천연고분자물질로서 키토산(chitosan)은 생체적합성, 생분해성, 무독성과 같은 생체재료로서의 우수한 물리화학적 특성에도 불구하고 산(acid)으로 용해하여야 한다는 문제점으로 인해 유전질병이나 암과 같은 불치병의 치료를 위한 생리활성 물질의 생체 내 전달물질로서의 응용이 어려운 실정이다. 따라서 키토산의 이러한 문제점을 획기적으로 해결한 높은 반응성과 강한 양전하(+)를 띠고 있는 저분자량 수용성 키토산(low molecular weight water-soluble chitosan, LMWSC)을 이용하여 난용성 약물뿐만 아니라 치료유전자와 같은 생리활성물질을 안전하게 생체 내 표적위치에 운반할 수 있는 전달체를 제조할 수 있고, 인체 내 무해하고 치료효율이 높은 치료시스템을 개발할 수 있을 것으로 사료된다. 또한 질병의 치료를 위해 무엇보다 중요한 인자는 특정 병소조직에만 발현되는 항원이나 수용체를 밝혀내고 이들과 결합할 수 있는 항체나 리간드를 다양한 생체재료에 개질함으로써 질병 치료의 효율을 높이는 것이 가장 중요한 전략이라고 할 수 있다. 약물이나 유전자를 전달할 수 있는 많은 양이온성 합성고분자에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있으나 체내 독성이나 효율성 면에서 많은 문제점을 가지고 있다. 따라서 본 총설에서는 인체 내 전달 효율을 높이기 위한 기능성기의 도입과 유전자와의 복합체 형성을 가능하게 하는 유리 아민기를 가진 인체 무해한 저분자량 수용성 키토산을 이용하여 특정 조직을 표적할 수 있는 다양한 기능성기 도입의 특성과 치료 전략에 대해 기술하고자 한다. 이러한 전달체의 개발은 앞으로 인간에게 유발되는 가장 난치병 중의 하나인 암 치료에 있어 밝은 전망이 될 수 있을 것으로 사료된다.
Since there is no consensus about the most reliable assays to detect invasive aspergillosis from samples obtained by minimally invasive or noninvasive methods, we compared the efficacy of an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for galactomannan (GM) detection and quantitative real-time PCR assay (qRT-PCR) for the diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis. Neutropenic, male Sprague-Dawley rats (specific pathogen free; 8 weeks old; weight, $200{\pm}20g$) were immunosuppressed with cyclophosphamide and infected with Aspergillus fumigatus intratracheally. Tissue and whole blood samples were harvested on days 1, 3, 5, and 7 post-infection and examined with GM ELISA and qRT-PCR. The A. fumigatus DNA detection sequence was detected in the following number of samples from 12 immunosuppressed, infected rats examined on the scheduled days: day 1 (0/12), day 3 (0/12), day 5 (6/12), and day 7 (8/12) post-infection. The sensitivity and specificity of the qRT-PCR assay was 29.2% and 100%, respectively. Receiver operating characteristic curve (ROC) analysis indicated a Ct (cycle threshold) cut-off value of 15.35, and the area under the curve (AUC) was 0.627. The GM assay detected antigen in sera obtained on day 1 (5/12), day 3 (9/12), day 5 (12/12), and day 7 (12/12) post-infection, and thus had a sensitivity of 79.2% and a specificity of 100%. The ROC of the GM assay indicated that the optimal Ct cut-off value was 1.40 (AUC, 0.919). The GM assay was more sensitive than the qRT-PCR assay in diagnosing invasive pulmonary aspergillosis in rats.
유색미의 항암활성을 in vitro에서 조사하기 위한 기초실험으로서, 유색미 겨의 유기용매 추출물에 의한 DNA strand scission 및 발암 promotion의 억제효과를 조사하였다. 실험에는 유색미로 상해향혈나와 수원415호의 두 품종과 함께 대조구로 추청을 사용하였다. 품종별 변이원 억제활성은 70% 에탄올추출물 및 모든 유기용매 분획물에서 추청<상해향혈나<수원415호의 순서로 증가하였다. 그러나 DNA strand scission에 대한 억제활성은 70% 에탄올 추출물에서 상해향혈나<추청<수원415호의 순서로 증가하였다. 클로로포름 분획물에 대하여 조사한 결과, 상해향혈나에는 거의 DNA strand scission을 억제하는 활성이 없었으며, 예상과는 달리 추청은 오히려 상해향혈나보다 약간 활성이 높았다. 그리고 수원415호의 클로로포름분획물은 70%에탄올 추출물의 경우와 비슷한 수준의 강한 억제활성을 보였다(약 50% 억제). 발암 promotor에 의하여 유도된 Epstein-Barr 바이러스의 early diffusible antigen의 발현수준을 지표로 하여 70% 에탄올 추출물의 발암 promotion의 억제효과를 측정한 결과, 추청<상해향혈나< 수원415호의 순서로 억제활성이 높아짐을 알 수 있었다. 세 품종 모두의 클로로포름분획물에서 발암 promotion을 완전히 차단하는 효과가 발견되었지만, 세포독성이 동반되지 않은 promotion에 대한 억제효과는 수원415호에서만 유일하게 관찰되었다.
혈청내 특이 항체가를 측정하여 폐흡충증을 진단하는 방법은 폐홉충중 환자가 치료받거나 자연 치유된 후 일정기간 지나연 특이 항체가가 음전(陰轉 : negative conversion)된다는 것이 그 전제 조건이다. 이 연구는 폐홉충 중 환자를 프라지콴텔(praziquantel)로 치료한 후 특이 항체가가 변화하는 양상과 음전되는 기간을 면역효소측정법(ELISA)으로 관찰하고, 또 치료 후 회복기 혈청에서 항원 구성 단백칠 중 반응하지 않던 단백질에 대한 새로운 항체가 형성되는지를 관찰하기 위하여 실시하였다. 1982년 5월부터 1988년 9월까지 혈청학척으로 진단한 폐홉충중 환자 210명 중 13명이 프라지관탤 치료($75mg/kg/일{\times}2일$) 후 4개월 이후에 한번 이상 추척검사를 받았다. 이들의 혈청 46개에서 다시 면역효소측정법으로 특이 항체가를 측정하고 또 SDS-폴리아크렬아마이드젤 전기 영동후 연역얼룩법(immunoblot)을 실시하였다. 추적검사를 받은 13명 중 1명은 20개월후 중상이 다시 나타났고 또 특이 항체가가 양성이어서 치료실패자로 하였다. 그 이외의 환자 12영은 치료 후 1주일 이내에 중상이 사라지고 추적 기간은 다르나 항체가가 음전 또는 현저한 저하 경향을 보여 치유된 환자로 판정하였다. 항체가의 변동은 치료후 3개월 이내에는 두가지 양상이었는 바 항체가가 높아지거나 변동이 없는 경우(3개월 이내에 추척검사를 하였던 환자 9영중 6명)와 그대로 저하하기 시작하는 경우(9명중 3명)로 나눌 수 있었다. 치료 후 항체가가 즉각 저하하는 경우에는 계속 저하하여 4~12개월이연 음전하였다. 일시척으로 항체가가 상승하였던 환자에서는 4개월 이후 서서히 저하하며 9~18개월에 음 전하였다. 폐흉충종의 첫 중상 발현후 치료할 때까지의 기간이 짧을수록 음천 기간은 짧은 경향을 보였고 치료 후 3개월간의 일시적인 항체가 상승 현상은 없었다. SDS-폴리아크릴마이드젤 전기영동 후 면역얼룩법을 실시한 바 치료 후 환자 혈청은 치료 전의 반응 양상을 그대로 유지하면서 서서히 반응이 약해지는 방향으로 변화하였으며 치료 전에 반응하지 않던 항원에 새롭게 반응하는 항체가 나타나는 경우는 드물었다.
건강 검진시 정상으로 판정된 한국 성인 2626명의 혈청 암태아성항원 농도를 이용하여 통계적 분석을 실시하였다. 1) 한국 정상 성인에서 혈청 암태아성항원의 경계치는 남자에서 9.28ng/m1, 여자에서 5.90ng/m1이었으며 이를 연령군별로 흡연력에 따른 분포를 보았더니 50세이상에선 남여 모두 항상 흡연자가 비흡연자보다 높았다. 각 연령별 흡연력에 따른 경계치는 Table 4와 같았다. 2) 혈청 암태아성항원은 연령이 증가함에 따라 증가하였다. 3) 혈청 암태아성항원은 흡연군에서 현재 비흡연군과 과거 흡연군 보다 높았다. 4) 혈청 암태아성항원은 남성에서 여성에서 보다 높았다. 5) 흉부 방사선 촬영에서 결핵 소견이 있으면 정상인 군보다 혈청 암태아성항원이 높았다. 6) 혈청 암태아성하원은 음주력과 비만도와는 연관이 없었다.
본 연구에서는 형질전환된 벼 세포를 이용하여 자가면역 질환의 치료제인 human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig)을 생산하였고, RAmy3D promoter와 RAmy1A signal pertide를 사용하여 당 고갈시에 목적 단백질의 발현과 배지로의 분비를 유도하였다. 이 시스템의 문제점은 당 고갈에 의해 목적 단백질의 생산이 유도되기 때문에 에너지원이 없어 세포의 사멸, 이로 인한 배지내로의 protease 분비를 유발하게 된다. 이것은 목적 단백질의 안정성 저해와 궁극적으로는 생산성의 손실을 일으킨다. 따라서 세포를 보호하여 사멸을 막는 효과가 있음이 보고된 proline을 첨가하여 생산성 증진 효과를 확인하고자 하였다. 4 mM의 proline을 첨가하여 배양하였을 때, 세포의 사멸 및 pretense의 분비를 줄일 수 있었고 이는 결과적으로 hCTLA4Ig의 생산성 증진으로 이어졌다. 또한 단백질 안정제를 통하여 배지내로 분비된 hCTLA4Ig의 안정화를 이루어 생산성을 높이고자 하였다. 0.01 g/L의 gelatin을 적용하여 생산성 증진 효과를 확인하였으며, 이는 hCTLA4Ig의 안정화에 의한 것임을 알 수 있었다. Pretense의 분비를 줄이기 위한 세포 보호와 pretense의 공격을 막기 위한 hCTLA4Ig 보호를 통하여 형질전환된 벼 세포를 이용한 hCTLA4Ig의 안정성 및 생산성을 증대시킬 수 있음을 확인하였다.
Purpose: To determine prognostic significance of lymphovascular invasion (LVI) in prostate cancer patients who underwent adjuvant or salvage postoperative radiotherapy (PORT) after radical prostatectomy (RP) Materials and Methods: A total of 168 patients with prostate cancer received PORT after RP, with a follow-up of ≥12 months. Biochemical failure after PORT was defined as prostate-specific antigen (PSA) ≥0.2 ng/mL after PORT or initiation of androgen deprivation therapy (ADT) for increasing PSA levels regardless of the value. We analyzed the clinical outcomes including survivals, failure patterns, and prognostic factors affecting the outcomes. Results: In total, 120 patients (71.4%) received salvage PORT after PSA levels were >0.2 ng/mL or owing to clinical failure. The 5-year biochemical failure-free survival (BCFFS), clinical failure-free survival (CFFS), distant metastasis-free survival (DMFS), overall survival, and cause-specific survival rates were 78.3%, 94.3%, 95.0%, 95.8%, and 97.3%, respectively, during a follow-up range of 12-157 months (median: 64 months) after PORT. On multivariate analysis, PSA level of ≤1.0 ng/mL at the time of receiving PORT predicted favorable BCFFS, CFFS, and DMFS. LVI predicted worse CFFS (p = 0.004) and DMFS (p = 0.015). Concurrent and/or adjuvant ADT resulted in favorable prognosis for BCFFS (p < 0.001) and CFFS (p = 0.017). Conclusion: For patients with adverse pathologic findings, PORT should be initiated as early as possible after continence recovery after RP. Even after administering PORT, LVI was an unfavorable predictive factor, and further intensive adjuvant therapy should be considered for these patients.
심장사상충 감염은 개에서 심부전과 폐질환을 유발하는 치명적인 질환이다. 이러한 심장사상충 감염은 너구리들을 포함한 야생육식동물에서도 발생을 한다. 최근 연구를 통해, 야생 너구리 집단에서 상대적으로 높게 발생하는 유병률을 확인할 수 있다. 그러므로, 본 논문은 한국의 야생너구리에서 발생하는 D. immitis 의 유병률과 감염된 너구리의 회복률에 대한 평가를 하기 위해 고안되었다. 한국 너구리의 D. immitis 에 대한 전체의 유병률은 17.8%이었다. 수컷 너구리의 유병률은 21.8%이었고, 암컷 너구리의 유병률은 12.8% 이었다. 심장사상충 항원 검사에서 양성이 나온 17마리의 너구리들에게 마이크로필라리아는 관찰되지 않았다. 본 논문의 결론은 한국의 D. immitis 의 유병률이 일본에 비해 2배이상 높은 것으로 확인되었다. 또한, 고양이와 마찬가지로 너구리들도 마이크로필라리아혈증이 드문 것으로 나타났다.
Objectives : Scutellaria barbata has been widely used in oriental medicine used for treatment of acute and chronic inflammatory diseases. In this study, to investigate the protective effect of Scutellaria barbata on type I allergic response, we determined whether Scutellaria barbata inhibits early or late allergic responses. Methods : To assess the effect of Scutellaria barbata Pharmacopuncture Extract(SB) in RBL-2H3 cells, we investigated the levels of the markers of degranulation such as ${\beta}$-hexosaminidase and histamine, inflammatory mediator such as IL-4, TNF-${\alpha}$, PGE2 and cysLT, and mRNA expression of cytokines and enzymes. In addition, we determined the levels of intracellular ROS by DCFH-DA assay and the free radical scavenging activity by DPPH method. Results : We found that SB suppressed the release of ${\beta}$-hexosaminidase and histamine and the production of IL-4, TNF-${\alpha}$, PGE2 and cysLT in RBL-2H3 by the antigen stimulation. SB also significantly inhibited the enzyme mRNA expressions, such as HDC2, COX-1, COX-2, 5-LOX and iNOS2, along with reduced cytokine mRNA expressions, such as IL-$1{\beta}$, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, TNF-${\alpha}$ and GM-CSF in RBL-2H3. In addition, SB suppressed the levels of intracellular ROS. Conclusions : Our results indicate that SB protects against type I allergic response and exert an anti-inflammatory effect through the inhibition of degranulation, inflammatory mediator release and mRNA expression of cytokines and enzymes.
This study was undertaken to observe the relationship between salivary IgA, IgG, agglutinin titer & dental caries. The subjects divided into two groups, an active caries group (AC group) and caries-free and treated caries group (CFTC group). The AC group consisted of 36 subjects who had one or more carious lesions and the CFTC group of 12 subjects who had no evidence of caries or had filled teeth without present carious teeth for the last six months. The IgA, IgG and IgM levels in their saliva were measured by single radial immunodiffusion method using a disposable low-level immunodiffusion plate. The salivary agglutinin titers to Streptococcus mutans were measured by microtitration system. The results were as follow; 1. The mean value of IgA concentration in saliva of AC group was slightly higher than that of CFTC group, but its difference was slight. 2. The mean value of IgG concentration in saliva of AC group was slightly lower than that of CFTC group. The IgM concentration in saliva of both groups was neither below 1.1 mg/dl nor detected on LC partigen immunodiffusion plate. 3. There was no difference in the agglutinin titer to S. mutans antigen by serotypes, but low level agglutinin to type d was measured in both groups. 4. AC group showed low correlation between IgA, IgG & DMFT, but CFTC group revealed negative correlation. 5. The relationship between salivary IgA & agglutinin titers to S. mutans was low correlation in AC group, but CFTC group showed significant positive correlation. (P<0.05) 6. There were no specific correlations among the concentrations of salivary immunoglobulins, agglutinin titers to S. mutans, and the DMF teeth. They had no close concern to induce the dental caries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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