Li, Ning;Yang, Peilong;Wang, Yaru;Luo, Huiying;Meng, Kun;Wu, Nigfeng;Fan, Yunliu;Yao, Bin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권3호
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pp.410-416
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2008
The gene SfXyn10, which encodes a protease-resistant xylanase, was isolated using colony PCR screening from a genomic library of a feather-degrading bacterial strain Streptomyces fradiae var. k11. The full-length gene consists of 1,437bp and encodes 479 amino acids, which includes 41 residues of a putative signal peptide at its N terminus. The amino acid sequence shares the highest similarity (80%) to the endo-1,4-${\beta}$-xylanase from Streptomyces coelicolor A3, which belongs to the glycoside hydrolase family 10. The gene fragment encoding the mature xylanase was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3). The recombinant protein was purified to homogeneity by acetone precipitation and anion-exchange chromatography, and subsequently characterized. The optimal pH and temperature for the purified recombinant enzyme were 7.8 and $60^{\circ}C$, respectively. The enzyme showed stability over a pH range of 4.0-10.0. The kinetic values on oat spelt xylan and birchwood xylan substrates were also determined. The enzyme activity was enhanced by $Fe^{2+}$ and strongly inhibited by $Hg^{2+}$ and SDS. The enzyme also showed resistance to neutral and alkaline proteases. Therefore, these characteristics suggest that SfXyn10 could be an important candidate for protease-resistant mechanistic research and has potential applications in the food industry, cotton scouring, and improving animal nutrition.
Background : Glycopeptide antibiotics are the only drugs for treatment of infections due to beta-lactam-resistant Gram-positive bacteria. As the incidence of infection and colonization with vancomycin-resistant enterococci(VRE) rapidly increases, the hospital infection control practices advisory committee(HICPAC) recommends prudent vancomycin use to detect, prevent and control infection and colonization with VRE. Methods : The inpatients admitted from September to December, 1996 in Pusan National University Hospital, with Gram-positive bacterial infections were evaluated retrospectively to see whether the administrations of glycopeptide antibiotics were appropriate or not, upon comparison with the recommendations for preventing the spread of vancomycin resistance by HICPAC. Results : Teicoplanin has been chosen more frequently than vancomycin of the glycopeptide antibiotics. The indications of administration of glycopeptides in patients with pneumonia, wound infections, sepsis, and in febrile or neutropenic patients with malignancies were appropriate, but the use of glycopeptides for elimination of merely colonized bacteria in the oral cavity could not be excluded. Inappropriate use of glycopeptides was 10.6%, and inappropriately long-term use without positive culture for beta-lactam-resistant Gram-positive organisms was about 40% of total days of drug use. Conclusion : It seems essential for the quality assurance committee to make a plan in teaching the HICPAC recommendations to the medical practitioners who prescribed the glycopeptides inappropriately or used for irrelevantly long to his patient, monitor and survey their use of glycopeptides prospectively and periodically, and if there are repeated inappropriate prescriptions, a certain penalty would be given to the practitioners.
The present research work was conducted to evaluate the beneficial effects as well as the safety aspects of lactobacilli as probiotic. Lactobacilli were isolated from poultry faecal samples, feed samples and from some known preparations procured from poultry feed manufacturers. L. acidophilus and L. sporogenes were tested for the antibacterial activity against four poultry pathogens viz. Escherichia coli, Salmonella spp., Proteus spp. and Pseudomonas aeruginosa. Cell free supernatant (CFS) of L. acidophilus exhibited significantly higher antibacterial activity against Salmonella spp. at original pH (4.50${\pm}$0.02). At the adjusted pH (6.50${\pm}$0.02) significantly higher antibacterial activity was recorded against indicator organism except for P. aeruginosa. Likewise, L. sporogenes exhibited similar antibacterial activity at original as well as adjusted pH except for E. coli. Antibacterial activity against E. coli was significantly higher at adjusted pH than at original pH of CFS. The competitive exclusion of E. coli by lactobacilli over the intestinal epithelial cells (IEC) was checked. L. acidophilus strain I, which was of poultry origin, exhibited maximum attachment over IEC as compared to other three strains of non-poultry origin viz. L. acidophilus strain II, L. sporogenes strain I and II. Overall, L. acidophilus exhibited higher competitive exclusion as compared to L. sporogenes. All the lactobacilli of poultry origin were most sensitive to penicillin G, amoxycillin, ampicillin and chloramphenicol, least sensitive to sulphamethizole, ciprofloxacin, neomycin, norfloxacin and pefloxacin and resistant to metronidazole and nalidixic acid. The isolates from probiotic preparations were most sensitive to ampicillin, amoxycillin and tetracycline, least sensitive to sulphamethizole, norfloxacin, neomycin and ceftriazone and resistant to nalidixic acid and metronidazole. Eight of the multiple drug resistant lactobacilli isolates were studied for the presence of plasmids. Plasmids could be extracted from six isolates of lactobacilli. These plasmids could be responsible for bacteriocin production or for antibiotic resistance of the strains. The lactobacilli need further studies regarding their safety for use in the probiotic preparations.
역병에 저항성인 PI201232와 더뎅이병 저항성인 PI271322와 PI163192를 교배하여 각 병해에 대한 저항성과 두가지 병해 저항성간의 유전적 관계를 검토하였다. 더뎅이병균 race 3에 대한 PI271322의 비과민반응형 저항성은 양적으로 유전하였다. PI201232의 역병에 대한 저항성은 2개의 우성유전자에 가까운 양식으로 유전하였다. PI271322의 더뎅이병균 race 1에 대한 과민반응형 저항성은 한개의 우성유전자 양식으로 유전하였다. PI163192는 더뎅이병균 race에 비특이적으로 저항성이었으며 우성효과가 큰 양적유전 양식으로 유전하였다. 더뎅이병균에 대한 저항성은 역병에 대한 저항성과는 독립적으로 유전하였다.
Choi, Bo Mi;Son, Seong Wan;Park, Chan Kwon;Lee, Sang-Hoon;Yoon, Hyung Kyu
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제78권3호
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pp.289-292
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2015
Lemierre syndrome (LS) is a septic thrombophlebitis of the internal jugular vein (IJV) following an oropharyngeal infection. LS is commonly caused by normal anaerobic flora and treated with appropriate antibiotics and anticoagulation therapy. Although the incidence of disease is very rare, 15% cases of LS are fatal even in the antibiotic era because of disseminated septic thromboemboli. We reported a case of extensive bilateral LS due to methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis in a 63-year-old female with lung adenocarcinoma. Initial examination revealed a retropharyngeal abscess; hence, intravenous ceftriaxone and steroid were initiated empirically. However, pulmonary thromboembolism developed and methicillin-resistant S. epidermidis was identified in the bacterial culture. Despite intensive antibiotic and anticoagulation therapies, extensive septic thrombophlebitis involving the bilateral IJV and superior vena cava developed. Adjunctive catheter-directed thrombolysis and superior vena cava stenting were performed and the patient received antibiotic therapy for an additional 4 weeks, resulting in complete recovery.
Due to wide abuse of antibiotics both in human and livestock use, the advent and spread of multidrug resistant (MDR) pathogens becomes a serious health problem all over the world. Since the development of new antibiotics is at a standstill in pharmaceutical industry, the choice of therapeutic antibiotics is getting narrower. In this study, in an effort to search new antibiotics, the antimicrobial activity of Paenibacillus DY1 isolated from Korean soil was characterized on its growth inhibition spectrum against various health threatening MDR strains, with its stability and chemical structure. Extracellular culture filtrate of Paenibacillus DY1 effectively inhibits the growth of all the tested MDR enteropathogenic Eshcherichia coli, enterohemolytic E. coli, and enterotoxigenic E. coli strains, at a similar level to that on the nonresistant control E. coli strains. It showed significant growth inhibition effect against the causative agents of class one legal communicable disease, MDR Salmonella typhi, MDR Salmonella paratyphi A, food poisoning bacteria, MDR Salmonella typhimurium, and other MDR Salmonella spp. The growth of all of 10 different MDR Shigella spp. strains and 6 different Vibrio spp. strains tested was also inhibited. The antimicrobial activity of Paenibacillus DY1 was well preserved after heat treatment, and was also stable in both alkaline and acidic environment. The antimicrobial activity was partially purified with Diaion HP20 column and TLC. By NMR study, the putative structure of the activity was postulated as an alkane having hydroxyl groups.
In Korea, a local soybean (Glycine max) genotype 56l. was found to be strongly resistant to a virulent bacterial strain of a Pseudomonas sp. SN239. Specific genes involved in the resistance of the soybean genotype 561 were identified and the pattern of gene expression against the Pseudomonas infection was analyzed using differential-display reverse transcription PCR (DDRT-PCR). More than 126 cDNA fragments representing mRNAs were induced within 48 hours of bacteria inoculation. Among them, 28 cDNA fragments were cloned and sequenced. Twelve differentially displayed clones with open reading frames had unknown functions. Sixteen selected cDNA clones were homologous to known genes of other organisms. Some of the identified cDNAs were pathogenesis-related (PR) genes and PR-like genes. These cDNAs included a putative calmodulin-binding protein; an endo-l,3-1,4-$\bate$-D-glucanase; a $\bate$-1,3-endoglucanase; a $\bate$-1,3-exoglucanase; a phytochelatin synthetase-like gene; a thiol protease; a cycloartenol synthase; and a putative receptor-like serine/threonine protein kinase. Among them, four genes were found to be putative PR genes induced significantly by the Pseudomonas infection. These included a calmodulin-binding protein gene, a $\bate$-1,3-endoglucanase gene, a receptor-like serine/threonine protein kinase gene, and pS321 (unknown function). These results suggest that the differentially expressed genes may mediate the strong resistance of soybean 561 to the strain SN239 of Pseudomonas sp.
You Yong Ouk;Yu Hyeon Hee;Jeon Byung Hun;Jeong Seung Il;Cha Jung Dan;Kim Shin Moo;Kim Kang Ju
동의생리병리학회지
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제17권2호
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pp.574-579
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2003
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has been emerging worldwide as one of the most important hospital and community pathogens. Therefore, new agents are needed to treat the MRSA. In the present study, we investigated antimicrobial activity of ethyl acetate, methanol, and water extracts of Curcuma longa L. (C. longa) aganist clinical isolates of MRSA. The ethyl acetate extract of C. long a demonstrated a higher antibacterial activity than the methanol extract or water extract. Since the ethyl acetate extract was more active than other extracts, we examined whether ethyl acetate extract may restore the antibacterial activity of β-lactams and alter the adhesion and invasion of MRSA to human mucosal fibroblasts (HMFs). In the checkerboard test, ethyl acetate extract of C. longa markedly lowered the MICs of ampicillin and oxacillin against MRSA. In the bacterial adhesion and invasion assay, MRSA intracellular invasion were notably decreased in the presence of 0.125 - 2 mg/ml of C. longa extract compared to the control group. These results suggest that ethyl acetate extract of C. longa may have antibacterial activity and the potential to restore the effectiveness of β-lactams against MRSA, and inhibit the MRSA adhesion and invasion to HMFs.
본 연구에서는 한국의 닭에서 분리된 E. coli 균주들로부터 퀴놀론계 항생제 내성을 나타내는 균주를 분리 동정하고 그 내성 기전과 유병률에 관하여 조사하였다. 또한 multilocus sequence typing (MLST)을 이용하여 E. coli 균주들의 분자생물학적 성상을 분석하였다. 항생제 감수성 테스트에서 63.5% (54/85) 의 E. coli 균주들에서 퀴놀론계 항생제 내성률을 보였다. 또한 퀴놀론계 항생제 내성을 보이는 54개 모두에서 gyrA 유전자의 sense mutations과 parC 유전자의 $57^{th}$, $80^{th}$, or $84^{th}$residues에서 점돌연변이를 관찰할 수 있었다. MLST를 통한 분석에서 E. coli ST는 parE 유전자의 염기치환과 깊은 상관관계를 보이는 것으로 관찰되었다. 이 결과들을 바탕으로 우리가 먹는 가축 및 가금류에 대한 무분별한 항생제 사용은 항생제 내성균의 증가와 유전변이를 초래함을 알 수 있었다. 따라서 식용 동물에 대한 지속적인 감시와 모니터링을 통하여 항생제 내성균의 확산방지를 통제하는 것이 필요할 것으로 사료된다.
Objectives In this study, we investigated the antimicrobial activity of a 70% ethanol extract of Maneung-hwan (MEH), which is prescribed by practitioners of oriental medicine for use against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Methods The antibacterial activity of MEH against MRSA strains was evaluated using the disc diffusion method, broth microdilution method (minimal inhibitory concentration, MIC), checkerboard dilution test, and time-kill test. The mechanism of action of MEH was investigated by bacteriolysis using detergents or ATPase inhibitors Additionally, mRNA and protein expression were investigated by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot assay, respectively. Results The MIC of MEH was 25~1,600 ㎍/mL against all the tested bacterial strains. We showed that MEH extract exerts strong antibacterial activity. In the checkerboard dilution test, the fractional inhibitory concentration index of MEH in combination with antibiotics indicated synergism or partial synergism against S. aureus. The time-kill study indicated that the growth of the tested bacteria was considerably inhibited after a 24-h treatment with MEH and selected antibiotics. To measure the cell membrane permeability, MEH (3.9 ㎍/mL) was combined with Triton X-100 (TX) at various concentrations N,N-dicyclohexylcarbodimide (DCCD) was also tested as an ATPase inhibitor. TX and DCCD cooperation against S. aureus exhibited synergistic action. Accordingly, the antimicrobial activity of MEH in the context of cell membrane rupture and ATPase inhibition was assessed. Additionally, the expression of genes and proteins associated with resistance was reduced after exposing MRSA to MEH. Conclusions These results suggest that MEH possesses antibacterial activity and acts as a potential natural antibiotic against MRSA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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