• Journal of Microbiology
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• 제35권4호
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• pp.323-326
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• 1997

Toxin protein from Ustilago maydis virus SH14 isolated in Korea was purified using ethanol precipitation, cation exchange, gel filtration and anion exchange chromatography. The molecular weight of the purified protein was estimated to be 8.3 kDa by SDS-PAGE analysis. The Nterminal sequence of the protein is L-G-I-N-C(K)-R-G-S-S-Q--C(K)-G-L-S-G which is highly homologous with that of P4 toxin, but the amino acid composition and electrophoretic mobility in a native PAGE of the toxin protein were totally different from those of P4 toxin respectively. The SH14 toxin was shown to have immunological cross-reactivity about 50% with P4 toxin when examined by Western hybridization.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제15권9호
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• pp.719-724
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• 1994

Major cellulase components, such as three endoglucanases (endoglucanases I, II, and III) and one exoglucanase (exoglucanase II), were isolated from a commercial cellulase (Meicelase TP 60) derived from the fungus Trichoderma viride by a series of chromatography procedures. These procedures were the gel filtration on Bio-Gel, the anion exchange on DEAE-Bio-Gel A, the cation exchange on SP-Sephadex C50, and the affinity chromatography on Avicel cellulose. The average molecular weights determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoretic analysis were 51,000, 59,000, 41,000 and 62,000 Da for endoglucanases I, II and III and exoglucanase II, respectively. The extinction coefficients, ${\varepsilon}^{1%}$ 280 nm, of these enzymes were 11.7, 3.3, 7.2 and 11.3, respectively. Among them, the endoglucanase II showed the very low value of the coefficient compared with the others. On the other hand, it was found that endoglucanase II and III were of more random hydrolytic mode on carboxymethylcellulose as compared with those of endoglucanase I and exoglucanase II. Especially, endoglucanase I showed less random action than that of exoglucanase II. In the hydrolysis of insoluble cellulose by the enzyme components, cellobiose was the major product, but glucose was the major product by endoglucanase III.

• KSBB Journal
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• 제23권1호
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• pp.37-43
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• 2008

(주)녹십자는 1986년 "훽나인"을 B형 혈우병 치료제로 제조품목허가를 받아 B형 혈우병치료제 공급을 시작하였다. 또한 1991년 New York Blood Center에서 selvent/detergent 바이러스 불활화 방법을 도입하여 제조공정에 추가한 후 혈액유래 바이러스로부터 안전한 제품을 생산하여 왔다. 하지만 이 제품은 혈액응고 제2인자, 제7인자, 제10인자가 함유된 제9인자 복합체로, 정맥 혈전증과 파종성 혈관내응고병증 같은 혈전형성 부작용이 일어날 가능성이 있어, 훽나인보다 순도, 유효성, 바이러스 안전성이 우수한 제품의 개발이 필요하였다. 이를 위해 고순도 제9인자 제제인 "GreenNine VF" 제조공정을 개발하였다. GreenNine VF 제조공정은 기존의 훽나인 생산 공정에 heparin 친화성 크로마토그래피와 양이온 크로마토그래피가 추가된 공정으로, 바이러스 안전성을 증진시키기 위한 바이러스 필터 공정도 포함하고 있다. 이러한 공정에 의해서 산업적 규모로 생산된 GreenNine VF는 훽나인에 비해 순도와 바이러스 안전성이 월등히 높은 것으로 확인되었다. 또한 고순도 혈액응고 제9인자 제제인 Mononine, Octanyne, Berinin HS, Immunine STIM plus 600보다 순도가 더 높았다. Cryo-poor plasma 1,600 L를 원료로 사용했을 때 1 batch 당 250IU 분병제품 2,400병 이상, 500 IU 분병제품 1,200병 이상을 생산할 수 있었다.

• 대한화학회지
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• 제29권2호
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• pp.178-182
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• 1985

비철특수합금중 아연(II) 구리(II)와 마그네슘(II)을 양이온 교환수지(Dowex 50w${\times}$8, 80-100 mesh)와 음이온 교환수지(IRA-400)을 이용하여 이온교환크로마토그라프로서 분리하는 방법을 연구 하였다. 이온교환수지는 25 ${\times}$ 2cm ID 칼럼에 넣고 흐르는 속도는 0.30 ml/min으로 조절하였다. 아연(II), 구리(II), 마그네슘(II)와 같은 비철금속 이온들을 분리하기 위한 좋은 용리액의 조건은 다음과 같다. 0.5M $NaNO_3$ (pH 3.1), 0.2~0.5M HCl + 50~90% Acetone과 1M HAc + 0.1M NaAcf(pH 3.7)였으며 0.1M NaAc + 1M NaAc(pH 3.7), 0.5M HCl + 50% Acetone이 가장 좋은 용리액으로 판명되었다. 분리된 용출액은 원자흡광 광도계로 측정하였으며 특히 아연 (II)은 음이온 교환수지에서 0.12N HCl과 1.5N $NH_4OH$ 수용액으로 분리하고 E.D.T.A로 적정하였다.

• 고려인삼학회:학술대회논문집
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• 고려인삼학회 1998년도 Advances in Ginseng Research - Proceedings of the 7th International Symposium on Ginseng -
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• pp.160-167
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• 1998

Chemical studies of nitrogen compounds of Panax ginseng seem relatively rare, Probably due to the isolation difficulties, subsequently the investigations of biological activities are little. The experimental conditions were established for highly complete extraction of peptides (basic, acidic and neutral) from Panax ginseng. This task was achieved by applying the follow isolation procedure: 1 , the sequential extraction with water, 0.1% TFA in 20% acetonitril and buffer pH 6.5 (water-pyridine-acetic acid 100:3:900) : 2, fractionation by ultrafiltration : 3, n-butanol extraction 4, cation- and anion-exchange chromatography : 5, chromato-electrophoresis. The comparison of red ginseng (xylem Sl pith part) and red ginseng inside white (xylem Sc pith part) was also provided. To analyze the peptide mixture the chromato-electrophoresis method of separation was applied. Optimal conditions for peptides mapping of sample were explored. Our experiments revealed the quantitative difference of peptide between xylem & pith and phloem & cortex part. We have also found the qualitative difference in the composition of polypeptides between normal red ginseng (xylem Sc pith part) and red ginseng inside-white (xylem St pith part)

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권2호
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• pp.337-341
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• 2001

To isolate antifungal substances from Korean radish (Raphanus Sativus L.) seeds, various purification techniques such as DE52 cellulose anion exchange, SP-Sephadex C-25 cation exchange, and Sephadex G-50 gel filtration chromatographies were used. The molecular masses of two purified R. sativus antifungal proteins (RAPs) were estimated to be about 6.1 kDa (RAP-1) and 6.2 kDa (RAP-2) by SDS-PAGE, and 5.8 kDa(RAP-1) and 6.2 kDa (RAP-2 by a gel filtration chromatography, respectively. Purified proteins RAP-1 and 2 clearly exhibited different growth inhibitory activities against other microorganisms like Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae. Although they have similar molecular masses, both RAP-1 and 2 proteins are not identical because their microbial inhibitory actions were different. Therefore, RAP-1 could be a new antifungal protein when compared with the antifungal activities of 2S albumins, Rs-AFPs, Mj-AMPs, chitinase, glucanase, permatin, and ribosome inactivating proteins, all of which are anifungal proteins of plants.

• FOCUS: LIFE SCIENCE
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• 제1호
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• pp.1.1-1.4
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• 2024

This article provides comprehensive guidance on the maintenance, cleaning, regeneration, and storage of silica-based HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) columns. The general considerations emphasize the importance of using in-line filters and guard cartridges to protect columns from blockage and irreversible sample adsorption. While these measures help, contamination by strongly adsorbed sample components can still occur over time, leading to an increase in back pressure, loss of efficiency, and other issues. To maximize column lifetime, especially with UHPLC (Ultra-High Performance Liquid Chromatography) columns, it is advisable to use ultra-pure solvents, freshly prepared aqueous mobile phases, and to filter all samples, standards, and mobile phases. Additionally, an in-line filter system and sample clean-up on dirty samples are recommended. However, in cases of irreversible compound adsorption or column voiding, regeneration may not be possible. The document also provides specific recommendations for column cleaning procedures, including the flushing procedures for various types of columns such as reversed phase, unbonded silica, bonded normal phase, anion exchange, cation exchange, and size exclusion columns for proteins. The flushing procedures involve using specific solvents in a series to clean and regenerate the columns. It is emphasized that the flow rate during flushing should not exceed the specified limit for the particular column, and the last solvent used should be compatible with the mobile phase. Furthermore, the article outlines the storage conditions for silica based HPLC columns, highlighting the impact of storage conditions on the column's lifetime. It is recommended to flush all buffers, salts, and ion-pairing reagents from the column before storage. The storage solvent should ideally match the one used in the initial column test chromatogram provided by the manufacturer, and column end plugs should be fitted to prevent solvent evaporation and drying out of the packing bed.

• Applied Biological Chemistry
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• 제46권4호
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• pp.385-390
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• 2003

미국자리공(Phytolacca americana L.) 뿌리에서 항균 펩타이드를 분리하여 PAMP-r로 명명 하였다. 분리는 DEAE-cellulose, sephadex G-75, Mono S, Resource RPC등을 거쳐 이루어 졌으며 최종산물은 15% SDS-PAGE 에서 약 4,900 Da의 분자량을 보였다. PAMP-r는 광범위한 항균활성을 나타냈으며 온도와 pH변화에도 높은 안정성을 보였다. 항균활성은 $80^{\circ}C$에서 30분동안 유지될 뿐만 아니라 pH도 3.0의 산성에서부터 pH 8.0의 알카리에 이르기까지 광범위한 범위 안에서 안정하게 나타났다.

• 공업화학
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• 제27권6호
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• pp.633-638
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• 2016

본 연구에서는 상용화된 양이온교환수지, 음이온교환수지, 혼합이온교환수지 각각 3종을 이용하여 Cs과 I 등의 방사성이온을 포함하고 있는 오염수 중 방사성 이온을 분리하는 연구를 하였다. 실험은 상온에서 회분식으로 진행하였으며, 이온교환수지의 양을 달리하여 각각의 이온교환수지에 대한 Cs와 I의 제염성능을 비교하였다. 이온크로마토그라피 기기로 농도분석을 한 결과, D사의 이온교환수지의 대체적으로 이온교환능력이 높은 결과 값을 가졌으며, 공통적으로 이온교환수지의 양이 적을 때, 이온교환수지 질량 대비 제염성능이 높은 것을 알 수 있었다. D사의 양이온교환수지의 질량이 적을 때, Cs 이온에 대한 이온교환용량은 0.199 meq/g, 음이온교환수지의 I 이온에 대한 이온교환용량은 0.344 meq/g의 결과 값을 확인할 수 있었으며, 혼합이온수지를 사용했을 때에는 I 이온에 대한 이온교환용량이 0.33 meq/g으로, D사의 이온교환수지가 다른 이온교환수지에 비해 특히 I에 대한 이온교환능력이 높은 것을 알 수 있었다.

• 분석과학
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• 제14권4호
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• pp.291-299
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• 2001

사용후핵연료내 핵분열생성물중 Sm 동위원소 정량을 위한 분리 및 정제에 관한 연구를 수행하였다. 일차적으로 핵분열생성물 대신 여러 비방사성 금속이온(Cs, Ba, Gd, Eu, Sm 및 Nd)들로 구성된 모의용액을 시료로 사용하였다. Sm은 AG $1{\times}8$ 음이온교환수지관에서 1 M $HNO_3$/90% MeOH 용액으로 세척 후 0.5 M $HNO_3$/80% MeOH 용액으로 용리하였다. 용출액에 함유되어 있는 미량의 Ba을 제거하기 위하여 0.2 M alpha-hydroxyisobutyric acid 용액(pH 4.5-4.6)으로 전처리한 AG $50W{\times}8$ 양이온교환수지관에서 정제하였으며, 순수한 Sm을 90% 이상 분리, 회수할 수 있었다. 실제 PWR 사용후핵연료에 함유되어 있는 Sm의 분리 및 정제에 적용하여 용출액을 질량분석한 결과 Gd, Eu, Pm, Nd 및 BaO에 의한 동중원소 영향이 나타나지 않았다. $^{154}Sm$ 스파이크를 이용한 동위원소희석 질량분석법으로 사용후핵연료 중의 Sm 및 각각의 성분 동위원소($^{147}Sm$, $^{148}Sm$, $^{149}Sm$, $^{150}Sm$, $^{151}Sm$, $^{152}Sm$ and $^{154}Sm$)들을 정량하였다.