The effects of polyamines on auxin polar transport were studied in corn coleoptile segments. Among putresine, spermidine and spermine tested in labelled auxin transport, spermidine inhibited auxin polar transport most strongly. Its inhibitory effect appeared after 1 h of transport period. Spermidine inhibited labelled auxin and 14C-benzoic acid accumulation into the tissue in the various pH range tested (pH 4.0-8.0). These results suggest that the inhibition of auxin transport may not be due to decrease in pH by spermine the effect of decreased pH in the extracellular space.
Both polar and gravity-induced lateral transport of auxin was markedly reduced in corn coleoptile segments by octanol treatment. Octanol enhance net auxin uptake without affecting that of benzoic acid, suggesting that the effect did not result from a nonspecific action on general membrane permeability. Since naphthylphthalamic acid (NPA) action on both transport and net uptake of auxin was substantially decreased in the presence of octanol, a specific interaction of octanol with the NPA site (efflux carrier) can be postulated. Studies on in vitro binding of NPA to membrane vesicles indicated that octanol did not interfere with NPA binding. When basipetal transport of auxin was impared by plasmolysis, octanol still inhibited auxin transport in the plasmolyzed tissues. The results ruled out the possibility of octanol acting at the plasmodesmata. Kinetic analysis of growth indicated that IAA-sustained growth was rapidly blocked by octanol implicating a common system by which auxin transport is linked to auxin action. Possible mechanisms for octanol action will be discussed.
Treatment of Pisum sativum tissue with the protein kinase inhibitor staurosphorine resulted in impairment of 3H-indoleacetic acid transport in etiolated stem segments. The transport inhibitiion was accompanied by an increase in net uptake of labeled auxin in the tissue. The magnitude of auxin accumulation in tissue treated with the phytotropin N-1-naphthylphthalaic acid (NPA) which specifically blocks the efflux of auxin in the plasma membrane was reduced by the protein kinase inhibitor, suggesting that inhibition of protein phosphorylation could lead to hindrance of the auxin-exporting function of NPA receptors. The flavonoid genistein which is also known to inhibit protein kinase likewise reduced NPA-induced auxin accumulation. However, the flavonoid did not bring about auxin accumulation by itself, nor did it inhibit auxin transport. In view of the finding that the flavonoid also competes with NPA for a common binding site, a mechanism for the flavonoid effect on the NPA action will be proposed.
In maize coleoptile segments where auxin transport capacity decreases with time following excision, susceptability of the tissue to transport inhibitors such as N-1-naphthylphthalamic acid (NPA), 3,4,5-triiodobenzoic acid (TIBA) or high concentrations of IAA was found to be rather increased. A time-dependent increase in the sensitivity to NPA can be postulated since the dose-response curve for NPA was shifted in the‘aged’tissue to the left (i.e. lower concentration). Preincubation of the tissue at a low temperature abolished the time-dependent sensitivity change, suggesting that cellular metabolism could be involved. The NPA-sensitive state was also brought about by calcium depletion of the tissue, which can be partially reversed by addition of calcium. Presence of exogenous IAA in the preincubation medium kept the auxin transport system from decay, implicating auxin as an endogenous controlling factor. Results of our experiments indicate a reversible, time-dependent changes of auxin transport system in which transport capacity and sensitivity to NPA are tightly coupled. Changes in the sensitivity to NPA were also seen in auxin action as well.
Partial recovery in auxin transport capacity from inhibition by N-naphthylphthalamic acid (NPA) was observed when corn coleoptile segments were subjected to a prolonged NPA treatment. Kinetic data indicated that the recovery time is a function of the concentration of NPA applied. Desensitization to NPA was also seen in tissue slices where NPA increased net uptake of auxin, indicating that the apparant adaptation in the auxin transport system did not results possibly from auxin accumulated during transport inhibition. Studies on in vitro binding of NPA to membrane vesicles isolated from the coleoptile indicated that preincubation of the tissue with NPA resulted in the reduced binding activity. Scatchard analysis of the data indicated that this was due to decreases in the number of NPA binding sites. The possibility of causal relationship of modified NPA receptors to the sensory adaptation in auxin transport observed in coleoptile segments will be discussed.
Treatment of microsomal vesicles isolated from etiolated Pisum sativum L cv. Alaska epicotyl tissue with agents inhibiting protein dephosphorylation, namely NaF and/or ATP, resulted in increased binding of the phytotropin NPA to the putative auxin efflux carriers localized on the plasma membrane. The phytotropin effect was especially conspicuous if the vesicles were simultaneously treated with Triton X-100. Kinetic analysis of the binding indicated the existance of two distinct sites for NPA, each having different affinities. Increased binding of the phytotropin to the membrane where protein dephosphorylation was inhibited was attributable to the increased ligand affinity of both sites. Treatment of tissue segments with flubride was found to enhance in vivo auxin transport. Implications of covalent modification of the auxin efflux carrier complex for the regulation of membrane transport of auxin molecules are discussed.
Ethylene was found to reverse the direction of gravity-induced lateral auxin transport and to cause an accumulation of auxin in the physically upper sides of horizontally placed pea shoots. The pea shoot displayed a slightly positive (downward) geotropic curvature in the presence of applied ethylene. Golgi bodies were found to be distributed preferentially in the bottom halves of cells as against the top halves following geotropic stimulation, and this pattern of intracellular distribution of dictyosomes was also reversed by ethylene treatment. Intracellular displacement of amyloplsts as a result fo geotropic induction was not reversed by the action of ethylene. In view of a positive correlation between the direction of auxin movement and the displacement patern of dictyosomes, it is suggested that the Golgi bodies are involved in the perception of gravity and/or subsequent redistribution of auxin or differential elongation in geotropism.
It has been suggested that AUXIN BINDING PROTEIN 1 (ABP1) functions as an apoplastic auxin receptor, and is known to be involved in the post-transcriptional process, and largely independent of the already well-known SKP-cullin-F-box-transport inhibitor response (TIR1) /auxin signaling F-box (AFB) ($SCF^{TIR1/AFB}$) pathway. In the past 10 years, several key components downstream of ABP1 have been reported. After perceiving the auxin signal, ABP1 interacts, directly or indirectly, with plasma membrane (PM)-localized transmembrane proteins, transmembrane kinase (TMK) or SPIKE1 (SPK1), or other unidentified proteins, which transfer the signal into the cell to the Rho of plants (ROP). ROPs interact with their effectors, such as the ROP interactive CRIB motif-containing protein (RIC), to regulate the endocytosis/exocytosis of the auxin efflux carrier PIN-FORMED (PIN) proteins to mediate polar auxin transport across the PM. Additionally, ABP1 is a negative regulator of the traditional $SCF^{TIR1/AFB}$ auxin signaling pathway. However, Gao et al. (2015) very recently reported that ABP1 is not a key component in auxin signaling, and the famous abp1-1 and abp1-5 mutant Arabidopsis lines are being called into question because of possible additional mutantion sites, making it necessary to reevaluate ABP1. In this review, we will provide a brief overview of the history of ABP1 research.
Calcium promoted ethylene production from mungbean hypocotyl segments incubated in the presence of either auxin or cytokinin (kinetin). Time course studies indicated that the calcium effect on ethylene production had a longer latent period (about 6 h) in combination with kinetin than with auxin. Studies on the effects of agents that are known to interfere with either action or transport (uptake) of calcium on ethylene biosynthesis indicated different patterns between auxin- and kinetin-treated tissues. Auxin-induced ethylene production was inhibited by the calmodulin inhibitor, trifluoperazine (TFP), and this inhibition was overcome by high concentrations of calcium applied, but TFP had no significant effect on kinetin-induced ethylene production regardless of calcium in the medium. The calcium channel blocker, verapamil, inhibited auxin-induced, but had little effect on kinetin-induced, ethylene producton. In vivo activity of "ethylene forming enzyme (EFE)" was found to be substantially promoted by calcium treatment. The enzyme activity was further increased by kinetin when segments were simultaneously treated with calcium, but auxin did not have such an effect.an effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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