• 제목/요약/키워드: anion exchange chromatography

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Production of human leptin in Bacillus subtilis

  • 정기준;이상엽
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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    • pp.535-538
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    • 2000
  • Human leptin is a 16 kDa (146 amino acids) protein secreted from adipocytes and influences body weight homeostasis. In this report, active human leptin was successfully produced in the culture medium of Bacillus subtilis. After simple purification steps consisting of ammonium sulfate precipitation and anion-exchange column chromatography, 2.3 mg of leptin with a purity of greater than 95% was obtained from the 0.5 L culture with the recovery yield of 54.9%. The purified leptin showed the correct folding structure with one disulfide bond.

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유산균 발효에 의한 겨우사리 중의 렉틴 성분의 변화 -분리 및 정제- (Changes of Lectin from Viscum coloratum by Fermentation with Lactobacillus plantarum -Isolation and Purification-)

  • 박원봉;김희숙
    • 약학회지
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    • 제38권6호
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    • pp.687-695
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    • 1994
  • Lectin from mistletoe(Viscum coloratum) fermented by Lactobacillus plantarum for 1,2,3 days were obtained by salt fractionation, gel filtration, anion exchange chromatography and SDS-PAGE, and compared with the lectin from unfermented mistletoe. The new lectin of molecular weight of about 18,500D from fermented mistletoe was identified.

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가리비(Patinopecten yessoensis)의 간 췌장으로부터 분리한 Fucoidanase의 특성 (Characterization of Fucoidanase Screened from the Hepatopancreas of Patinopecten yessoensis)

  • 류병호;김동석;이영숙
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.25-29
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    • 1996
  • A fucoidanase, which was screened from the heptopancreas of Patinopectin yessoensis, was fractionated according to by ammounium sulfate precipitation and anion exchange chromatography. The crude fucoidanase activity was hydrolyzed a small amounts of fucoidan agar and not arrageenan. The crude enzyme hydrolyzed fucoidan to produce oligosaccha-rides of fucose, glucose, maltose maltotriose and maltoteraose as the reaction products.

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A Preparative Purification Process for Recombinant Hepatitis B Core Antigen Using Online Capture by Expanded Bed Adsorption Followed by Size-Exclusion Chromatography

  • Ho, Chin Woi;Tan, Wen Siang;Chong, Fui Chin;Ling, Tau Chuan;Tey, Beng Ti
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제19권4호
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    • pp.416-423
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    • 2009
  • Hepatitis B core antigen(HBcAg) is an important serological marker used in the diagnosis of hepatitis B virus(HBV) infections. In the current study, a fast and efficient preparative purification protocol for truncated HBcAg from Escherichia coli disruptate was developed. The recombinant HBcAg was first captured by anion exchange expanded bed adsorption chromatography integrated with a cell disruption process. This online capture process has shortened the process time and eliminated the "hold-up" period that may be detrimental to the quality of target protein. The eluted product from the expanded bed adsorption chromatography was subsequently purified using size-exclusion chromatography. The results showed that this novel purification protocol achieved a recovery yield of 45.1% with a product purity of 88.2%, which corresponds to a purification factor of 4.5. The recovered HBcAg is still biologically active as shown by ELISA test.

미생물에 의한 5′-GMP의 생산에 관한 연구 (제1보) XMP-aminase 생산균주의 분리 (Studies on the Fermentative Production of Guanosine -5′-monophosphate by Microorganism (Part 1) Derivation of XMP-aminase Producing Mutants)

  • 배종찬;손충홍;공운영;유주현
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제7권3호
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    • pp.127-133
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    • 1979
  • 5'-GMP의 직접발효생산균주의 분리목적으로 Breuibacterium ammoniagenes ATCC 6871에 자외선조사 및 NTG, DES 등의 변이제처리를 한 결과 guanine계 핵산관련물질을 직접 배지중에 축적하는 변이주는 분리할 수 없었으며, adenine영양요구주로써 GMP-reductase가 결핍되고 adenosine 및 AMP에 의해 생육저해를 받지 않는 변이주가 XMP-aminase activity가 현저히 높았음을 알았다. 이러한 변이주중 BA-17-2가 XMP-aminase의 activity가 가장 높았으며 또한 전환된 5'-GMP를 GDP나 GTP로 거의 인산화하지 않았으며 그리고 guanosine이나 guanine으로 분해하지 않았다. 생성된 5'-GMP를 anion exchange resin Duolite 102 D를 사용하여 분리하고 ultraviolet 및 Infra-red spectrum을 조사한 결과 5'-GMP로 동정되었다.

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동자개 Pseudobagrus fulvidraco의 난황단백질과 난황단백전구체의 분리와 면역학적 특성 (Purification and Immunochemical Characteristics of Yolk Protein and Vitellogenin in Korean bullhead Pseudobagrus fulvidraco)

  • 임상구;강봉정;한창희
    • 한국양식학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.285-293
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    • 2008
  • 본 연구에서는 동자개, Pseudobagrus fulvidraco의 난황단백질(Vitellin, Vg 난황단백전구체(Vitellogenin, Vg)를 분리하였고, 그 특성을 분석하였다. 난황단백질은 성성숙한 난소 난으로부터 gel filtration chromatography (Sephadex - G200)을 이용하여 분리되었다. 동자개의 난황단백질은 SDS-PAGE에서 분자량이 107 kDa인 1개의 subunit로 구성되어 있었고, 총 난황 단백질 분자량은 360 kDu으로_ 측정되었다. 난황단백전구체는 성숙한 수컷에 $E_2$를 삽입하여 유도하였고, anion exchange chromatography (Momo Q HR 5/5 column)을 이용하여 분리되었다. 분리된 난황단백전구체의 총 분자량은 450 kDa으로 계산되었고, 이는 SDS-PAGE하에서 110 KDa, 125 kDa와 147 kDa로 3개의 subunit로 구성되어져 있었다.

The Influence of Bakers' Yeast Cells on Protein Adsorption in Anion Exchange Expanded Bed Chromatography

  • Mei Chow Yen;Ti Tey Beng;Ibrahim Mohammad Nordin;Ariff Arbakariya;Chuan Ling Tau
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제10권3호
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    • pp.280-283
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    • 2005
  • The adsorption of a model protein bovine serum albumin (BSA) in expanded bed chromatography was undertaken by exploiting a commercially available expanded bed column (20 mm i.d.) from UpFront Chromatography and Streamline DEAE $(\rho=1.2g/cm^3)$ from Amersham Pharmacia Biotechnology. The influence of whole yeast cells on the adsorption capacity of column was explored by employing yeast cells in a concentration ranged of 0 to $15\%(w/v)$. Equilibrium isotherms for adsorption of BSA on Streamline DEAE were correlated by using Langmuir equation. The presence of yeast cells resulted in decreased of BSA binding capacity in both batch binding and expanded bed chromatography. Results indicated that the yeast cells act as competitor for proteins to bind to the sites on adsorbents.

돼지의 장에서 불리한 유산균의 항시균 활성물질에 관한 연구 (Study on the Antimicrobial Substances of Lactic Acid Bacteria Isolated from Pig's intestine)

  • 서정용;정명희;김영준
    • 유기물자원화
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    • 제17권4호
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    • pp.59-65
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    • 2009
  • 돼지의 장 및 분변에서 분리한 14종의 유산균으로부터 항세균 활성물질을 분석하였다. 각 균주의 세포배양액을 대상으로 여러 종류의 단백질 분해효소와 열, 알칼리 처리 등을 수행한 후 활성도를 조사한 결과, 효소 및 열처리 시료에서는 활성도가 유지되었으나, 1M의 NaOH로 중화 처리한 시료에서는 활성도가 사라짐에 따라, 항세균 활성물질이 단백질성이라기보다 유기산일 가능성이 큰 것으로 나타났다. Sep-pak $C_{18}$ Cartridges을 이용한 음이온 추출실험과 Bio-LC system을 이용한 high performance anion exchange chromatography를 실시하여 물질을 정제한 결과, 주요 활성물질로 옥살산, 구연산, 젖산 및 초산 등, 4종류의 유기산이 검출되었다. 이중 젖산은 각 균주에 따라 전체 유기산의 54~77%를 차지하는 것으로 나타나 유기산 중에서도 일차적인 항세균 활성물질일 것으로 추정된다.

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Bacillus sp. E1이 생성하는 Cyclodextrin Glucanotransferase의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of Cyclodextrin Glucanotransferase from Bacillus sp. El)

  • 박천석;우의전;국승욱;서병철;박관화;임훈
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제20권2호
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    • pp.156-163
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    • 1992
  • Cyclodextrin glucanotransferase 생산균주 선발배지를 이용하여 국내 토양으로부터 CGTase 활성이 우수한 Bacillus sp. E1균주를 분리하였다. FPLC를 이용하여 gel filtration과 anion exchange column chromatography를 한 결과 순수 정제된 단일 단백질을 얻을 수 있었으며, 정제된 효소의 최적 작용 pH 범위는 6에서 8까지 였고, 온도는 $60^{\circ}C$에서 최적을 나타냈다. 정제된 단백질의 분자량은 114,000, 등전점은 4.3이었다. 생성된 cyclodextrin은 $\beta$$\gamma$-cyclodextrin이 주였으며, 특이하게도 $\alpha$-cyclodextrin은 거의 생성되지 않았다. 작용 후 25시간 후 최대의 $\beta$-cyclodextrin이 생성되었으며, 이때 $\beta$-cyclodextrin과 $\gamma$-cyclodextrin의 생성비율은 7:1이었다.

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