Pistagremic acid (PA) is a bioactive triterpenoid isolated from various parts of Pistacia integerrima plants. The aim of this research was to investigate PA for reversion of multidrug resistant (MDR) mediated by P-glycoprotein using rhodamine-123 exclusion study on a multidrug resistant human ABCB1 (ATP-binding cassette, sub-family B, member 1) gene-transfected mouse T-lymphoma cell line in vitro. Results were similar to those with verapamil as a positive control. Docking studies of PA and standard Rhodamine123 were carried out against a P-gp crystal structure which showed satisfactory results. Actually, PA cannot bind exactly where co-crystallized ligand of P-gp is already present. However, the docking study predicted that if a compound gives a lesser score then it may have some potency. The docking scores of PA and Rhodamine were similar. Therefore, we can conclude that there are certain important chemical features of PA which are responsible for the inhibiting potency of P-gp.
The present work was designed to determine whether change in fluidity of the mitochondrial membrane affects mitochondrial {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase characteristics in NIDDM-prone BHE/Cdb rat. Isolated mitochondria fom BHE/Cdb rat fed a 6% coconut oil or corn oil were functionally tested by an analysis of its respiration and the coupling of this process to ATP synthesis in presence of oligomycin, a specific inhibitor of oxidative phosphorylation (OXPHOS), that binds to the {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase. Mitochondria from rats fed coconut oil were more responsive to the inhibitory action of oligomycin with respect to state 3 respiration, respiratory control (RC) ratio and ADP:P (P/O) ratio than were mitochondria from rats fed corn oil. In state 3 respiration, mitochondria from rats fed coconut oil consumed less oxygen than did mitochondria from rats fed corn oil. RC ratio was lower in the mitochondria from rats fed coconut oil than was mitochondria from rats fed corn oil. In P/O ratio, the mitochondria from rats fed coconut oil had a lower P/O ratio than did mitochondria from rats fed corn oil. The data showed that the chang influidity of the mitochondrial membrane by dietary fat affected mitochondrial {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase characteristics. The present study on diet differences in {TEX}$F_{1}${/TEX}{TEX}$F_{0}${/TEX}ATPase characteristics provides considerable insight into the role diets play in the control of mitochondrial function, expecially OXPHOS in NIDDM with mitochondrial defects.
Object: Death rate due to hypertension, atherosclerosis, ischemic heart disease and cerebral infarction induced by Westernized diet and increased average life span is on the rise. Decrease in blood circulation, activation of thrombus generation and intravascular lipid accumulation, cited as the principal causes of the above mentioned diseases in recent studies, result in circulatory disturbance and blood vessel obstruction leading to ischemic cell death of heart, brain and peripheral vessels. Method: We investigated the biochemical changes in microvascular permeability, aggregation of platelet and the intravascular lipid accumulation in induced-diabetic rat using Streptozotocin. We also studied the effects of Woohwangcheongsirn-won after oral administration on blood circulation, platelet function and lipid metabolism. The results are as follows: I. Woohwangcheongsim-won increased blood circulation in microvessels. 2. Woohwangcheongsim-won increased the reduced erythrocyte deformability in diabetes. 3. Woohwangcheongsim-won induced the reduction of contents of 2, 3-DPG, but failed to affect the reduced contents of ATP in erythrocyte in diabetes. 4. Woohwangcheongsim-won reduced the activity of Ca/sup 2+/-ATPase in the membrane of erythrocyte. 5. Woohwangcheongsim-won reduced the platelet aggregation evoked by platelet agglutinin factor. 6. Woohwangcheongsim-won reduced the production of platelet-derived granules. 7. Woohwangcheongsim-won reduced the production of metabolites of arachidonic acid in diabetes, and also reduced the production of increased thromboxane B2. 8. Woohwangcheongsim-won reduced the synthesis of oxidized LDL-cholesterol. In conclusion, Woohwangcheongsim-won enhanced blood circulation in microvesseles, erythrocyte deformability and inhibited the increased platelet aggregation and the synthesis of oxidized LDL-cholesterol in diabetes. Therefore Woohwangcheongsim-won is believed to positively affect blood circulation (J Korean Oriental Med 2002;23(2):164-179)
Park, Jin-ho;Chae, Joon-seok;Kim, Dae-hyuk;Jang, Yong-suk;Kwon, Oh-deog;Lee, Joo-mook
대한수의학회지
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제39권4호
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pp.797-805
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1999
T sergenti cDNA library were constructed to get a more broad information about the structural, functional or antigenic properties of the proteins, and analyzes for their partial cDNA sequences and expression sequences tags(ESTg). The mRNA were purified from T sergenti isolates to identify the information of antigen gene, then first and second strand cDNA was synthesized. EcoR I adaptor ligation and Xho I enzyme restriction were used to the synthesized cDNA, and ligated into a Uni-ZAP XR vector. T sergenti cDNA library was constructed with packaging and amplification in vitro. Antibody screening was performed with constructed T sergenti cDNA library using antisera against T sergenti. Among those clones, eight phagemids were rescued from the recombinant in vivo excision with f1 helper phage. Using the analysis of endonuclease restriction and PCR, the recombinant cDNA were proved having a 0.5-3.0kb of inserts. The eight of partial cDNA clones' sequences were obtained and examined for their homology using BLASTN and BLASTX. The eight of sequenced clones were classified into three groups according to the basis of database searches. A total 3,045bp of partial cDNA sequence were determined from six clones. The putatively identified clones contain a cytochrome c gene, a heat shock protein gene, a cyclophilin gene, and a ribosomal protein gene. The unidentified clones have a homology to ATP-binding protein(mtrA) gene of S argillaceus, DNA-binding protein(DBP) gene of Pseudorabies virus 85kDa merozoite protein gene of B bovis, mRNA spm1 protein of T annulata and glycine-rich RNA-binding protein mRNA of O sativa etc.
This study was to evaluate the protein profile of seminal plasma using 2-DE in Hanwoo. Seminal plasma was harvested from five mature Hanwoo, and seminal plasma protein was extracted by M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent. Proteins were refined by clean-up kit and quantified by Bradford method until total protein was $300\;{\mu}l$. Immobilized pH gradient (IPG) strip was used 18 cm and 3~11 NL. SDS-PAGE was used 12% acrylamide gel. Each gels were visualized by comassie brilliant blue and silver staining. These spots were analyzed by MALDI-TOF MS and searched on NCBInr. The result, 20 proteins of 36 protein spots were searched through peptide sequencing on the NCBInr. 8 proteins profiled by 2-DE were proved through previous bovine studies and the name of each protein was albumin, nucleobindin, clusterin, TIMP-2, spermadhesin Z13, spermadhesin-1 and BSP proteins (BSP 30 kDa and BSP A1/A2). 12 new proteins were ATP synthase, protein MAK16 homolog, Transmembrane protein 214, E3 ubiquitin-protein ligase BRE1A, dual serine/threonine and tyrosine protein kinase, tissue factor pathway inhibitor 2, alpha-actinin-4, RUN domain-containing protein 3B, catenin alpha-1, protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 2, plakophilin-1 and inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1 has not been previously described in the bovine seminal plasma study. These proteins may be contribute to define the type of proteins affecting fertility of male and improve the fertilizing ability of semen in Hanwoo.
한국식물학회 1999년도 Proceedings of the 17th Symposium on Plant Biology Environmental Stress and Photosynthesis
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pp.83-90
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1999
Electron crystallography of two-dimensional crystalsand electron cryo-microscopy is becoming an established method for determining the structure and function of a variety of membrane proteins that are providing difficult to crystallize in three dimension. In this study this technique has been used to investigate the structure of a ~160 kDa reaction centre sub-core complex of photosystem II. Photosystem II is a photosynthetic membrane protein consisting of more than 25 subunits. It uses solar energy to split water releasing molecular oxygen into the atmosphere and creates electrochemical potential across the thylakoid membrane, which is eventually utilized to generate ATP and NADPH. Images were taken using Philips CM200 field emission gun electron microscope with an acceleration voltage of 200kW at liquid nitrogen temperature. In total, 79 images recorded dat tilt angles ranging from 0 to 67 degree yielded amplitudes and phases for a three-dimensional map with an in-plant resolution of 6$\AA$ and 11.4$\AA$ in the third dimension shows at least 23 transmembrane helices resolved in a monomeric complex, of which 18 were able to be assigned to the D1, D2, CP47 , and cytochrome b559 alfa beta-subunits with their associated pigments that ae active in electron transport (Rhee, 1998, Ph.D.thesis). The D1/D2 heterodimer is located in the central position within the complex and its helical scalffold is remarkably similar to that of the reaction centres not only in purple bacteria but also in plant photosystem I (PSI) , indicating a common evoluationary origin of all types of reaction centre in photosynthetic organism known today 9RHee et al. 1998). The structural homology is now extended to the inner antenna subunit, ascribed to CP47 in our map, where the 6 transmembrane helices show a striking structural similarity to the corresponding helices of the PSI reaction centre proteins. The overall arrangement of the chlorophylls in the D1 /D2 heterodimer, and in particular the distance between the central pair, is ocnsistent with the weak exciton coupling of P680 that distinguishes this reaction centre from bacterial counterpart. The map in most progress towards high resolution structure will be presented and discussed.
In order to screen the aging related proteins in human normal colon epithelia, the comparative proteomics analysis was applied to get the two-dimensional electrophoresis (2-DE) profiles with high resolution and reproducibility from normal colon epithelial tissues of young and aged people. Differential proteins between the colon epithelia of two age groups were found with PDQuest software. The thirty five differential protein-spots were identified by peptide mass fingerprint (PMF) based on matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOFMS) and database searching. Among them there are sixteen proteins which are significantly up-regulated in the colonic mucosal epithelia of young people group, which include ATP synthase beta chain, electron transfer flavoprotein alpha-subunit, catalase, glutathione peroxidase 1, annexin A2 and heat shock cognate 71 kDa protein, etc.; There are nineteen proteins which are significantly up-regulated in the colonic mucosal epithelia of aged people group, which include far upstream element-binding protein 1, nucleoside diphosphate kinase B, protein disulfide-isomerase precursor and VDAC-2, etc.. The identified differential proteins appear to be involved in metabolism, energy generation, chaperone, antioxidation, signal transduction, protein folding and apoptosis. The data will help to understand the molecular mechanisms of human colon epithelial aging.
Osteoprotegerin (OPG) plays a core role in bone reformation by antagonizing the effect of receptor activator of nuclear factor ${\kappa}$-B ligand (RANKL), and mediates vascular calcification in cardiovascular disease patients. Thus, we aimed to examine the relationship between serum OPG levels and cardiovascular factors and inflammatory markers in metabolic syndrome patients (MS). This cross-sectional study included 96 men who visited the diet clinic between May and July 2011. Patients were classified into 2 groups based on NCEP-ATP guidelines: normal and with MS (n = 50 and 46, respectively). Physical measurements, biochemical assay were measured. Serum OPG and IL-6, diponectin and hs-CRP were assessed. MS were aged $50.02{\pm}10.85$ years, and normal patients $52.07{\pm}9.56$ years, with no significant differences. Significant differences were not observed in BMI between the 2 groups. Moreover, significant differences were not observed in serum OPG, however, the serum OPG level ($4.41{\pm}1.86pmol/L$) differed significantly between an overweight MS (BMI > 25) and normal patients. OPG was correlated to age (r = 0.410, p = 0.000), HDL-cholesterol (r = 0.209, p = 0.015), and log adiponectin (r = 0.175, p = 0.042). Multiple regression analyses using the enter method showed that age (${\beta}$ = 0.412, p = 0.000) and BMI (${\beta}$ = 0.265, p = 0.000) considerably affected OPG. In conclusion, out study showed that serum OPG levels are correlated with cardiovascular risk factors, such as BMI, HDL-cholesterol and adiponectin in MS and adiponectin, suggesting that serum OPG has potential as a cardiovascular disease indicator and predictor.
Murine CD38 is a 42 kDa type II glycoprotein expressed on cell surface of both B and T lymphocytes. CD38 is a multifunctional enzyme that catalyzes the formation and hydrolysis of cyclic adenosine diphosphoribose (cADPR): ADP-ribosyl cyclase activity of CD38 catalyzes the formation of cADPR from NAD and cADPR hydrolase activity of CD38 catalyzes the hydrolysis of cADPR to ADP-ribose (ADPR). And also, CD38 has the catalytic activity of NAD glycohydrolase (NADase) which catalyzes the hydrolysis of catalyzes the formation and hydrolysis of cyclic adenosine diphosphoribose (cADPR): ADP-ribosyl cyclase activity of CD38 catalyzes the formation of cADPR from NAD to ADPR. In this study, we attempted to purify CD38 from mouse lymphocytes by using the immobilized anti-CD38 monoclonal antibody. The single step immuno-affinity column chromatography resulted in homogeneous purification, showing a single protein of 42 kDa on a SDS polyacrylamide gel. We have investigated the effects of various inhibitors on the enzyme activities of the purified CD38. Cibacron blue (0.5 mM) inhibited all three enzyme activities of CD38, NADase, ADP-ribosyl cyclase and cADPR hydrolase activities. ADPR (2 mM) showed inhibitory effect on both cADPR hydrolase activity and NADase, but not on ADP-ribosyl cyclase activity. However, ATP (2 mM) inhibited only cADPR hydrolase activity. $Zn^{2+}$ (1 mM) showed similar inhibitory effect as that of ADPR, but activated cyclase activity These results suggest that CD38 has three different catalytic activity domains which might be differentially regulated by their specific inhibitors.
The imputation of untyped SNPs enables researchers to validate association findings across SNP arrays and also enables them to test a large number of SNPs to reveal the fine structure of the association peak, facilitating interpretation of the results and the location of causal polymorphisms. In this study, we applied the imputation method to a genomewide association study and recapitulated the previously associated gene loci of blood pressure traits in Korean cohorts. A total of 1,827,004 SNPs were imputed by the IMPUTE program, and we conducted a genomewide association study for systolic and diastolic blood pressure. While no SNPs passed the Bonferroni correction p-value (p=$2.74{\times}10^{-8}$ for 1,827,004 SNPs), 12 novel loci for systolic blood pressure and 16 novel loci for diastolic blood pressure were detected by imputed SNPs, with $10^{-5}$ < p-value < $10^{-4}$. Moreover, 7 regions (ATP2B1, 10p15.1, ARHGEF12, ALX4, LIPC, 7q31.1, and TCF7L2) out of 14 genetic loci that were previously reported revealed that the imputed SNPs had lower p-values than those of genotyped SNPs. Moreover, a nonsynonymous SNP in the CSMD1 gene, one of the 14 genes, was found to be associated with systolic blood pressure (p<0.05). These results suggest that the imputation method can facilitate the discovery of novel SNPs as well as enhance the fine structure of the association peak in the loci.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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