Kim, Kye-seong;Roh, Sang-ho;Lee, Kang-nam;Lee, Byeong-chun;Hwang, Woo-suk
Korean Journal of Veterinary Research
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v.37
no.4
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pp.925-934
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1997
This study was directed at inducing the production of antibodies by immunizing heifers with bovine sperm antigen and on measuring the serum antibodies using indirect immunofluorescence assay(IFA) and agglutination test. The effect of antisperm antibodies on fertilizing capacity of bovine spermatozoa was evaluated. 1. Three heifers between 12- and 15- month old were immunized with bovine spermatozoa or phosphate-buffered saline. In heifers immunized with bovine spermatozoa serum IgG level was highest between 3 weeks and 5 weeks postimmunization detected by IFA. The antibody levels persisted through week 7 and slowly declined until week 20 and then antisperm antibodies were localized on spermatozoa. The fluorescent antisperm antibodies were detected at 2~20 weeks and at 6~9 weeks postinoculation on acrosome and tail, respectively. Among 21 sera from repeat breeder cows, only one cow has shown positive antisperm antibody response detected by IFA. 2. In spite of vital rate of bovine sperm after swim-up was not significantly affected by different concentration of antisperm antibodies in sera, the numbers of bovine sperm after swim-up were significantly reduced in proportion to the increased concentration of antibodies. Above 1/512 dilution of antibody neither influence on vital rate and numbers of bovine sperm nor sperm agglutination after swim-up. The study has also shown that the vital rate and number of sperm after swim-up and capacitation were also significantly reduced by the addition of antisperm antibodies. Although antisperm antibodies did not influence on the acrosome reaction rate of sperm during swim-up, did significantly reduce the sperm acrosome reaction rate after capacitation. The studies have resulted that the bovine antisperm antibodies can prevent the sperm motility by agglutination and block the capacitation and acrosome reaction of bovine sperm.
The present study was performed to investigate the effects of caffeine and heparin on capacitation and acrosome reaction of bovine spermatozoa, effects of antisperm antibodies on acrosome reaction of bovine spermatozoa. The rates of acrosome reaction in control group, caffeine treated group, heparin treated group, caffeine-heparin complex treated group were 40.3, 54.3, 63.3, 72.3%, respectively and there were significant differences among the groups(p<0.01), especially higher in caffeine-heparin complex treated group than the others. The rates of acrosome reaction of antisperm antibodies serum supplemented groups(5, 10 and 20%) were 60.4, 48.9 and 37.1%, respectively and there were significant differences among the groups(p<0.0l), and the more increases in serum concentrations, the more decreases in acrosome reaction, but this phenomenon was not seen in fetal calf serum supplemented group and heifer serum group. When the serum concentration was 5%, the rates of acrosome reactions were significantly lower in fetal calf serum supplemented group than heifer serum group and in antisperm antibodies serum group(p<0.01), and there were no significant differences between heifer serum group and antisperm antibodies serum group(p<0.01). When the serum conecntrations were 10%, 20%, the rates of acrosome reactions were significantly lower in antisperm antibodies serum supplemented group than in fetal calf serum group and in geifer serum group(p<0.01), and there were no significant differences between fetal calf serum group and heifer serum group(p<0.01). These results indicate that caffeine-heparin complex treatment is very effective for inducing acrosome reaction of bovine spermatozoa and that antisperm antibodies block acrosome reaction.
Sera from 95 infertile males males were assayed for antisperm antibodies using the Tray Agglutination Test(TAT) and indirect Immunobead Test(IBT). The correlation between antisperm antibodies and seminal analysis in infertile men was evaluated, and the TAT was compared with new indirect IBT. The results were obtained as follows. 1. Positive rate for antisperm antibodies was high in azoospermia, oligoasthenospermia, pyo-spermia, in order, Especially in obstructive azoospermia, the rate was the highest in both methods 2. Positive rates for antisperm antibodies in TAT was higher than indirect IBT. 3. Among the isotypes of the immunoglobulins, IgG were most prevalent. IgG and IgA were bound predominantly to the head and IgM predominantly to the tail up.
To investigate the influences on semen parameters and fertilizing capacity of immunoglobulin (Ig) isotypes and regional distribution of antisperm antibody (ASA) on the human sperm surface. Sixty-seven ASA-positive patients were compared with 96 ASA-negative donors. ASAs in semen showed significant negative effects on both semen parameters and fertilizing capacity; in those with ASAs in the sperm head and/or tail, the reductions were significant. In the head as well as the tail, there was close correlation between fertilizing capacity and both IgG and IgA. Both semen parameters and fertilizing capacity are significantly affected by the presence of ASA in semen. In particular, antibodies IgG to sperm head and/or tail, and antibodies IgA to sperm tail appeared to have a highly detrimental effect on fertilizing capacity.
Various immunoserologic and cellular immunity techniques have been used to explore the presence of antisperm antibodies in the serum and seminal plasma of male patients and in the blood and genital fluid of infertile women. Several recent comparative investigations using various assays to detect and quantitate levels of antibody to human spermatozoa have produced widely varying results. So the first WHO workshop on iso- and autonatibodies to human spermatozoa in 1974 tried to establish some unification in the techniques used. The purpose of this study is to compare the results of two methods-the Kibrick macro-agglutination test and the Isojima micro-immobilization test-using the same test materials based on recommandation from WHO workshop. The results are as follows: 1. Twenty normal controls showed negative reactions in all the 2 tests. Out of 25 patients, the positive sera were noted in 15 (60%) on the Kibrick test and 13 (51%) on the Isojima test. 2. Twelve (48%) out of 25 patients showed positive reactions in the two tests, and 16 (64%) out of 25 patients showed positive reaction in one or more tests. 3. The titers of the antisperm antibodies on the Kibrick test was higher than that on the Isojima test. Therefore, it seems to be possible to increase the chances of detection of the antisperm antibodies, if two tests are imployed.
With the indirect immunobead antisperm antibody test(IBT) a prospective study was conducted to evaluate the immune status of 38 men before and after vasovasostomy. The pregnancy and postoperative semen analysis were evaluated. The results were compared between pregnant (n=14) and non-pregnant(n=24) group. The postoperative sperm motility was inversely correlated with the titer of the preoperative and postoperative IgG(p<0.01). The preoperative and postoperative titer of IgG were significantly higher than the titer of IgA or IgM(p<0.05). The mean percentage of the positive IBT(20 per cent binding or more) of the pregnant group was significantly lower than non-pregnant group in the preoprative and postoperative IgG(p<0.05). Immunobead binding restricted to the head and tail of a sperm in IgG was predominant and significantly lower in the pregnant group (p<0.05). In conclusion, IgG especially immunobead binding to the head and tail can be used as a sensitive screening assay for antisperm antibodies after vasovasostomy.
The effect of antisperm antibodies (ASA) on the human in vitro fertilization (lVF) process was evaluated by analyzing the IVF data between October and December 1988 at Seoul National University Hospital prospectively. The immunobead test (IBT) was used to identify Ig G, Ig A, and Ig M in the serum, semen, and follicular fluid from 93 couples undergoing in vitro fertilization-embryo transfer (lVF-ET ) . The fertilization rate in couples with ASA to sperm head of at least one isotype in female serum (n= 10) was significantly less than that in couples without ASA to sperm head (n=83; 28.5% versus 45.3% , p=0.028). The presence of ASA to sperm head in follicular fluid (n=8) also reduced fertilization rate from 45.3% to 24.4% (p=O.0l3). However, ASA binding to sperm head in male serum and semen did not predict fertilization. Similarly, ASA binding to sperm tail and tail-tip did not reduced the oocyte fertilization rate significantly in any of the fluids tested. The zygote cleavage rate was not reduced in the presence of ASA. These results suggest that the presence of ASA to sperm head in female serum and follicular fluid is associated with reduced fertilization in IVF-ET. Another observation is that the oocyte that do fertilize in the presence of antisperm antibodies can subsequently proceed with normal cleavage. The results of this investigation therefore suggest that the IBT is a useful test forscreening of women participat.ing IVF-ET program.
Previous studies have indicated that immunological factor is responsible for the infertility. We have detected sperm antibodies in ZIFT patients which grouped as fertilization failure (A; n=18) and low fertilization rate (${\leq}50%$)(B; n=20). Patients, however, had normal oocytes and sperms. We collected serum from wives and semen from husbands and donors (fertile sperm), if it was needed. We examined class, binding patterns and amounts of antisperm antibodies(ASA) by direct and indirect immunobead binding assay. In group A, 11 husbands were ASA positive showing 62.2% and 61.1% binding with IgA and IgG, respectively, and two wives were ASA positive showing 70.0% and 71.0% binding with IgA and IgG, respectively. Binding sites were mainly at the head of sperms (84%). In group B, 8 husbands were ASA positive showing 37.5% and 40.0% binding with IgA and IgG, respectively, and two wives were ASA positive showing 41.3% and 42.0% binding with IgA and IgG, respectively. Binding sites were also mainly at the head of sperms (78%). For the treatment of ZIFT patients who had fertilization failure at the first trial, we used albumin fractionation method and dilution method with 30% fetal cord serum (FCS) to reduce the titer of ASA. We used partial zona dissection (P.Z.D.) method for wives who have antisperm antibodies in their serum. According to represented method, we could inhance the fertilization rate to 60.0% by albumin fractionation and 20.0% by P.Z.D., respectively. We concluded that the use of micromanipulation like P.Z.D. or the other sperm processing methods is required to increase a chance of fertilization. This result suggested that it should be a prerequisite to test antisperm antibodies prior to entering assisted reproductive technologies (ART) programs.
Park, Sung-Eun;Choi, Dong-Hee;Rho, Hwan-Cheol;Ko, Jung-Jae;Park, Jong-Young;Cha, Kwang-Yul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.20
no.1
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pp.45-51
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1993
Micromanipulation procedures have been used to improve fertilization rates in patients with male factor or with unexplained infertility. Partial zona disseetion(PZD), a method using mechanical force to open the zona pellucida increase the chances of fertilization. The purpose of this study is to increase rates of fertilization and pregnacy in the ART program by using PZD. The influence of PZD on the fertilization rate was investigated in 57 couples with semen defects, antisperm antibodies(ASA), or unknown factors. PZD directly performed in 35 couples with a history of fertilization failure in previous cycle (Group 1), and PZD applied in 22 couples with the failure of initial fertilization in the same cycle (Group 2). The fertilization rates of the male facor, ASA positive factor and unknown factor in Group 1 were 37.6%, 20.0% and 59.2%, respectively. The rates of fertilization of male factor, ASA positive factor and unknown factor in Group 2 were 34.8%, 20.0% and 26.5%, respectively. The incidences of polyspermy in Group 1 and Group 2 were 5.9% and 9.0%, respectively. Among 35 patients of Group 1, one patient was pregnant and successfully delivered, whereas 1 of 22 patients of Group 2 became pregnant, but aborted at 7 weeks.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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