• 한국어병학회지
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• 제21권3호
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• pp.201-208
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• 2008

We compared the pathogenicity and antigenicity of two different Edwardsiella tarda (E. tarda) strains KFE and Edk-2 isolated in Korea and Japan respectively. In the pathogenicity analysis with challenge test against loach, E. tarda KFE isolate showed stronger pathogenicity compared to that of E. tarda Edk-2 isolate. The differences were also confirmed by the comparison of OMP (outer membrane protein) in SDSPAGE which showed three major bands, 41kDa, 37kDa and 30kDa, for E. tarda KFE isolates and two major bands, 41kDa and 30kDa, for E. tarda Edk-2 isolates. On the base of these results, we tried to determine the differences of antigenicities of these two isolates in loach which is one of the important species in freshwater aquaculture in Korea. Numbers of specific antibody secreting cells (SASC), appeared to be higher in loach immunized with FKC of E. tarda Edk-2 than loach immunized with FKC of E. tarda KFE. ELISPOT-assay for the comparison of antigenicity showed relatively high percentage of cross-reaction and implied the presence of some common epitopes in the antigens of these two E. tarda isolates.

• 대한수의학회지
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• 제40권1호
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• pp.1-16
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• 2000

Nowadays, mongolian gerbil is notably utilized for the research of brain and water deprivation because of a congenital incomplete willis circle structure in the brain, audiogenic seizure in low noise, and special cholesterol metabolism without water absorption for a long time. In this study, we are intend to identify the morphological changes of the catecholaminergic neuron of brain according to the time lapse in the condition of long term water deprivation. 55 mongolian gerbil were divided 10 groups(control, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 42th day water deprivation group), of which each group include 5 mongolian gerbils and 5 normal mongolian gerbils in control group were also used for brain atlas as a control. The brains were observed by the immunohistochemical stain using the TH, DBH and PMNT antibody. The results were as followings; 1. The nerve fibers of the TH-immunoreactive neuron were observed only in the and corpus striatum of the telencephalon. 2. Intensity of the immunostain of the nerve fiber in the cerebral cortex and corpus striatum was decreased gradually day by day after water deprivation. 3. The TH-immunoreactive nerve cells were observed in the paraventricular and periventricular nucleus of the 3rd ventricular in the hypothalamus of mongolian gerbil but the number of nerve cells were decreased from the first day of the water deprivation to the 10th day and increased until the 20th day, after than redecreased from the 20th day by the continuous water deprivation. The number of nerve fibers in this area were increased in the first day, but decreased from the 2nd day of water deprivation. The shape and density of the dopamine secreting cells in the brain of mongolian gerbil by the immunoreactive stain were changed in the continuous water deprivation. In this results, we can conclude that dopamine concerned in the water metabolism of mongolian gerbil, and mongolian gerbil could be used as an animal model for the research of water deprivation.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권3호
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• pp.293-310
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• 1991

우리 나라의 중요한 인체 기생충인 간흡충(Cloncrchis sinensis)을 연구함에 있어, 단세포를 항체제조법을 이용하여 보았다. 간흡충의 성충 조(조)항원으로 면역한 마우스의 비장 림프구와 형질세포종(plasmacytoma) 세포를 융합하여 간흡충의 항원에 대한 단세포를 항체를 분비하는 융합 세포를 만들어, 간흡충 항원에 대한 특이 단세포군 항체를 얻은 후, 이의 특성 및 반응하는 항원의 특성을 분석하고, 아울러 ELISA 억제 검사법을 이용하여 면역 진단법 상 특이도의 개선을 모색하였다 그 결과, 간흡충 항원에 대한 항체를 분비하는 총 29개의 융합세포군을 확인하였는데, 이 중 8개는 다른 기생 충 항원에 대해 교차 반응을 나타내지 않는 높은 특이성을 지니고 있었다. 클로닝 후 선택된 6종류의 단세포군 항체는 Ig Gl이 넷이었고, 나머지는 Is G2b 및 Is A로 나타났다. 위와 같이 선택된 단세포를 항체 중 4개만이 자연 감염 시에도 표현되는 항원 결정기에 대하여 생성된 것으로 판단되었다. 효소 면역 전기영동 블로팅으로 분자량 l0KD, 34 KD 항원은 각각 CsHyb 0714-20 및 CsHyb 0605-10단세포군 항체와 항원항체 반응을 나타냄을 확인하였다. 간접형광항체법을 이용하여 카 항원 결정기의 충체 내 위치를 관찰한 결과, CsHyb 0714-20 단세포를 항체에 대한 항원은 충체의 표면 및 실질 대부분에 분포하였으며, CsHyb 0605-10 및 CsHyb 0714-25 단세포군 항체에 대한 항원은 충체의 실질 및 장관의 상피세포에 분포하고 있었다. 한편 CsHyb 0605-23 단세포군 항체에 대한 항원은 주로 자궁내 충란 주위에 많이 분포하고 있었다. 단세포군 항체와 반응하는 Sephadex G200 겔 여과 항원 분획을 검색한 결과, 검색한 항원 결정기는 모두 전반적으로 빨리 젤 여과를 통하여 나온 분회에 속하여 있는 것을 알 수 있었다. 한편 이 단세포군 항체를 인체 간흡충증의 진단에 응용하여 그 특이도를 개선하고자 하였다. 통상적인 방법의 ELISA로 시행한 항체가로는 간흡충 감염자의 75U가 양성 병위에 들었으며, 정상 대조군의 7.l%, 폐흡충 감염 자의 37.5%가 위 양성 반응을 보였다. 반면 CsHyb 0605-23 단세포군 항체를 함께 사용하여 ELISA억제 검사를 시행한 결과는 간흡충 감염자의 77.1%가 양성으로 판정되었으며, 정상 대조군 및 폐흡충 감염자에서는 양성 반 응을 찾아 볼 수 없어서 100%의 특이도를 나타내었다. 따라서 이러한 단세포군 항체를 이용한 ELISA 억제검사 는 통상적인 ELISA 검사에 비하여 같은 정도의 민감도를 유지하면서도 매우 높은 특이도를 가지는 것으로 판단되었다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제27권2호
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• pp.425-441
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• 1997

The neuropeptide substance P(SP) has been implicated in the mediation of inflammation and immune-mediated disease such as arthritis. Recently, it was reported that SP was markedly increased around the blood vessels in inflamed gingiva as well as in close association with the inflammatory cell infiltrate. These results support that SP may contribute to the pathophysiology of neuronal inflammation in human periodontal tissues. SP may regulate inflammatory/immune responses by stimulating the proliferation of human T cells, differentiation and antibody-secreting potential of B cells, macrophage respiratory burst, connective tissue proliferation, and the secretion of cytokines from monocytes and T cells. Here, I studied potential role of SP as a costimulatory chemical signal in inflammatory/immune responses, by determining the released proinflammatory cytokines such as $MIP-1{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, and IL-6 from culture supernatants of homogeneous immune cell lines. Serum free cell supernatants were concentrated with TCA precipitation, fractionated with SDS-PAGE, and subjected into western blot analysis. Among 15 cell lines tested, macrophage/monocyte cell line RAW264.7 and WRl9m.1 showed the highest level of induction of $MIP-1{\alpha}$ when stimulated with LPS. Discrete IL-6 bands with multiple forms of molecular mass were detected from supernatants of B cell lines A20(32kDa), Daudi(32, 35kDa), and SKW6.4(29kDa), which were expressed constitutively. $IL-1{\beta}$ could not be detected by the method of western blot analysis from supernatants of all cell lines tested except RAW264.7, WRl9m.1, and erythroid cell line K562 which showed the least amount of $IL-{\beta}$ secretion. SP $10^{-9}M$ with suboptimal dose of LPS treatment showed synergistic induction of $MIP-1{\alpha}$ release from RAW264.7 or WR19m.1, and also IL-6 release from A20, but this synergism is not the case in costimulation of RAW264.7 or WRl9m.1 with SP $10^{-9}M$ and TPA. Although treatment of T cell line CTLL-R8 with SP $10^{-7}M$ or PHA+TPA induced modest level of $MIP-1{\alpha}$ secretion, synergism was not observed when they are applied together. These findings all together suggest the possibility of a regulatory role of SP in inflammatory/immune reaction through differential modulation of bioactivities of other chemical cosignals.

• 한국어병학회지
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• 제19권1호
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• pp.45-54
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• 2006

E. tarda의 독성 비교를 위하여 일반 TSB, iron-chelate인 2,2‘-dipyridyl 첨가 TSB 및 Fe 첨가 TSB의 세 가지 조건에서 E. tarda를 배양하였다. 독성시험의 결과는 iron-chelate 첨가 시험구의 E. tarda에서 가장 낮은 독성을 나타내었다. 그리고 각각의 OMPs와 IROMPs을 분리하여 SDS-PAGE로 항원성을 비교한 결과, iron-chelate 첨가 시험구의 E. tarda IROMPs에서 68, 73 kDa 크기의 분자들이 더 많이 발현된다는 것을 확인할 수 있었다. 두 가지 vaccine 투여구 중에서 2,2‘-dipyridyl 첨가 배지로 배양한 균체로 제작한 DP-FKC 항원 투여구가 응집 항체가가 더 높게 나타났다. 면역반응의 변화를 알기 위한 응집 항체가 조사에서는 FKC 항원과 DP-FKC 항원 투여구에서 모두 대조구보다 높은 값을 나타내었고, 3주 째에 최고치를 나타내었다. ELISPOT을 이용한 항체 생성 세포 수의 검출에서도 응집 항체가와 유사한 pattern을 나타내었는데, 두 가지 vaccine 투여구에서 2주 째에 가장 많은 항체 생성 세포 수를 나타내었다. 공격실험에서는 3주 째에 FKC 항원 투여구가 50%, DP-FKC 항원 투여구에서는 80%의 생존율을 나타내었다. 전체적으로 DP-FKC 항원 투여구의 생존율이 높게 나타났다. 이상의 결과로부터 넙치에 대한 E. tarda의 vaccine으로는 현재 연구되고 있는 FKC vaccine보다 철 결핍 조건에서 배양된 균체의 항원인 DP-FKC vaccine이 동일한 조건으로 사용하였을 때 더 나은 방어력을 가진다는 것을 알 수 있었다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제15권1호
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• pp.55-66
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• 1998

사람과 동일한 증상을 나타내는 동물 모델이 없는 신증후출혈열의 병리 기전을 이해하기 위하여 in vitro culture system을 이용하였다. 신증후출혈열의 주된 병변이 혈관내피세포외에 섬유아세포가 많이 존재하는 신세뇨관 간질 및 폐간질임을 기초로 하여 계태아와 Mongolian gerbil의 섬유아세포에서 fibronectin에 대한 수용체인 ${\alpha}_5{\beta}_1$, integrin에 대한 항체를 처리하여 한탄바이러스 감염에 대한 영향을 관찰하였다. 초대 배양하여 사용한 계태아 섬유아세포 및 MGF 모두 한탄바이러스가 잘 감염되었으나 계태아 섬유아세포에 비하여 MGF에서 바이러스의 증식이 더 우수하였다. 계태아 섬유아세포와 MGF에서 ${\alpha}_5{\beta}_1$, integrin에 대한 항체 처리 5일 후 바이러스의 N 단백의 역가는 항체를 처리하지 않은 대조군에 비하여 각각 32.6%, 72.6%로 virion의 역가는 26.8%, 28.7%로 감소하여 두 세포에서 모두 감염력을 가진 바이러스의 양은 거의 동일하게 감소 되었다. 또한 ${\alpha}_5$ subunit와 ${\beta}_1$, subunit에 대한 항체를 MGF 세포에 처리한 후 바이러스의 N단백의 역가는 65.2%, 59.7%로 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin에 대한 항체 처리하였을 때(72.6%)와 거의 유사하게 감소하였고 감염력을 가진 바이러스의 양도 26.5%, 29.4%로 감소하여 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin에 대한 항체 처리시(28.7%)와 거의 유사하게 감소하였다. 이러한 결과는 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin이 한탄바이러스에 대한 수용체로써 작용할 가능성을 시사하였으며 또다른 기전으로는 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin의 차단에 의한 이차적인 영향으로 한탄바이러스의 증식에 커다란 영향을 미치는 것을 생각할 수 있었다.