. Although a few studies have focused on exploring the gut microbiome of animals, communities of microbiota and viruses in feedlots have not been thoroughly investigated. Methods: Here, we collected feces and dust samples (4 groups: cattle feces, C_F; horse feces, H_F; cattle dust, C_D; and horse dust, H_D) from cattle and horse farms sharing the same housing and investigated their microbiome/virome communities by Illumina sequencing. Results: Dust groups (C_D and H_D) showed higher microbial diversity than feces groups (C_F and H_F) regardless of animal species. From the microbial community analysis, all the samples from the four groups have major phyla such as Proteobacteria (min 37.1% to max 42.8%), Firmicutes (19.1% to 24.9%), Bacteroidetes (10.6% to 22.1%), and Actinobacteria (6.1% to 20.5%). The abundance of Streptococcus, which commonly recognized as equine pathogens, was significantly higher in the horse group (H_D and H_F). Over 99% among the classified virome reads were classified as Caudovirales, a group of tailed bacteriophages, in all four groups. Foot-and-mouth disease virus and equine adenovirus, which cause deadly diseases in cattle and horse, respectively, were not detected. Conclusion: Our results will provide baseline information to understand different gut and environmental microbial ecology between two livestock species.
Salmonella infections in livestock industry cause various problems such as worsening animal welfare and productivity, damaging consumer confidence in the food safety of animal products. Chicken meat and eggs are known as major source of pathogen causing human foodborne infections. Therefore food safety concerns have prompted the poultry producers and governments to introduce the strategy and regulation to control these pathogens. Salmonella can persist for long periods of time in a wide range of spaces including feed bin, feed processing facilities, poultry farm, slaughterhouse, processing plants, etc. For the effective and constant Salmonella control, combination of pre-harvest, harvest and post-harvest measures should be considered comprehensively. The control measures would be most effective at farm level where the contamination initiates. Transmission of pathogen from feed origin to the live poultry and finally to the products was proven already. To control bacteria in the feed ingredients and formula feed, thermal processing, irradiation or chemical treatment may be applied. Chemical treatments to inhibit Salmonella in the feed involve the use of products containing organic acids, formaldehyde, or a combination of such compounds. However, recontamination which might occur during storage and transport process and/or by other various factors should always be under control and eliminated. Feed additives used to control Salmonella in birds' gastrointestinal track can be of various types, including prebiotics, probiotics, organic acids and bacteriophages. Although their mode of action varies, they ultimately inhibit the colonization of Salmonella in the gut and improve the performance of birds. This review describes the strategies that could be adapted to the management of feedstuffs and the use of feed additives in pre-harvest stage to control Salmonella contamination in poultry farming.
Lactobacillus casei에 감염하는 독성 phage중 각 분류꾼을 대표하는 5종의 phage (J1, TK93, K1, PD 5 빛 CP 1)와 l 종의 용원 phage (${\phi}$ 1043) 의 핵산의 특성을 바교 검토하였다. 실험한 6 종의 phage는 모두 double S stranded DNA를 갖고 있였으며 J1. TK93, K1 및 ${\phi}$ 1043 DNA의 크기는 약 42Kb, PD5 와 CP1 DNA는 140K Kb정도로 서로 비슷하였다. EcoR 1으로 절단시 J1, TK93, K1, PD5, CP1 및 ${\phi}$1043은 각각 13, 13. 11, 14, 14와 12개의 절편을 갖는 특징적인 절단양식을 보여주었다. J1, TK93 및 ${\phi}$ 1043 DNA에는 cohesive end가 존재 하였고 K1, PD5 빛 CP1 DNA에는 없는 것으로 사료되었다. J1과 TK93 DNA의 제한효소 지도를 작성하여 비교 검토하였으며 이상의 결과로부터 진화적 유연관계를 검토하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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