Typical phytoplasma whiches' broom symptoms were observed in Ash (Fraxinus rhynchophylla Hence) in Korea. The symptoms of the disease were showing abnormally small leaves, shorted internodes and proliferation of shoots. Examination of fluorescent and electron microscopy of leaf midribs revealed numerous phytoplasma bodies localized in the phloem tube cells. The phytoplasmas were detected in all the symptomatic samples by the amplification with phytoplasma specific primer pair P1/P7 consistently, and the expected size was 1.8 kb. However, the phytoplasma DNA was not detected in healthy seedlings. Based on sequence analysis of amplified region, this phytoplasma has close homologies with eqilodium phyllody, mulberry dwarf, and aster yellow phytoplasmas, 99.95%, 99.79% and 99.78%, respectively, This phylogetic analysis indicates that ash witches' broom phytoplasma should be classified in the aster yellow group 16SrVI and clearly distinct from the ash yellow group 16SrVII.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.73.2-73
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2003
Typical whiches broom symptoms caused by phytoplasma were observed in Ash (Fraxinus rhynchophylla Hence) in Korea. The symptoms were showing abnormally small leaves, short internodes, and proliferation of shoots. Fluorescence and electron microscopy of leaf midribs revealed phytoplasma positive DAPI fluorescence and numerous phytoplasma bodies localized in the phloem sieve tubes. Phytoplasma DNA of 1.8 Kb was detected consistently from all symptomatic samples by the amplification of phytoplasma DNA with the phytoplasma specific primer pair Pl/P7. But no phytoplasma DNA was detected in healthy ash seedlings. Based on sequence analyses of an amplified region, this phytoplasma is closely related to Eqilodium phyllody, Mulberry dwarf, and Aster yellows phytoplasmas with the homology of 99.95 %, 99.79 % and 99.78 %, respectively, This phylogenetic analyses indicate that ash witches broom phytoplasma but is evidently distinct from the ash yellows group 16SrⅦ and should be classified into the Aster yellows group 16SrⅥ.
Aster yellows phytoplasma-infected chrysanthemums showing stunt, rosette, and excessive branching were treated with a foliar spray of 400 mg/I oxytetracycline at three-day interval for 1,2,3 and 4 months. Two months after the final treatment, new shoots from the recovered chrysanthemums showed the recurrence of the disease symptoms. However, cuttings from chrysanthemums treated with oxytetracycline did not express any photoplasma infection symptoms for more than 10 months. Also, chrysanthemums dipped in 100 mg/I oxytetracycline solution combined with a foliar spray of 400 mg/I oxytetracycline for 4 weeks showed the same results. Using an electron microscope, ultrathin sections of leaf midribs of chrysanthemum cuttings treated with oxytetracycline for 4 months did not show phytoplasma bodies 10 months after treatment. Nucleic acids from chrysanthemums, which did not express phytoplasma infection symptoms for more than 10 months, did not amplify 16S rRNA gene of phytoplasma by polymerase chain reaction. These results may have implications in the propagation of phytoplasma-free healthy stocks for a wide range of plant species.
Typical phytoplasma witches' broom symptoms were observed in black locust (Robinia pseudoacacia L.) in Korea. The symptoms of the disease were showing abnormally small leaves, shortened intemodes and proliferation of shoots. The phytoplasmas were detected consistently in all the symptomatic samples by the amplification with phytoplasma universal primer pairs P1/P7 and R16F2n/R2, and the expected size was 1.8 kb and 1.2 kb. However, the phytoplasma DNA was not detected in healthy seedling. Based on sequence analysis of amplified region, this phytoplasma has close homologies with aster yellow, mulberry dwarf, maize bushy stunt, ash witches' broom and sumac witches' broom phytoplasmas, more than 99.2% but showed homologies with black locust witches' broom (GeneBank Accession No. AF 244363), and jujube witches' broom, 88.6% and 87.7%, respectively. This phylogetic analysis indicates that the black locust witches' broom phytoplasma founded in korea should be classified in the Candidatus phytoplasma asteris (16Sr I) group and clearly distinct from the black locust witches' broom group 16Sr III (peach X-disease phytoplasma group).
The Aster glehni extract has many therapeutic and medicinal values. Therefore, it is essential to set appropriate conditions for enzyme treatment to efficiently extract A. glehni. In this study, changes in the quality of A. glehni extract depending on the concentration and time of enzyme treatment was investigated to increase its effective utilization. Compared to the control, the pH of the extract of A. glehni its soluble solid content increased with the enzyme treatment. The color of the A. glehni extract changed from green-yellow to reddish-yellow with the increase in treatment duration. The fructose and sucrose contents of the extract were the highest at 7.73% and 6.78%, respectively, in the control group without the enzyme treatment. Glucose and maltose contents were 6.91% and 4.44% in the C group (3.2% enzyme concentration and 60 min for enzyme treatment), respectively. Total polyphenol content, which shows antioxidant activity, was the highest at 7.38 mg GAE/g in the E group (1.6% of enzyme concentration and 120 min for enzyme treatment). 2,2-diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) showed the highest radical scavenging activity in the C group (3.2% of enzyme concentration and 60 min for enzyme treatment). These results enable setting appropriate conditions of enzyme treatment in terms of enzyme concentration and time for the production of dry powders using A. glehni extract.
The Symptoms of witches' broom disease caused by phytoplasma including general stunting and yellowing, were observed in leafy lespedeza (Lespedeza cyrtobotrya M.) on Doam-myeon, Pyeongchang-gun, in 2006. Based on the sequence analysis of PCR-amplified 16S ribosomal DNA and 16S-23S spacer region DNA products using universal phytoplasma primers, the phytoplasma associated with leafy lespedeza witches' broom (LLWB) disease was identified as a member of Candidatus Pytoplasma trifolii. It was most closely related to alsike clover proliferation phytoplasma (99.8% similarity, accession no. AY390261), Candidatus Pytoplasma trifolii strain. RFLP patterns generated with AluI, HpaII clearly differentiated LLWB phytoplasma from the referenced phytoplasma strains, water dropwort witches' broom, mulberry dwarf, glehni aster yellow dwarf and jujube witches' broom. This paper is the first report on Candidatus Phytoplasma trifolii in leafy lespedeza identified at a molecular level.
Sclerotinia rot occurred severely on some vegetable crops grown in Namyangju, Yangpyung, and Yangiu areas in Korea in 2001-2002. The crops infected with Scterotinia sp. were Adenophora remotiflora, Armoracia lapathfolia, Angelica acutiloba, Angelica archangelica, Anthriscus sylvestris, Aster tataricus, Beta vulgaris var. cicla, Brassica campestris var. marinosa, Brassica juncea var. laciniata, Chicholium intybus, Lactuca indica var. dracoglossa, Lactuca sativa var. oak-leaf, Petroselinum crispum, and Phyteuma japonicum. The fungus associated with the disease was identified as Sclerotinia sclerotiorum, based on the morphological characteristics of the pathogen. The symptoms were water-soaked spots that enlarged later and became a watery soft rot. Infected parts became yellow and then turned brown, followed by death of the whole plant. White mycelia developed on the upper petioles and leaves and on the soil where these plant parts lay. Then black sclerotia in variable size and shape formed from the mycelial mass. Pathogenicity of the fungus was proven by artificially inoculating each crop. This is the first report of Sclerotinia rot on the listed vegetable crops in Korea.
Seven phytoplasma diseases have been occurred on floricultural crops in Korea : Ph-ch1 and Ph-ch2 of chrysanthemum, Ph-lily of lily, petunia flat stem-Korean (PFS-K) of petunia, poinsettia branch inducing- Korean (PoiBI-K) of poinsettia, statis witches' broom-Korean (SWB-K) of statis and azalea witches broom (AWB). Classification of the seven phytoplasmal diseases based on 16S ribosomal RNA (rRNA) sequences showed that floricultural crop phytoplasma disease were widespread in order of aster yellow (AY), stolbur and X-disease in Korea. In phenotypic characters, the fasciation was occurred in both monocotyledon plant of lily and dicotyledon plants of petunia and poinsettia. Besides, the fascination was occurred in Ph-lily of stolbur, petunia PFS-K of AY and PoiBI-K of X-disease. This result indicated that phytoplasma classification based on 16S rRNA and symptoms are not consistently related. The comparison of 16S rRNA sequence of the seven floricultural crop phytoplasma with five tree phytoplasmal diseases of jujube witches' broom, paulownia witches' broom, wild jujube witches' broom, mulberry dwarf, golden rain phytoplasma occurred in Korea showed as high as 88.5-99.9% homology. Among them, especially mulberry dwarf showed the highest homology with the seven floricultural crop phytoplasms. Based on this result, floricultural crop phytoplasmas were assumed to be transmitted by insect vectors from tree phytoplasmas in Korea.
Using phytoplasma universal primer pair Pl and P7, a fragment of about 1.8 kb nucleotide sequences of 16S rRNA gene and 16S-23S rRNA intergenic spacer region, and a portion of 23S rRNA gene of jujube witches'broom (JWB) and mulberry dwarf(MD) phytoplasmas were determined. The nucleotide sequences of JWB and MD were 1,850 bp and 1,831 bp long, respectively. The JWB phytoplasma sequence was aligned with the homologous sequence of MD phytoplasma. Twenty-eight base insertions and nine base deletions were found in the JWB phytoplasma sequence compared with that of MD phytoplasma. The similarity of the aligned sequences of JWB and MD was 84.8%. The near-complete 16S rRNA gene DNA sequences of JWB and MD were 1,529 bp and 1,530 bp in length, respectively, and revealed 89.0% homology. The 16S-23S rRNA intergenic spacer region DNA sequences were 263 bp and 243 bp in lengths respectively, while homology was only 70% and the conserved tRNA-lle gene of JWB and MD was located into the intergenic space region between 16S-23S rRNA gene. The nucleotide sequences were 77 bp long in both JWB and MD, and showed 97.4% sequence homology. Based on the phylogenetic analysis of the two phytoplasmas, the JWB phytoplasma belongs to the Elm yellow phytoplasma group (16S rV), whereas, the MD phytoplasma belongs to the Aster yellow group (16S rI).
Stolbur Phytoplasma was detected from Lilium Oriental hybrids showing flattened stem and flower clustering. The presence of phytoplasma was demonstrated using polymerase chain reaction(PCR) assays with phyto-plasma-universal(P1/P6)and stolbur phytoplasma-specific 16F1/R1-S primer pairs amplifying phytoplasma 16S rDNA regions. Nucleotide suquences of the phytoplasma 16S rDNA were determined. Nucleic acid extracted from lily amplified 1.5 kb DNA with a phytoplasma universal primer pair. In nested PCR, 1.1 kb PCR product was obtained using specific primer pair, indicating an isolate of stolbur phytoplasma. Nucleotide sequence of phytoplasma 16S rDNA reported in this study showed 99.5% and 99.1% identities with two known stolbur phytoplamas (16Sr XII-A). Also, it exhibited a sequence homology of 98.0% with phormium yellow leaf (16Sr XII-B), and 97.9% with Australian grapevine yellows (16Sr XII-B). Meanwhile, it showed 98.1% identity with strawberry green petal phytoplama, (16Sr1-C), and 94.7 % with American aster yellows (16Sr1-B). Homology percentage of the 16S rDNA nucleotide sequence suggests that this phytoplama could be classified into the stolbur phytoplasma, subgroup A (16Sr XII-A), as a type strain stolbur.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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