• 한국어병학회지
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• 제20권3호
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• pp.221-227
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• 2007

볼락은 산업적 잠재가치가 높은 어종으로 각광받으면서 양식 가능성에 대한 연구가 일부 진행되어 왔으나, 장내세균에 대한 연구는 미미한 실정이었다. 본 연구에서는 전남 돌산도 연안에서 채집된 자연산 볼락과 양식산 볼락의 장내세균총의 분포와 이들 세균들의 약제 감수성에 대하여 조사하였다. 두 분류의 볼락에서 분리된 균주의 16S rDNA 염기를 바탕으로 장내세균을 동정한 결과, 양식산 볼락의 장내에서는 Photobacterium group, Acinetobacter group과 marine sediment bacteria group이 우점하고 있었고, 자연산 볼락의 장내에서는 Photobacterium group Acinetobacter group, Bacillus group, Shewanella group, Staphylococcus group 및 marine sediment bacteria group이 우점하고 있었다. 자연산과 양식산 볼락의 장내세균의 약제 감수성 결과로는 본 연구에서 사용된 9종의 항균제 중 oxytetracycline와 oxolinic acid는 자연산과 양식산이 비슷한 수준의 감수성 나타냈으나, flumequine, erythromycin, norfloxacin, gentamycin, ofloxacin, enrofloxacin 및 ciprofloxacin은 평균 저지대에서 양식산 볼락의 장내세균이 자연산 볼락의 장내세균 보다 약간 낮은 감수성을 보였으나, 자연산 볼락의 장내세균 또한 감수성 시험 대조균주로 사용한 E. coli ATCC9637 보다 현저하게 낮은 감수성을 보였다. 이는 양식현장에서 사용되고 있는 항균물질이 자연 서식 어류생물군의 장내 세균에도 영향을 미칠 수 있음을 시사한다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권4호
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• pp.360-365
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• 2008

식품 내의 잔류 항생물질의 검사는 주로 미생물의 생육 억제 여부를 통한 생물학적인 분석을 이용한다. 이러한 방법은 여러 가지 계열의 항생제들에 대한 미생물의 민감성을 토대로 이용되고 있다. 그러나 현재 사용하고 있는 미생물들로는 동물용의약품으로 허가되어 식용동물에 사용되고 있는 점점 다양해지는 항생제 및 합성항균제를 식품에서 모두 검출할 수는 없다는 한계가 있다. 그러므로 본 연구는 검출 가능한 항생제 및 합성항균제 계열의 범위를 확대하고, 각 약품별 감도를 증진시키기 위한 새로운 방법들을 조사하였다. B. megaterium ATCC 9885, B. subtilis ATCC 6633, B. cereus ATCC l1778 and Geobacillus stearothermophilus (B. stearothermophilus) ATCC 10149를 사용한 검사의 민감성은 macrolides, quinolones와 monensin, chloramphenicol에 대한 검출 감도가 낮았다. 반면에 M. luteus(K. rhizophila) ATCC 9341는 macrolides에 대한 높은 검출 감도를 나타냈고, E. coli ATCC l1303는 quinolones와 aminoglycosides에 대한 높은 민감성을 나타냈다. 결론적으로, 두 균주의 추가로 검출가능한 항생제 및 합성항균제의 범위를 확대하였으며, 검출감도를 높일 수 있게 되었다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제48권4호
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• pp.327-334
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• 2016

최근 사람과 가축에 항균제의 과도한 사용으로 감염병을 일으키는 병원성 세균들의 항균제 내성이 증가하고 있다. 본 연구에서는 PCR과 염기서열분석법을 이용하여 충청지역 일개의 대학병원에 의뢰된 임상검체와 같은 지역에서 사육된 닭으로부터 분리된 P. mirabilis 균주를 대상으로 16S ribosomal RNA methyltransferase(RMTase) 유전자와 integron을 조사하였다. 또한 Repetitive extragenic palindromic sequence-based PCR (REP-PCR)을 이용하여 P. mirabilis 균주들의 역학적 연관성 조사하였다. 총 38균주의 P. mirabilis 중에서 임상검체로부터 분리된 7균주 (18.4%)만이 RMTases 유전자를 가지고 있었는데 이들은 모두 amikacin, tobramycin, 및 gentamicin에 내성을 나타냈다. 또한 대상균주 중 23균주(60.5%)가 class 1 integron을 가지고 있는 것으로 나타났으며 class 2 및 class 3 integron은 검출되지 않았다. 본 연구에서 확인된 integrons에는 aminoglycoside 내성유전자(aadA2, aadA5, aadA7, 및 aacCA5), ${\beta}$-lactmam 내성유전자($bla_{PSE}$), erythromycin 내성유전자(ereA), lincosamides 내성유전자(linF), 및 trimethoprim 내성유전자(dfrA12, dfrA17 및 dfrA32)등이 유전자 카세트로 포함되어 있었다. 본 연구결과 RMTase 유전자는 임상검체로부터 분리된 P. mirabilis 균주에만 확산되어 있었던 반면 class 1 integrons는 임상검체와 닭으로부터 분리된 P. mirabilis 균주에 광범위하게 확산되어 있음을 확인할 수 있었다. 게다가 닭으로부터 분리된 균주 중에는 동일한 REP-PCR 밴드패턴을 보인 균주들이 있었는데 이는 닭들 사이에서 P. mirabilis 균주가 수평확산 되었음을 의미한다. P. mirabilis 균주에서 항균제 내성유전자의 확산을 막기 위해서는 내성유전자 지속적인 모니터링과 감시가 필요할 것으로 사료된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권10호
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• pp.1733-1737
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• 2007

A total of 2,280 nonduplicate clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa, obtained nationwide from Korean non-tertiary care hospitals from 2002 to 2005, were identified and their susceptibilities to aminoglycosides, antipseudomonal penicillins, carbapenems, cephalosporins, monobactams, and quinolones were studied, together with their production of ${\beta}$-lactamases. Using disk diffusion and minimum inhibitory concentration tests, it was found that 2.9% of isolates were multidrug-resistant (MDR) P. aeruginosa. An EDTA-disk synergy test, PCR amplification with specifically designed primers, and direct sequencing of the PCR products showed that the $bla_{OXA-10}$, $bla_{VIM-2}$, $bla_{OXA-2}$, $bla_{OXA-17}$, $bla_{PER-1}$, $bla_{SHV-12}$, and $bla_{IMP-1}$ genes were carried by 34.3%, 26.9%, 3.0%,3.0%, 1.5%, 1.5%, and 1.5% of 67 MDR P. aeruginosa isolates, respectively. The prevalence of MDR P. aeruginosa was three-fold higher, compared with that from the United States. More than two types of ${\beta}$-lactamase genes were carried by 10.4% of isolates. The most prevalent ${\beta}$-lactamase genes were $bla_{VIM-2}$ and $bla_{OXA-10}$. This study is the first description of MDR P. aeruginosa trom non-tertiary care hospitals in Korea and the coexistence of the $bla_{VIM-2}$, $bla_{IMP-1}$, or $bla_{PER-1} in these clinical isolates.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제37권3호
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• pp.258-265
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• 2009

축산환경개선용 미생물 제품 중 시장점유율을 기준으로 상위제품 A, B,하위 제품 E, F와 현재 개발완료 되어진 C, D를 선정하여 생균수 측정과, 사료첨가용으로 사용이 금지된 항생제에 대한 내성 테스트를 실시하였다. 생균수 측정 결과 상위 점유율의 A, B사 제품은 표기상의 생균수와 일치하였으나, 하위 점유율을 차지하고 있는 E제품의 경우 함유균주나 효능에 대한 정보를 제공하고 않고 있을뿐더러 F사의 제품은 균수가 적게 측정되어 실제 표기사항과 일치하지 않았다. 항생제 내성실험결과 점유율에 따른 상관관계는 없었으나, B사를 제외한 제품의 대부분에서 내성균이 존재함을 확인하였다. Lincosimides 계열의 Lincomycicne과 Clindamycin의 경우 B사를 제외한 제품에서 내성균이 존재하였다. Penicillins 계열의 Amoxicillin, Ampicillin, Penicillin 및 Macrolide 계열의 Erythromycin 항생제는 B사와 E를 제외한 제품에서 내성균이 존재함을 확인하였다. Quinoline계열 Norploxacin 또한 B사와 E사를 제외한 제품에서 내성균을 보였으며 Neomycin의 항생제 또한 유사한 내성분포 결과를 나타내었다. Neomycin과 같은 Aminiglycosides계열의 Gentamycin, Streptomycin은 B사제품을 제외한 제품에서 내성을 나타내었다. 마지막으로 내성-균으로 사용 금지된 Tetracycline계열의 Oxytetracyclin은 12가지 항생제중 가장 높은 비율의 감수성을 나타내었으나 B, E사를 제외한 제품에서 내성균의 존재를 확인하였다. 실험결과 사용 금지된 항생제 품목임에도 불구하고 많은 제품에서 때 성균이 존재하였으며, 이에 따라 환경개선제 특성의 정확한 표기와 체계적인 유통 체계와 검증 과정이 필요하다고 사료된다.

• 한국수산과학회지
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• 제32권3호
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• pp.256-260
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• 1999

본 연구는 EEC 4-plate법과 그 변법 그리고 식품공전상 간이검사법으로써 어류질병의 예방 및 치료에 사용되는 28종류의 항균물질에 대한 최저 검출한계를 서로 비교하여 어체내 잔류 항균물질의 최적 간이검사법 (bioassay)으로서의 유효성을 확인하고자 하였다. 식품공전상 간이검사법은 PCs에 뛰어난 검출감도를 나타내었으며 AGs에 대하여 좋은 감도를 보였으나 TCs, MLs, NFs, QNs에 대해서는 낮은 검출감도를 나타내었다. 한편, SAs에 대하여는 대단히 저조한 감도를 보였다. EEC 4-plate변법은 TCs에 대하여 우수한 검출감도를 나타내었다. EEC 4-plate법 및 그 변법은 PCs, MLs, NFs, QNs, SAs에 대하여 상대적으로 높은 검출감도를 나타내었다. 시험법들은 모두 CMs에 대하여는 검출감도가 낮았다. 결국 EEC 4-plate 변법이 여러계열의 항균물질에 대해 검출감도가 뛰어나고 항균활성의 범위가 넓어 어체내 잔류 항균성물질을 가장 유효하게 스크리닝할 수 있는 간이검사법으로 확인되었다.

• 미생물학회지
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• 제41권2호
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• pp.105-111
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• 2005

다양한 균주들을 대상으로 무작위로 신물질을 스크리닝하는 방법은 많은 노력과 시간이 소요되는 방법이며, 신물질을 발견하는 비율도 계속 낮아지고 있다. 따라서 기존 균주들을 대상으로 microarray 기술을 이용한 target-directed screening기술의 개발은, 학문적 뿐만 아니라 산업적으로도 중요한 의미를 가진다. 본 연구에서는, 이미 분리된 방선균각각의 유전체를 대상으로 microarray 분석을 통해, 새로운 생리활성 물질 생산균주 및 생합성 유전자를 확보할 수 있는 기법을 개발하기 위한 기초실험을 수행하였다. 즉, 기존에 알려진 생리활성물질 생합성 유전자들을 확보하여 DNA chip을 제조하였으며, 유전체 염기서열이 밝혀진 S. coelicolor 균주를 대상으로 그 효율성을 검증하였다. 전체적으로 유전자 상동성이 높을수록 반응감도도 높은 편이었으나, 이러한 상환관계가 일치하지 않는 유전자들도 있었다. 이와 같은 문제는, probe 유전자의 G+C 비율$(\%)$을 서로 비슷하게 구성하거나, 반응조건을 최적화 시킨다면 DNA chip의 효율성을 더욱 높일 수 있을 것으로 판단된다. DNA microarray를 통한 생리활성물질 발굴 연구는 세계적으로도 보고된 바 없는 새로운 접근방법으로서, 본 연구에서 시도하고 있는 방법은 발굴 target과 대상을 지정하고 시도되기 때물에, 효율면에서 무작위 스크리닝과는 비교되지 않을 정도로 높을것으로 예상된다. 또한 본 연구와 같은 접근방법을 최적화 시킨다면, 방선균뿐만 아니라 다른 미생물부터 생리활성물질 및 생합성유전자 스크리닝에도 효과적으로 응용할 수 있을 것이다.

• 대한미생물학회지
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• 제13권1호
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• pp.7-16
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• 1978

환자(患者)로부터 분리(分離)한 103주(株)의 장구균(腸球菌)을 대상(對象)으로 항생제감수성검사(抗生劑感受性檢査)와 더불어 R plasmid에 의(依)한 약제내성전달(藥劑耐性傳達)을 실험(實驗)하였다. 전(全) 균주(菌株)에 대(對)한 MIC는 ampicillin이 $4{\mu}g/ml$로 가장 낮았으며 rifampin이 $16{\mu}g/ml$, amikacin과 chloramphenicol이 공(共)히 $125{\mu}g/ml$, tetracyclin이 $250{\mu}g/ml$이었고 분리균주(分離菌株) 중(中) $2,000{\mu}g/ml$ 고농도(高濃度)의 GM, KM 및 SM에 내성(耐性)을 보인 균주(菌株)는 각각(各各) 19주(株)(18.5.%), 27주(株)(26.2%) 그리고 22주(株)(21.4%)이었다. 가검물별(可檢物別) 분리균주(分離菌株)의 약제내성도(藥劑耐性度)는 뇨(尿)에서 분리(分離)된 균(菌)의 내성도(耐性度)가 가장 높았으며 각(各) 항생제(抗生劑)에 대(對)한 균종(菌種)의 약제내성도(藥劑耐性度)는 S. zymogenes의 내성도(耐性度)가 ampicillin과 rifampin을 제외(除外)한 기타(其他) 약제(藥劑)에 대(對)해 가장 높았다. 다제약제내성(多劑藥劑耐性)을 보인 28주중(株中) 17주(株)(61%)가 내성유형(耐性類型)의 일부(一部) 또는 전부(全部)를 전달(傳達)하였으며 이 중(中) 2주(株)만이 그 유형(類型)의 전부(全部)를 전달(傳達)하였고 내성전달빈도(耐性傳達頻度)는 $2{\times}10^{-4}-2{\times}10^{-6}%$이었다. 이상(以上)의 실험결과(實驗結果) 저자(著者)들은 우리나라에서 분리(分離)된 장구균(腸球菌)이 수종(數種)의 항생제(抗生劑)에 내성(耐性)이며 장구균(腸球菌)에 있어서도 약제내성전달(藥劑耐性傳達)이 R plasmid에 의(依)해 이루어짐을 결론(結論)지을 수 있었다.

• 대한미생물학회지
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• 제21권1호
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• pp.1-16
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• 1986

Fifty-one strains of Pseudomonas aeruginosa were isolated from various clinical specimens. Among them, 26 (51%) strains were gentamicin-resistant (Gm') and 25 (49%) were susceptible to gentamicin (Gm'). The frequencies of resistant strains to piperacillin (Pi), cefotaxime, moxalactam, cefoperazone (Cz), and amikacin (Ak) ranged from 21.6 to 31.4%, and $MIC_{50}$ of these drugs were lower than the critical concentrations of susceptibility and resistance. Thirty (58.8%) strains were multiply resistant to 12 or more drugs. All Gm' strains were multiply resistant to 12 or more drugs and one was resistant to all 18 drugs tested, while only four Gm' strains were multiply resistant to 12 drugs and the multiplicity of resistance of the other Gm' strains were less than 10 drugs. Resistance to Gm appeared to have a significant correlation with the resistance to tobramycin (Tb), Ak, Pi, and Cz. All Gm' strains were resistant to Tb and about 38.4 to 46.1% of them were resistant to Ak, Pi, and Cz. The incorporation of $Ca^{++}$ and $Mg^{++}$ ions in Mueller-Hinton agar (MHA) did not influence the MICs of Gm, Tb, carbenicillin (Cb), Pi, and Cz as compared with the results obtained in MHA without these ions. Gm strains were studied on the combined effect of beta-lactam antibiotics and aminoglycosides by the methods of checkerboard and modified paper strip diffusion. Most Gm' strains showed significant synergistic effects by the FIC index between Ak and three beta-lactam antibiotics; Cb, Pi, and Cz, but these results did not in agreement the results obtained through the method of modified paper strip diffusion test. In order to know the nature of the drug resistance of P. aernginosa, the plasmid profile analysis was studied. Agarose gel electrophoresis of lysates processed by the method of Kado and Liu showed one or more plasmids in 22 (43.1%) strains. A group of 19 strains showed at least one band of plasmid and three strains two bands. The range of the molecular weight of plasmids was 3.8 to 243 Mdal. All strains carrying large plasmids larger than 200 Mdal were isolated from wound specimens. Three Gm' strains also harboured the plasm ids of 13 to 203 Mdal.

• 대한미생물학회지
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• 제13권1호
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• pp.63-73
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• 1978

28 strains of Enterococci isolated at doctorless areas in Korea from Oct. 1976 through Mar. 1977 and 30 strains of Enterococci isolated at Seoul National University Hospital from Sep. 1976 through Dec. 1976 were examined for susceptibilities to 14 antimicrobial agents by agar dilution method. The susceptibilities of two groups to each antimicrobial agent were compared and incidence of resistant strains in each antimicrobial agent, incidence of multiply resistant strains and correlations in the antimicrobial susceptibility of 58 strains of Enterococci among 14 antimicrobial agents were analyzed. 1. With Tetracycline, Oxytetracline, Doxycycline, Minocycline and Erythromycin, the mean MIC's of Enterococci isolated at Seoul National University Hospital were 1.9-2.5 times higher than those of Enterococci isolated at doctorless areas, though there were no statistical significance. 2. Frequency of resistant strains in Enterococci isolated at Seoul National University Hospital was the highest with Cephalexin(100%), Gentamicin(100%), and Streptomycin(100%), followed by Kanamycin(93.3%), Carbenicillin(90%), Tetracycline(26.7%), Oxytetracycline(26.7%), Doxycycline(26.7%), Minocycline(20%), Erythromycin(10%), Troleandomycin(10%), Penicillin(6.7%), Cotrimoxazole(6.7%) and Ampicillin(0%). 3. Frequency of resistant strains in Enterococci isolated at doctorless areas was the highest with Kanamycin(100%) and Streptomycin(100%), followed by Cephalexin(96.4%), Gentamicin(96.4%), Carbenicillin(92.9%), Tetracycline(10.7%), Oxytetracycline(10.7%), Doxycycline(10.7%), Minocycline(10.7%), Cotrimoxazole(10.7%), Penicillin(3.6%), Ampicillin(0%), Erythromycin(0%), and Troeandomycin(0%). 4. In study with Penicillin, Ampicillin, Tetracycline, Cotrimoxazole, Erythromycin and Troleandomycin, there were no multiply resistant strains in Enterococci isolated at doctorless areas, while 4 strains of Enterococci isolated at Seoul National University Hospital showed multiple resistance. 5. There were high correlation in susceptibility of 58 strains of Enterococci among Tetracycline, Oxytetracycline, Doxycycline and Minocycline(correlation coefficients 0.86-0.97). Correlation coefficients of susceptibility among penicillin analogues(Penicillin, Ampicillin, Carbenicillin and Cephalexin) ranged between 0.75-0.89. Correlation coefficients of susceptibility among aminoglycosides(Kanamycin, Gentamicin and Streptomycin) ranged between 0.09-0.51.