• 제목/요약/키워드: avidin-biotin

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Dexamethasone 전처리후 Listeria monocytogenes를 인공감염시킨 랫드의 조직절편내 균체항원 동정 (Immunohistochemical identification of listeria monocytogenes antigen in tissue sections of experimentally infected rats after pretreatment with dexamethasone)

  • 서정향;김순복
    • 대한수의학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.91-98
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    • 1992
  • Listeria monocytogenes antigens were detected with the avidinbiotinperoxidase complex(ABPC) method in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues from experimentally infected rats, mice and guinea pigs. The anti-Lirteria monocytogenes serum used as first antibody was prepared by immunizing rabbits with Listeria monocytogenes serotype 1/2a. Rats, mice and guinea pigs that had been given inoculation of L monocytogenes(serotype 4b, Scott A strain) via intraperitoneally allotted to 3 groups. Rats were pretreated with the dexamethasone(DM-rats) for 7 consecutive days, mice and guinea pigs were inoculated intraperitoneally with L. monocytogenes At necropsy white necrotic foci of the liver, spleen and kidney were seen in mice and DM-rats, whereas not in guinea pigs. Organisms stained by the ABPC method were identified as pleomorphic dark brown staining structures in the livers, spleens and kidneys of mice and DM-rats. They were present in high numbers in center and peripherial regions of necrobiotic and necrotic foci of the liver and spleen as well as in glomerulus of the renal cortex. and liable tool for confirmative diagnosis of these bacterial diseases.

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아프리카 발톱두꺼비의 소화관내분비세포에 관한 면역조직화학적 연구 (Immunohistochemical study of the endocrine cells of the gastrointestinal mucosa of the African clawed toad, Xenopus laevis)

  • 이형식;이재현
    • 대한수의학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.9-13
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    • 1997
  • ABC법에 의해 면역조직화학적으로 아프리카발톱두꺼비(Xenopus laevis)의 위장관내분비세포를 관찰하였던 바, neurotensin 면역반응세포는 중등도로 소장에서 약하게 반응하였다. 구형의 gastrin releasing peptide(GRP) 면역반응세포는 위에서 위저부의 상피 세포 바로 아래와 유문부선에서 다수로, 소장에서는 가는 방추형으로 극소수 또는 중등도로 분포하였다. 한편 substance P 면역반응세포는 방추형으로 장상피에서 관찰되었다. 그러나 secretin, motilin, met-enkephalin-8 (M-Enk) 및 polypeptide YY(PYY) 면역반응세포는 전체 소화관에서 관찰할 수 없었다.

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Development of Bioluminescence Immunoassay Using Photoprotein, Aequorin and Site-directed Immobilization

  • Shim, Yu-Nee;Rhee, In-sook
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제24권1호
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    • pp.70-74
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    • 2003
  • The heterogeneous bioluminescence immunoassay for digoxin was developed using photoprotein, native aequorin as a label and the site-directed immobilization technique based on avidin/biotin interaction. Aequorin is a bioluminescence protein, originally isolated from the jellyfish Aequoria Victoria and an attractive label in analytical applications because of sensitive detection due to virtually no background bioluminescent signal. Digoxin is a cardioactive drug, and its therapeutic level in serum is at low concentration with very narrow therapeutic index. The aequorin-digoxigenin conjugates were synthesized by the N-hydroxysuccinimide ester method and characterized in terms of bioluminescent residual activity. The resulting dose-response curve shows that the detection limit is $1.0\;{\times}\;10^{-10}\;M$ and a dynamic range is three orders of magnitude, which was obtained by $1.0\;{times}\;10^{-10}\;M$ conjugate and 0.9 μg/mL anti-digoxin antibody. Three structurally similar molecules to digoxin were examined for their cross-reactivity. None of these three compounds showed any crossreactivity with digoxin antibody employed in this study. Standard amounts of digoxin corresponding to the therapeutic range were spiked into the each serum solution. Study of the serum matrix effect indicated that correlation coefficient shows good agreement between luminescence light intensity between in buffer and in serum.

Monoclonal anticytokeratin antibodies 에 의한 후두편평세포암의 발현양상 (Staining patterns of squamous cell carcinomas of the larynx by monoclonal anti-cytokeratin antibodies)

  • 도남용;전세영;이성재;최봉남
    • 대한기관식도과학회:학술대회논문집
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    • 대한기관식도과학회 1993년도 제27차 학술대회 초록집
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    • pp.88-88
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    • 1993
  • 현재 악성종양의 조직학적 진단에 면역조직화학반응의 검토가 많이 사용되는데 정상상피가 암으로의 진행시 점막상피세포의 주구성 단백성분에 있는 cytokeratin의 발현성에 변화가 일어난다고 알려져 있다. 이 cytokeratin은 현재 19종의 subclass가 알려져 있는데 각 subclass에 대응하는 항체를 이용하여 후두암세포의 기원을 알고 암조직의 분화도를 판정하고자 본 연구를 시행하였다. 연구방법은 정상성대조직 5예, 성대에 국한된 편평세포암 22예를 monoclonal anti-ck Ab와 polyclonal anti-ck Ab를 사용, Avidin-Biotin Peroxidase Complex method로 면역조직화학적 염색을 시행하였다. 그결과 정상후두상피에서 저분자량의 keratin은 표층을 제외한 심층부에서 양성반응을 보였다. 후두의 편평세포암은 상피성종양이며, 저분자량의 항ck 항체는 저분화암에서 양성반응을 보이고 고분자량의 항ck항체는 고분화암에서 양성반응을 보였다.

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흰쥐에서 하치조신경 절단에 따른 삼차신경절 위성페포에서 GFAP-IR의 변화 (GFAP IMMUNOREACTIVITY IN SATELLITE CEllS OF TRIGEMINAL GANGLION FOllOWING AXOTOMY OF INFERIOR ALVEOLAR NERVE IN RAT)

  • 이창섭;이상호;김흥중
    • 대한소아치과학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.249-256
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    • 1998
  • Glial fibrillary acidic proteins (GFAP) are a group of intermediate filaments that are distributed in the cytoplasm of glial cells. GFAP immunoreactivity (GFAP-IR) increase after central and peripheral nerve injuries. The purpose of this study was to determine change of GFAP-IR in rat trigeminal ganglion satellite cells following the axotomy of inferior alveolar nerve(IAN). The immunohistochemistry was carried out using the avidin-biotin-peroxidase complex(ABC) method. 1. Control group : Astrocytes in central root of trigeminal ganglion had strong GFAP-IR, but satellite cells of trigeminal ganglion occasionally had GFAP-IR. The patterns of reactivity in satellite cells of trigeminal ganglion were not concenturated in any specific region of trigeminal ganglion. 2. Three day group after IAN axotomy : There were highly GFAP-IR in satellite cells of trigeminal ganglion in mandibular region. GFAP-IR in maxillary and ophthalmic regions were less intense compared to mandibular region. 3. Seven day group after IAN axotomy : GFAP-IR that were increased compared to control group were seen in the mandibular region. But GFAP-IR were less intense compared to three day group. These results suggest that GFAP-IR increase in specific region of trigeminal ganglion following peripheral axotomy. therefore we suppose that GFAP study offer research tool in trigeminal neuralgia.

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생쥐의 난소의 $\beta$-Endorphin에 대한 면역조직화학적 동정 (Immunohistochemical Identification of $\beta$-Endorphin in the Mouse Ovary)

  • 조사선;이영기;김경진;윤용달;이정주;조완규
    • 한국동물학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.152-157
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    • 1990
  • 면역조직화학적 방법을 이용하여 생쥐 난소에서 $\beta$-endorphin이 생성되는 부위를 조사하기 위하여 본 실험을 행하였다. 성숙한 생쥐를 4% neutral buffered paraformaldehyde로 관류고정하였으며 난소를 적출한 후 cryostat로 절편을 만들어 avidin-biotin complex(ABC)를 이용하여 면역색을 하였다. $\beta$-endorphin에 대한 항체반응은 주로 황체에서 일어났으며, theac interna와 theca externa에서는 반응이 나타나지 않았다. 황체에서의 염색 양상은 퇴화가 많이 진행된 황체세포에서 보다 강한 연색반응을 관찰할 수 있었다. 때로 황체세포에서 유래된 것으로 보이는 간질세포에서도 양성반응을 관찰할 수 있었다. 이외에도 large antral follicle의 여포강에 인접한 과립세포에서 약한 반응을 보여주었으나, 제 1차 여포에서는 양성반응이 나타나지 않았다.

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폐암 환자의 혈청과 조직 표본상에서 Alpha 1-Proteinase Inhibitor의 조사 연구 (Investigation of Alpha 1-Proteinase Inhibitor in Serum and Specimen of Lung Cancer Patients)

  • 김송명
    • Journal of Chest Surgery
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    • 제27권5호
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    • pp.364-373
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    • 1994
  • Alpha 1-Proteinase inhibitor[PI] was known as a major protective enzyme against to excessive hydrolytic and proteolytic reaction. So, it was suggested that Alpha 1-PI may implicated in growth of bronchogenic cancer. This study was undertaken to investigate the role of Alpha 1-PI in local invasion of bronchogenic cancer. Three groups of patients were studied; Preliminary research group of 15 bronchogenic cancer patients, Main research group of 13 bronchogenic cancer patients and Normal control group of 10 nephrectomy donor. Serum Alpha 1-PI level was observed in each group of patients during pre-and postoperative days. Pre-operative serum Alpha 1-PI level in preliminary research group [329.2$\pm$14.21mg/dl]and main research group[406.2$\pm$39.30mg/dl] were higher than in normal control group[236.2$\pm$19.55mg/dl] significantly[p<0.005]. Serial Alpha 1-PI level in each group during pre-and postoperative days shows peaked at 3rd. postoperative day in preliminary and main research group, thereafter decreased gradually. Immunohistochemical study for Alpha 1-antitrypsin[A1AT] was carried out by ABC[avidin-biotin peroxidase complex] method using Alpha-1 antitrypsin DAKOR to tumor tissues of 13 lung cancer patients in main research group. 6 cases[46.2%, squamous cell ca.;5, adenocarcinoma;1] of above 13 cases show positive immunoreactivity for A1AT. In conclusion, alpha 1-PI and elastase are disclosed that have defined actions for lung cancer growing or spreading.

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면역조직염색법으로 관찰한 스파르가눔 층체에서의 36, 29 kDa 항원 단백질의 생성위치 (Immunohistochemical Localization of 36 and 29 kDa proteins in sparganum)

  • 김이수;공윤;강신영;조승열
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제30권1호
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    • pp.25-32
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    • 1992
  • 스파르가눔증을 혈청학적으로 진단할 경우, 환자 혈청과 민감하고 특이하게 반응하는 단백질이 36. 29 kDa임은 SBS-PAGE/immunoblot을 이용하여 이미 밝혀졌다. 이 연구는 이 단백질이 스파르가눔 충체의 어느 부위에서 생성되는 것인지를 알아보기 위하여 실시하였다. 스파르가쑴 충체의 조직표본을 만들고 36 kDa와 29 kDa 단백질에 반응하는 단세포군항체를 1차항체로 사용하였다. 그리고 avidin-biotinylated conjugate와 AEC (3-amino, 9-ethylcarbasole)를 이용하여 면역조직화학염색법을 실시하였다. 아울러 스파르가눔증 환자 혈청, 스파르가눔 생리식염수추출액으로 면역시킨 마우스 항혈청을 사용하여 반응양상을 비교하였다. 대조 염색으로는 PBS, 정상 마우스 혈청 및 전상인(정상인) 혈청을 각각 사용하였다. 1. PBS, 전상 마우스와 정상인 혈청으로 처리한 군은 어느 조직에서도 반응이 없었다. 2. 마우스 면역혈청을 사용하였을 때에는 표피상층, 표피, 표퍼세포, 유조직 (유조직), 배설강에 반응이 있었고 근육, 칼숨소체의 일부에도 반응을 보였다. 3. 환자혈청은 표피상층이 표피세포보다 강한 양성반응을 보였고 유조직에서도 반응이 있었다. 배설강, 칼슘 소제의 일부에 반응을 나타냈으나 표피와 표피세포에서는 반응이 약한 환자혈청도 있었다. 4. 단세포군항체로 처치한 경우, 표피상층과 표피세포에 강하게 반응하였고 유조직의 일부에서 약한 반응을 보였다. 그러나 표피, 칼슘소체, 배설강 등에는 전혀 반응이 없었다. 이상의 결과는 스파프가눔에 존재하는 36, 29 kDa단백질이 표피세포에서 생성되어 표피상층으로 이동함을 시사하고 있었다.

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랫드에서 스트레스에 의한 위궤양이 위발암화과정에 미치는 영향에 관한 연구 (Studies on the Effect of Stress-Induced Gastric Ulcer on Gastric Carcinogenesis in Rats treated with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)

  • 이종권;김형진;이영순
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제6권1호
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    • pp.27-40
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    • 1991
  • 랫드에서 속박 및 침수 스트레스에 의한 위궤양이 MNNG(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)의 위발암과정에 어떠한 영향이 있는지 알아보기 위하여 본 실험을 실시 하였다. 1 군은 시험시작 8시간 전에 스트레스를 가한 후 MNNG를 투여하였으며, 2군은 MNNG를 음수 투여한 후 MNNG에 의한 위발암 기간 중 촉진기간이라고 알려진 3~12주 사이에 매주 발암 물질과 함께 스트레스를 1회 가하였다. 3군은 양성 대조군으로서 MNNG만을 투여하였고, 4군은 음성 대조군으로 발암제를 처치하지 않았다. 전군 공히 20주에 부검하여 acidine-biotin peroxidase complex(ABC) 방법으로 면역조직 화학적 염색을 한 수 PAPG({Pepsinogen isozyme 1 Altered Pyloric Gland)에 대한 통계 분석을 하였으며, 각 군간의 체중 변화와 병리 변화를 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 발암 물질을 투여한 1·2·3군이 비투여군(4군)에 비해 증체율이 유의성있게 감소하였다. (p<0.05), 그러나 발암 물질 투여군간의 체중변화에는 유의성이 없었다. 2. MNNG 투여와 함께 스트레스를 가한 군이 스트레스를 가하지 않고 MNNG만을 투여한 군에 비하여 Pg 1 변이 유문선(PAPG)의 수가 유의성 있게 증가되었다. (p<0.01). 3. 위발암 과정 중 촉진기간에 스트레스를 가한 군이 스트레스를 가하지 않고 MNNG만을 투여한 군에 비해 점막 과형성(mucosal hyperplasia) 발생이 유의성있게 증가되었다. (P<0.05)

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하악두(下顎頭)의 부분절제(部分切除)된 연골(軟骨) 및 골(骨)의 치유과정(治癒課程)에서 비교원성(非膠原性) 단백질(蛋白質) 분포(分布)에 관(關)한 연구(硏究);주사전자현미경적(走査電子顯微鏡的) 및 면역조직화학적(免疫組織化學的) 연구(硏究) (DISTRIBUTION OF NONCOLLAGENOUS PROTEIN DURING REPAIR OF PARTIALLY RESECTED CONDYLAR CARTILAGE AND BONE;SEM AND IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY)

  • 김명환;이상철
    • Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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    • 제18권3호
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    • pp.411-427
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    • 1996
  • The purpose of this study was to observe the healing process and the distribution of fibronectin in injured condylar cartilage and bone by using LM and SEM. In order to perform this study, 40 male rat, weighing about 250g were selected. Under general anesthesia with Pentobarbital sodium, condylar cartilage and neck bone were resected. Then, the wound was irrigated with saline and closed with 5-0 chromic catgut and 4-0 silk by layer-to-layer suturing. The experimental rats were sacrificed by perfusion with 3% paraformaldehyde at 1st and 4th week after operation. The condylar process and surrounding tissues were cut, demineralized, dehydrated and embedded in paraffin. The histological observation of the specimens in LM level was performed after H-E stain and Azan stain. For localization of fibronectin, immunostaining was achieved by the avidin-biotin complex method. To study the change on condylar surface, the specimens were dehydrated, dried, gold coated and were observed with a scanning electron microscope(Hitachi S-2300). The results were as follows ; 1. The cartilage group and the bone group were repaired with epiphyseal cartilage layer on the cut surface as the normal control group. 2. The cut surface was repaired more quickly in the cartilage group than in the bone group. 3. Chondrocytes, diferentiated during healing, were stained strongly to anti-fibronectin, and fibronectin was supposed to participatein chondrocyte differentiation and cartilagenous matrix formation. 4. Fibronectin was distributed more in the new bone than in the old bone, and the osteoblasts surrounding it were also stained strongly. Fibronectin was supposed to participate in new bone matrix formation. 5. Fibronectin is supposed to be associated with the differentiation, migration and adhesion of chondrocyte and osteoblast and to participate in endochondral bone formation.

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