Jareonmit, Pechrada;Sajjaphan, Kannika;Sadowsky, Michael J.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권1호
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pp.169-178
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2010
The microbial community structure in Thailand soils contaminated with low and high levels of arsenic was determined by denaturing gradient gel electrophoresis. Band pattern analysis indicated that the bacterial community was not significantly different in the two soils. Phylogenetic analysis obtained by excising and sequencing six bands indicated that the soils were dominated by Arthrobacter koreensis and $\beta$-Proteobacteria. Two hundred and sixty-two bacterial isolates were obtained from arsenic-contaminated soils. The majority of the As-resistant isolates were Gramnegative bacteria. MIC studies indicated that all of the tested bacteria had greater resistance to arsenate than arsenite. Some strains were capable of growing in medium containing up to 1,500 mg/l arsenite and arsenate. Correlations analysis of resistance patterns of arsenite resistance indicated that the isolated bacteria could be categorized into 13 groups, with a maximum similarity value of 100%. All strains were also evaluated for resistance to eight antibiotics. The antibiotic resistance patterns divided the strains into 100 unique groups, indicating that the strains were very diverse. Isolates from each antibiotic resistance group were characterized in more detail by using the repetitive extragenic palindromic-PCR (rep-PCR) DNA fingerprinting technique with ERIC primers. The PCR products were analyzed by agarose gel electrophoresis. The genetic relatedness of 100 bacterial fingerprints, determined by using the Pearson product-moment similarity coefficient, showed that the isolates could be divided into four clusters, with similarity values ranging from 5-99%. Although many isolates were genetically diverse, others were clonal in nature. Additionally, the arsenic-resistant isolates were examined for the presence of arsenic resistance (ars) genes by using PCR, and 30% of the isolates were found to carry an arsenate reductase encoded by the arsC gene.
This study was conducted to monitor the antibiotics resistance of human-harmful bacteria isolated in the agricultural environment for hot peppers (Capsicum annuum) and tomato (Lycopersicon esculentum). As a result, we isolated 120 bacterial species (34 on fruits, 48 in soil, 21 in water, and 17 in manure), identified them with the 16S rRNA sequence, analyzed minimum inhibitory concentration (MIC) for 26 antibiotics using Sensititre ARIS Hi-Q system and then evaluated whether each bacterial genus acquired resistance for the tested antibiotics or not, according to the CLSI criteria. From difference in MIC between eco-friendly (EFM) and practical (PFM) cultivation farms, Klebsiella spp. isolated from EFM was resistant to ampicillin (AMP) and nalidixic acid (NAL), and that isolated from PFM was resistant to streptomycin (STR) and tetracycline (TET). Enterobacter spp. isolated from EFM was resistant to AMP and azithromycin (AZI), and that isolated from PFM was resistant to AMP, AZI, and STR. Meanwhile, Pseudomonas spp. isolated from EFM and PFM were all resistant to AMP, AZI, cefotaxime (FOT), cefoxitin (FOX), ceftriaxone (AXO), CHL, NAL, and STR. Staphylococcus spp. isolated from EFM and PFM were resistant to gentamycin (GEN), STR, and kanamycin (KAN), and in particular, that from EFM showed resistance for erythromycin (ERY). In conclusion, our study suggested that EFM lead STR antibiotics resistance for human-harmful bacteria to decrease, because only the bacteria isolated from hot pepper and tomato crop with PFM have showed resistance against STR antibiotics, regardless of bacterial genus.
Ralstonia solanacearum (Rs)에 의해 유발되는 풋마름병은 감자 재배 시 발병하는 주요 병 중의 하나이다. 감자에서 풋마름병 저항성관련 유전자를 찾기 위해 기존에 기능이 알려진 다른 가지과 작물의 기능 유사 유전체를 이용하여 StACRE (HM749652) 유전자를 분리하고 염기서열을 분석하였다. 분리한 StACRE의 발현양상을 분석하기 위해 병 저항성 유도 신호전달 물질인 SA와 풋마름병원균 Rs (KACC10722)를 처리한 감자에서 RNA를 추출하여 RT-PCR을 실시한 결과 이 유전자는 SA 처리에 의해 3시간 후부터, Rs에 의해서는 12시간 후부터 발현이 현저하게 증가하였다. 따라서, 감자에서 이 유전자의 생물학적인 기능을 분석하기 위해 Gateway System을 이용하여 과발현용 vector를 만든 후 과발현 형질전환 감자를 제작하고 풋마름병균인 Rs를 접종하여 병 저항성 기능을 검정 한 결과 대조구인 수미 감자에 비해 병 저항성이 증대하였다.
Ralstonia solanacearum에 의해 발생하는 토마토 풋마름병에 대하여 저항성 품종이나 육성계통을 선발하기 위하여 국립농업유전자원센터로부터 국내 유전자원을 분양받아 국내 병원균에 대한 저항성 여부를 평가하였다. 한국에서 분리된 R. solanacearum SL341 균주로 52개의 품종과 계통의 저항성을 Hawaii 7996 품종과 Moneymaker 품종을 각각 저항성, 감수성 대조품종으로 사용하여 저항성 반응을 평가하였다. 그 결과 32개의 품종이 감수성이며, 10개의 품종과 계통은 저항성이 고정되지 않은 품종으로 나타났다. 5개의 시판품종과 5개의 육성 계통이 저항성 반응을 보였다. 본 연구결과를 통해 5개의 육성 계통은 저항성/방어반응의 후속연구와 저항성 품종 육종에 활용할 수 있음을 제시한다.
Kim, Mu-Yong;Paek, Kyoung-Sook;Kim, In-Chull;Kwak, Jin-Hwan
Archives of Pharmacal Research
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제19권5호
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pp.400-405
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1996
In vitro studies were conducted to dertermine the frequency rate of spontaneous resistance to LB20304 and to dertermine whether cross-resistance to other antimicrobial agents develops. In eight strains of bacteria, the frequency of mutation to LB20304 at the concentrations of four and eight times the minimal inhibitory concentration(MIC) ranaged from less than 4.0 ${\times}$ $10^{-10}$ to 2.2 $\{times}$ $10^{-10}$ . These results were similar to those founf for other new fluoroquinolones. THe development of stepwise resistance was determined by repeated subculture in broth in the presence of increasing concentration of the compounds. Exposure of bacteria to increasing concentrations of LB20304 resulted in the selection of organisms with higher MICs. There were 4- to 128-fold increases in the MIC of LB20304 for bacterial strains of Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. However, those strains selected after repeated exposure were well within the susceptibility range for LB20304 except for Pseudomonas aeruginosa. The resistant isolates selected with LB20304 showed cross-resistance when tested against ciprofloxacin and vice versa.
근권 미생물을 대상으로 뿌리에서의 집락 형성 실험, 풋마름병 방제 효과 그리고 화학 농약에 대한 내성을 검정하여 SKU48-2 균주를 선발하였다. SKU48-2균주는 균체 현탁액$(10^8CFU/ml)$을 처리하였을 때 60%이상의 풋마름병 방제 효과를 나타내었으며, 형태적, 생화학적 특성과 16S rDNA sequence 분석 결과 Bacillus subtilis SKU48-2로 동정되었다. 선발 균주 SKU48-2는 화학 농약에 대해 강한 내성을 가져 토양 내 잔류 농약에 의해 영향을 받지 않을 뿐만 아니라, 화학 농약과의 혼용에 의해서 저농약 사용이 가능하고 미생물제제 단독 사용 시 보다 높은 방제 효과를 기대할 수 있다. SKU 48-2균주가 액상의 배양액 상태에서는 4주 만에 생균밀도가 급격히 감소한 반면, talc, vermiculite와 peat등의 담체 사용 시는 생균밀도가 6개월 간 유지됨이 확인되어 고형 제제화의 기초를 마련하였다.
벼 흰빛잎마름병의 저항성의 품종간 차이와 그 유전양식을 조사하여 저항성품종육성의 기초자료로 활용코저 몇 가지 시험을 수행하여 얻어진 결과는 다음과 같다. 1. 최고분얼기와 출수기때의 저항성정도는 품종에 따라 상이한 반응을 보였고 공시품종중에서 IR2061-465-1-5-5, IR2061-553-6-9, IR1561-228-3-3, 밀양 42호는 공시된 3균주에 대해 최고분얼기나 출수기에 모두 높은 저항성을 보였다. 2. 질적저항성이 동일한 품종군에 속하는 품종중에서도 저항성정도의 양적인 차이는 크게 인정되었고, 그 차는 품종군별로는 밀양 23호군에서 균주별로는 II 균군에서 크게 나타났다. 3. IR2061-465-1-5-5와 IR1561-228-3-3의 II균군에 대한 저항성의 유전은 $F_1,F_2$ 및 $F_3$ 세대의 분리양상으로 보아 $1\~2$개의 유전인자에 의해 저항성이 지배된다고느 보기 어렵고 상당수의 유전인자가 이에 관여하는 것으로 생각된다.
Bacterial leaf blight (BLB) caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) is one of the most serious threats to rice production. In this study, screening of rice for resistance to BLB was carried out at two different times and locations; that is, in a greenhouse during winter and in an open field during summer. The pathogenicity of Xoo race K1 was tested on 32 Korean rice cultivars. Inoculation was conducted at the maximum tillering stage, and the lesion length was measured after 14 days of inoculation. Five cultivars, Hanareum, Namcheon, Samgdeok, Samgang, and Yangjo, were found to be resistant in both the greenhouse and open-field screenings. Expression of the plant defense-related genes JAmyb, OsNPR1, OsPR1a, OsWRKY45, and OsPR10b was observed in resistant and susceptible cultivars by qRT-PCR. Among the five genes tested, only OsPR10b showed coherent expression with the phenotypes. Screening of resistance to Xoo in rice was more accurate when conducted in open fields in the summer cultivation period than in greenhouses in winter. The expression of plant defense-related genes after bacterial inoculation could give another perspective in elucidating defense mechanisms by using both resistant and susceptible individuals.
Kim, Young-Chang;Park, Yong-Jin;Ma, Kyung-Ho;Lee, Jung-Ro;Kim, Chang-Young;Choi, Jae-Eul;Kang, Hee-Kyoung
Plant Resources
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제7권3호
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pp.187-194
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2004
Sequence-tagged site (STS) markers tightly linked to the bacterial leaf blight (BLB) resistance genes, xa5, xa13 and Xa21, were used in this study. A survey was conducted to find polymorphisms between the resistant and susceptible germplasm in rice. 500 of Korean varieties and 100 of landraces were evaluated in this study. STS marker, RG207 was used to having xa5 resistance gene of rice germplasm. 27 varieties of Korean germplasm showed resistant for xa5 gene. The RG136 an xa-13 marker resulted in a single band of approximately 1kb in all the rice accessions studied. In order to detect polymorphism, digestion of the polymerase chain reaction (PCR) product was performed using a restriction enzyme Hinf Ⅰ. The resistant lines resulted in two bands 0.5kb on digestion with Hinf Ⅰ, while the same enzyme did not digest the PCR product of susceptible lines. No polymorphism was detected in Korean varieties and landraces, indicating that they probably do not contain xa13 gene. pTA248 an Xa-21 marker detected a band of 1kb in the resistant lines and bands of either 750bp or 700bp in the susceptible lines. Among germplasm tested, there are no varieties and landraces with Xa21 resistant gene. The results of the germplasm survey will be useful for the selection of parents in breeding programs aimed at transferring these bacterial blight resistance genes from one varietal background to another.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제35권2호
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pp.63-70
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2017
Native fluorescent pseudomonas bacteria were isolated from rhizosphere soil of mulberry and were evaluated against powdery mildew. In vitro conidial germination study showed significant (P<0.05) variation in conidial germination by bacterial strains Pf1 and Pf3. Mildew incidence was significantly varied due to treatment with various pseudomonas strains in vivo. Significantly (P<0.05) less mildew incidence was in plants treated with the bacterial strain Pf1 (9.11%) followed by Pf3 (13.48%) controlling 69.40% and 54.75% respectively compared with untreated control. Similarly, mildew severity was least (8.51%) in plants treated with strain Pf1 followed by Pf5 (9.23%) and Pf3 (9.72%) controlling the severity by 84.51%, 77.01% and 71.96% respectively compared with control. The bacterial strains significantly influenced biochemical constituents such as chlorophyll, protein and soluble sugar content of the mulberry leaf. Similarly, bacterial strains significantly increased the activity of the peroxidase (PO) and Polyphenol oxydase (PPO) activity from $7^{th}$ day up to the $28^{th}$ day after treatment. The strain Pf1, Pf3 and Pf5 exhibited a marked enhancement in the peroxidase at different periods of infection. Significant (P<0.01) negative correlation was found between powdery mildew severity with phenol content ($R^2=0.67$) as well as peroxidase ($R^2=0.92$) and polyphenol oxidase ($R^2=0.72$) activity thus confirms induction of systemic resistance in mulberry by pseudomonas bacteria. The study shows scope for exploration of rhizosphere fluorescent pseudomonas bacteria for induction of systemic resistance in mulberry to contain powdery mildew disease effectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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