Purpose: In this study, we investigated anti-thrombotic effects of Gamihyunbooleekyungtang currently used clinical treatment of dysmenorrhea and compared effects by decoction methods. Methods: Gamihyunbooleekyungtang was extracted by pressure extractor (GHYT) and nonpressure extractor(GHYT-1). Inhibitory effect of platelet cohesion, suppression effect of GPIIb/IIIa activity, inhibitory effect of $TXB_2$ and $PEG_2$ biosynthesis, and oxidative damage suppression effect were tested in vitro. Also suppression of pulmonary embolism was studied in vivo. Results: In this study, both GHYT and GHYT-1 extract showed a safety in cytotoxicity of hFCs. Both showed dose-dependent inhibitory effect on platelet coagulation. GHYT-1 extract is usually higher than GHYT, especially for $E_{max}$. GHYT and GHYT-1 extract showed dose-dependent inhibitory effect on GPIIb/IIIa activities. GHYT extract suppressed significantly $TXB_2$ biosynthesis at 1000, $500{\mu}g/m{\ell}$ and also suppressed significantly $PEG_2$ biosynthesis at $1000{\mu}g/m{\ell}$ as compared with the control group. GHYT-1 suppressed significantly $TXB_2$ biosynthesis at $1000{\mu}g/m{\ell}$ as compared with the control group. Also it suppressed pulmonary embolism triggered by collagen and epinephrine by respectively 50%, 75% as compared with the control group. Both GHYT and GHYT-1 extract showed dose-dependent decrease of oxidative damages caused by DPPH, whereas dose-dependent increase of superoxide dismutase like activity was observed. Conclusion: These results suggest that Gamihyunbooleekyungtang can be used for treating dysmenorrhea caused by thrombosis. Nonpressure decoction method is a little more effective, but more detailed studies would be needed.
흑생강은 생강과 초본과 뿌리식물로 태국 및 라오스에서는 크라차이담으로 불리며, 뿌리는 향신료와 차로 이용되어 왔다. 말린 뿌리는 위장장애, 통풍, 이질, 알러지 치료 및 강장용으로 전통적으로 이용되어 왔으며, 최근에는 항비만, 항산화, 항염증, 혈전 용해 활성 등의 다양한 유용 생리활성이 보고되어 있다. 본 연구에서는 흑생강의 혈액순환 개선 활성을 확인하기 위해, 흑생강 지하부의 ethanol 추출물 및 열수 추출물을 조제하고 각각 이의 순차적 유기용매 분획물인 hexane 분획물, ethylacetate (EA) 분획물, butanol 분획물 및 물 잔류물을 조제하여 각각의 성분을 분석하였고, 혈전 생성과 관련된 항응고 활성, 혈소판 응집저해 활성 및 적혈구 용혈활성을 평가하였다. 그 결과, ethanol 추출물의 EA 분획물 5 mg/ml 농도에서 TT, PT, aPTT를 각각 1.22, 1.49 및 15배 이상 연장시켜 강력한 항응고 활성을 나타냄을 확인하였으며, ethanol 및 열수 추출물의 EA 분획물 모두에서 동량의 아스피린보다 강력한 혈소판 응집저해 활성을 확인하였다. 또한 상기 EA 분획물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않았다. 본 연구 결과는 흑생강의 혈전 생성 억제 활성에 대한 최초의 보고이며, 흑생강의 EA 분획물이 인간 적혈구 용혈활성 없이 강력한 항응고 및 혈소판 응집저해 활성을 나타내어 신규의 항혈전제로 이용 가능함을 제시하고 있다.
Cordyceps is a genus of ascomycete fungi and is well known as one of the important medical fungi in Chinese, Korea, and other Asian countries, because of its various beneficial effects on human health. The pharmacological activities of Cordyceps extract are mainly focused on anti-cancer, anti-metastatic, and immune modulating effects. In the present study, we investigated whether the antiplatelet effect of ethanol extract of cultured Cordyceps militaris (CMEE) with FeCl3-induced arterial thrombosis model. We observed that CMEE exhibited a significant inhibitory effect against ADP and collagen-induced platelet aggregation. However, there were no significant differences in prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (aPTT). These results suggest that antithrombotic activity of CMEE is related to antiplatelet effect rather than anticoagulation effect, and CMEE may be a positive effect on improving blood circulation against vessel injury and occlusion.
Zearalenone (ZEA) is a phenolic resorcylic acid lactone compound produced by several species of Fusarium. ZEA has toxic effects in the testes of domestic and laboratory animals. Korean red ginseng (KRG), the steamed root of Panax ginseng Meyer, has multiple pharmacological effects such as vasorelaxation, anti-thrombosis, anti-hypertension, etc. In this study, we investigated the effects of KRG extract on testicular toxicity induced by ZEA. Rats were treated with 300 mg/kg oral doses of KRG for 4 weeks every other day. The rats were then treated with a single dose of 5 mg/kg ZEA delivered intraperitoneally, whereas control rats received only doses of the vehicle. As a result, germ cell apoptosis induced by ZEA was decreased by KRG pre-treatment. In addition, Fas and Fas-L expression was reduced in rats that received KRG pre-treatment compared to ones treated with ZEA alone. In conclusion, impaired spermatogenesis resulting from ZEA treatment was prevented by KRG through Fas-Fas L modulating.
Oleanolic acid (OA), a triterpenoid known for its anti-inflammatory and anti-cancer properties, is commonly present in several medicinal plants but its anticoagulant activities have not been studied. Here, the anticoagulant properties of OA were determined by monitoring activated partial thromboplastin time (aPTT), prothrombin time (PT), fibrin polymerization as well as cell-based thrombin and activated factor X (FXa) generation activities. Data showed OA prolonged aPTT and PT significantly and inhibited thrombin catalyzed fibrin polymerization. In addition, OA inhibited the activities of thrombin and FXa and inhibited the generation of thrombin or FXa in human endothelial cells. OA also inhibited TNF-${\alpha}$-induced tissue factor expression on human endothelial cells. In accordance with these anticoagulant activities, OA showed an anticoagulant effect in vivo. These results indicate that OA possesses antithrombotic activities and suggest that daily consumption of a herb containing OA may be preventing thrombosis in pathological states.
The use of recombinant human erythropoietin (rhEPO), a stimulator of erythropoiesis, banned in sports because of the medical risk associated with thrombosis. Due to analytical difficulties to differentiate between natural human EPO (hEPO) and rhEPO, blood parameters of erythropoiesis such as contents of hemoglobin (cut-off value <17.5 g/d l for man, and < 16.0 g/dl for women), hematocrit and reticulocytes (cut-off value <2.0%) were measured to focus the misuse of rhEPO. We conducted anti-doping test for 122 blood samples of the World Cup athletes. The mean values of key parameters are as follows; 14.5$\pm$1.0 g/dl for hemoglobin, 41.7$\pm$2.8% for hematocrit, and 1.3$\pm$0.4% for reticulocyte. Blood sample was found to be stable up to 8 hours for the reticulocyte measurement. In addition, the soluble transferrin receptor and ferritin levels were measured by immunoassay methods using plasma samples (n=28) in which the mean value was 0.8$\pm$0.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ and 54.6$\pm$33.7 ng/$m\ell$, respectively. The results indicate that all samples tested were negative for the blood parameters of indirect anti-doping test for hEPO misuse. The statistical evaluation suggest that several other parameters such as red blood cell, mean corpuscular hemoglobin concentration, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin and white blood cell could be considered as factors influencing hEPO function in addition to five parameters mentioned.
Platelet aggregation is essential for hemostatic process in case of blood vessels damages. However, excessive platelet aggregation can cause cardiovascular disorders including atherosclerosis, thrombosis and myocardial infarction. Scopoletin is usually found in the roots of genus Scopolia or Artemisia, and is known to have anticoagulant and anti-malarial effects. This study investigated the effect of scopoletin on human platelet aggregation induced by U46619, an analogue of thromboxane $A_2(TXA_2)$. Scopoletin had anti-platelet effects by down-regulating $TXA_2$ and intracellular $Ca^{2+}$ mobilization ($[Ca^{2+}]_i$), the aggregation-inducing molecules generated in activated platelets. On the other hand, scopoletin increased the levels of cyclic adenosine monophosphate (cAMP) and cyclic guanosine monophosphate (cGMP), which are known to be intracellular $Ca^{2+}$ antagonists. This resulted in inhibition of fibrinogen binding to ${\alpha}IIb/{\beta}_3$ in U46619-induced human platelet aggregation. In addition, scopoletin inhibited the release of adenosine trisphosphate (ATP) in dose-dependent manner. This result means that the aggregation amplification activity through the granule secretion in platelets was suppressed by scopoletin. Therefore, we demonstrated that scopoletin has a potent antiplatelet effect and is highly likely to prevent platelet-derived vascular disease.
본 연구에서는 팥의 유용기능을 이용한 고부가가치 식품개발을 목표로 무처리한 생팥 분말과 1차 자숙 후 고온 증자하고 동결건조하여 제조된 식용 팥 분말을 대상으로 에탄올 추출물을 조제하고, 각각의 유용성분 및 항산화, 항균, 항당뇨, 및 항혈전 활성을 평가하였다. 추출효율의 경우 생팥보다 증자팥이 약 1.2배 증가되었으며, 추출물의 총폴리페놀 함량도 증자팥이 1.2배 증가되었다. 그러나, 증자팥의 총플라보노이드 함량은 생팥 대비 30% 수준으로 감소하였으며, 총당 및 환원당 함량 역시 생팥 대비 27.9% 및 30.8% 수준으로 감소하였다. 항산화 활성은 생팥 및 증자팥에서 모두 우수한 음이온 및 양이온 소거능을 나타내었으나, 생팥이 증자팥보다 강력하였으며, 환원력 및 nitrite 소거능에서도 생팥 추출물이 우수하였다. 한편 ${\alpha}$-amylase 저해활성은 생팥에서 우수하였으며, ${\alpha}$-glucosidase 저해활성은 증자팥에서 상대적으로 우수하였다. 가장 특이한 활성은 항혈전 활성 평가에서 확인되었으며, 생팥 추출물은 매우 강력한 프로트롬빈 및 혈액응고인자 저해를 나타낸 반면 증자팥 추출물에서는 거의 활성이 나타나지 않았다. 상기 결과는 생팥의 증자과정 중 유용성분의 소실 및 유용활성의 손실이 나타남을 의미하며, 향후 생팥의 적합한 삶기 공정, 열처리 및 건조공정의 개발이 필요하며, 특히 현재까지 대부분 폐기되고 있는 증자팥 제조단계의 팥 자숙액의 효율적인 이용에 대한 연구가 필요함을 제시하고 있다. 본 연구결과는 기능성 팥 음료 및 양갱 제조 등을 위한 팥 고부가가치 식품 개발 기본자료로 활용될 것이다.
전세계적으로 발병 및 사망률이 높은 동맥경화증은 뇌졸중, 심근경색 등 심혈관질환의 주요 병증의 원인인 만성 염증성 질환이다. 동맥경화증은 지질 침착으로 인해 죽종(atheroma)이 형성되고, 혈전증이 유발되면서 관련 증상이 발생한다. 동맥경화증의 합성 치료제의 부작용 우려로 인해 생물 유래 항동맥경화 소재 개발의 필요성이 강조되고 있다. 이에 따라 동맥경화증의 개선 및 치료를 위한 바이오소재의 발굴 및 기전 규명 등 관련 연구가 활발히 수행되고 있다. 주로 동맥경화증 발병 관련 인자들을 조절하여 증상을 억제하거나 지연시키는 바이오소재들이 연구되고 있으며, 대표적으로 다당류, 폴리페놀, 코엔자임 Q10이 해당된다. 우수한 활성을 가진 바이오소재의 경우에는 생체 내(동물 모델)에서의 항동맥경화증 활성이 확인되었다. 본고에서는 동맥경화증의 발병 기전을 살펴보고, 항동맥경화증 활성이 보고된 바이오소재의 연구 동향 및 활용 전망을 제시하고자 한다.
식품으로 사용되는 팥은 생팥이 아닌 증자팥을 사용하며, 고온의 열수로 삶은 후 제조된다. 본 연구에서는 팥을 이용한 고부가가치 식품개발 연구의 일환으로, 생팥의 열수 추출물 및 팥을 삶은 후 증자액을 폐기하고 제조한 증자팥의 열수 추출물을 조제하고 이들의 유용성분 및 항산화, 항균, 항당뇨 및 항혈전 활성을 비교 평가하였다. 생팥 및 증자팥의 추출효율은 각각 16.2% 및 14.8%로 생팥이 1.1배 높았으며, 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 및 환원당 함량은 생팥이 증자팥보다 각각 2.5배, 2.1배 및 1.5배 높았다. 생팥의 DPPH 음이온 및 ABTS 양이온 소거능 및 환원력 평가 결과, 증자팥보다 모두 높게 나타나, 팥의 항산화 활성이 고온의 열수 삶기 과정 중 소실됨을 알 수 있었다. 반면, nitrite 소거능은 생팥보다 삶은 증자팥에서 더욱 강하게 나타났다. 항균 활성 평가결과, 생팥의 열수 추출물에서만 그람양성 세균에 대한 활성이 나타났으며, 증자팥의 경우 항균 활성은 $500{\mu}g/disc$ 농도까지 나타나지 않았다. 또한 in-vitro $\alpha$-amylase 및 $\alpha$-glucosidase에 대한 저해활성과 항혈전 활성에 관련된 thrombin, prothrombin, coagulation factors에 대한 저해활성 평가 결과, 생팥의 비가열 추출물과는 달리, 생팥 및 증자팥의 열수 추출물은 전분분해 저해 및 항혈전 활성이 인정되지 않았다. 본 연구결과는 생팥 및 증자팥의 열수 추출물의 항산화, 항당뇨 및 항혈전 활성이 비가열 에탄올 추출물보다 미약하며, 생팥의 유용활성이 증자팥에서는 거의 남아 있지 않음을 제시하고 있으며, 팥을 이용한 고부가가치 식품 제조 시 적합한 삶기 공정 및 팥 증자액의 효율적인 이용에 대한 연구가 필요함을 제시하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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